本文選題：食管鱗癌 + 微小RNA-a�。� 參考：《山東醫(yī)藥》2017年16期

【摘要】：目的探討miR-449a對(duì)食管鱗癌細(xì)胞Eca-109增殖、遷移、侵襲的影響及其可能的機(jī)制。方法將食管鱗癌細(xì)胞Eca-109分為miR-449a組和NC組,分別轉(zhuǎn)染miR-449a-mimics和NC-mimics;采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)兩組miR-449a相對(duì)表達(dá)量,miR-449a組miR-449a相對(duì)表達(dá)量明顯高于NC組,證實(shí)上調(diào)miR-449a表達(dá)的Eca-109細(xì)胞模型建立成功。采用CCK-8法、平板克隆形成試驗(yàn)檢測(cè)兩組細(xì)胞增殖能力(分別以培養(yǎng)12、24、48 h吸光度值和克隆數(shù)表示),細(xì)胞劃痕試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力(以細(xì)胞之間的距離表示),Transwell小室試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力(以侵襲到下室的細(xì)胞數(shù)量表示),流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期比例。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和Western blotting法分別檢測(cè)兩組miR-449a直接靶基因E2F3 mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果 miR-449a組細(xì)胞培養(yǎng)12、24、48 h時(shí)的吸光度值及克隆數(shù)、細(xì)胞之間的距離、侵襲到下室的細(xì)胞數(shù)量均低于NC組(P0.05或0.01)。miR-449a組G1期細(xì)胞比例高于NC組,S期細(xì)胞比例低于NC組(P均0.05);兩組G2/M期細(xì)胞比例比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。miR-449a組E2F3 mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)量均低于NC組(P均0.01)。結(jié)論 miR-449a可抑制食管鱗癌細(xì)胞Eca-109的增殖、遷移和侵襲;抑制靶基因E2F3表達(dá)可能是其作用機(jī)制。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of miR-449a on the proliferation, migration and invasion of Eca-109 in esophageal squamous cell carcinoma cells and its possible mechanism. Methods the Eca-109 cells were divided into miR-449a and NC groups, miR-449a-mimics and NC-mimics were transfected respectively, and the relative expression of two groups of miR-449a and miR-449a relative expression in the miR-449a group were detected by real time fluorescence quantitative PCR method. The Eca-109 cell model for up regulation of miR-449a was successfully established. The Eca-109 cell proliferation ability of two groups was detected by CCK-8 method. The cell proliferation ability was detected by the culture of 12,24,48 h absorbency and clone number respectively. The cell migration energy was detected by the cell scratch test (expressed by the distance between cells), and the Transwell chamber test was used. The cell invasiveness of the cells (the number of cells invaded in the lower chamber) and the cell cycle ratio were detected by flow cytometry. The E2F3 mRNA and the relative expression of the two groups of miR-449a direct target genes were detected by real-time fluorescence quantitative PCR and Western blotting. The number of clones, distance between cells, and the number of cells that invaded the lower chamber were lower than that of group NC (P0.05 or 0.01), and the proportion of G1 cells in group.MiR-449a was higher than that in NC group, and the proportion of cells in S stage was lower than that in NC group (P 0.05), and there was no significant difference in the proportion of G2/M phase cells between the two groups (P0.05).MiR-449a group and the relative expression of protein was lower than that of the group (0.01 Conclusion miR-449a can inhibit the proliferation, migration and invasion of esophageal squamous cell carcinoma Eca-109, and inhibit the expression of target gene E2F3 may be its mechanism.

【作者單位】： 蚌埠醫(yī)學(xué)院研究生部;泰興市人民醫(yī)院;
【基金】：江蘇省“333工程”科研項(xiàng)目(BRA2015225)
【分類號(hào)】：R735.1

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本文編號(hào)：1871949