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利用硅納米線芯片檢測miRNAs的研究

發(fā)布時(shí)間:2016-11-23 14:48

  本文關(guān)鍵詞:基于知識網(wǎng)絡(luò)的腫瘤學(xué)衍生與發(fā)展研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


《華東師范大學(xué)》 2014年

利用硅納米線芯片檢測miRNAs的研究

何靖  

【摘要】:背景:近年來,microRNAs (miRNAs)對于癌癥等疾病的診斷和預(yù)后作用越來越受到重視。目前常規(guī)檢測miRNAs的方法均需要標(biāo)記或擴(kuò)增,步驟較復(fù)雜。而最新的硅納米線傳感器具有靈敏度高、響應(yīng)快等特點(diǎn),在分子檢測中具有一定優(yōu)勢。本研究致力于研發(fā)一種可快速、直接檢測miRNAs的硅納米線生物傳感器。 方法:硅納米線芯片由多晶硅材料經(jīng)光刻制備而成,經(jīng)過2%(3-氨基丙基)三乙氧基硅烷((3-Aminopropyl) triethoxysilane, APTES)和1.25%戊二醛化學(xué)修飾之后,將未標(biāo)記的單鏈DNA (ssDNA)探針固定于生物傳感器表面,根據(jù)分子雜交的原理,通過比較測試前后的電阻值差異,來檢測miRNA標(biāo)準(zhǔn)品Let-7b和從人肝癌細(xì)胞HepG2提取的總RNA中snRNA U6。 結(jié)果:該硅納米線芯片檢測miRNA標(biāo)準(zhǔn)品Let-7b時(shí)檢測下限可達(dá)到1fM,并能在1nM樣品濃度條件下區(qū)分與Let-7b完全匹配和不匹配的序列。將其用于檢測HepG2總RNA中snRNA U6時(shí),檢測的樣品濃度下限達(dá)到0.2μg/mL。 結(jié)論:本研究顯示硅納米線芯片能夠至少從1fM濃度中檢測至miRNA標(biāo)準(zhǔn)品,并能夠從0.2μg/mL肝癌細(xì)胞總RNA中檢測到snRNA U6,在今后的研究中將改進(jìn)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)以期獲得更佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:華東師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R735.7
【目錄】:

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【共引文獻(xiàn)】

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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2 陳熙;qRT-PCR檢測胃癌中miRNAs的表達(dá)[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2011年

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本文編號:188464

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