漢防己甲素對人鼻咽癌CNE1和CNE2細(xì)胞株的放療增敏作用
本文選題:漢防己甲素 + 鼻咽癌; 參考:《中國病理生理雜志》2017年09期
【摘要】:目的:探討最大非毒性劑量漢防己甲素(tetrandrine,Tet)對人鼻咽癌細(xì)胞株CNE1和CNE2的放療增敏機(jī)制。方法:分別采用最大非毒性劑量Tet(對CNE1細(xì)胞為1.5μmol/L;對CNE2細(xì)胞為1.8μmol/L)、4 Gy放療和最大非毒性劑量Tet聯(lián)合放療處理CNE1和CNE2細(xì)胞;流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞周期分布,Western blot檢測各組細(xì)胞γ-H2AX、cleaved caspase-3、p-CDC25C、CDK1、p-CDK1、cyclin B1、ERK和p-ERK的蛋白水平。結(jié)果:最大非毒性劑量Tet聯(lián)合放療后可上調(diào)CNE1和CNE2細(xì)胞中γ-H2AX的表達(dá)。放療組CNE1和CNE2細(xì)胞G_2/M期的比例分別為(18.09±0.42)%和(18.48±1.32)%,聯(lián)合處理組CNE1和CNE2細(xì)胞G_2/M期的比例降為(15.88±1.04)%和(13.80±0.82)%,與放療組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。聯(lián)合處理可增加放療所致的cleaved caspase-3的蛋白水平(P0.05)。不同濃度Tet處理CNE1和CNE2細(xì)胞后,p-CDC25C和p-CDK1的蛋白水平隨Tet濃度增加而升高(P0.05),CDK1的表達(dá)無明顯改變;最大非毒性劑量Tet不影響p-CDC25C、p-CDK1和CDK1的蛋白水平。在CNE1和CNE2細(xì)胞中,聯(lián)合處理可明顯降低放療引起的p-CDC25C和p-CDK1的蛋白水平(P0.05),上調(diào)放療后cyclin B1的表達(dá),而對總CDK1的表達(dá)無明顯調(diào)節(jié)作用;聯(lián)合處理可顯著抑制放療所致的pERK蛋白水平(P0.05)。結(jié)論:最大非毒性劑量Tet可以增加放療引起的CNE1和CNE2細(xì)胞的DNA斷裂及細(xì)胞凋亡,其放療增敏的機(jī)制可能與Tet調(diào)控ERK/CDC25C/CDK1/cyclin B1通路、去除放療導(dǎo)致的G2/M期阻滯有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to investigate the mechanism of radiosensitization of human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE1 and CNE2 by maximum nontoxic dose Tetrandrine Tet. Methods: CNE1 and CNE2 cells were treated with maximum nontoxic dose of tett (1.5 渭 mol / L for CNE1 cells, 1.8 渭 mol / L of CNE2 cells with 4 Gy radiotherapy and maximum nontoxic dose of Tet combined with radiotherapy). Cell cycle distribution in each group was detected by flow cytometry. Western blot was used to detect the protein levels of 緯 -H2AXCleaved caspase-3pCDC25, CDK1, CDK1, p-CDK1, cyclin B1, ERK and p-ERK in each group. Results: the expression of 緯 -H2AX in CNE1 and CNE2 cells could be upregulated after maximum nontoxic dose of Tet combined with radiotherapy. The ratio of G 2 / M phase of CNE1 and CNE2 cells in radiotherapy group was 18.09 鹵0.42% and 18.48 鹵1.32%, respectively. The ratio of G 2 / M phase of CNE1 and CNE2 cells in combined treatment group was 15.88 鹵1.04% and 13.80 鹵0.82% respectively, which was significantly higher than that in radiotherapy group (P 0.05). Combined treatment could increase the protein level of cleaved caspase-3 induced by radiotherapy (P 0.05). The protein levels of p-CDC25C and p-CDK1 in CNE1 and CNE2 cells treated with different concentrations of Tet were increased with the increase of Tet concentration, and the expression of P0.05 and CDK1 was not significantly changed, while the maximum non-toxic dose of Tet did not affect the protein levels of p-CDC25Cp-CDK1 and CDK1. In CNE1 and CNE2 cells, combined treatment significantly decreased the protein level of p-CDC25C and p-CDK1 induced by radiotherapy and up-regulated the expression of cyclin B1, but did not regulate the expression of total CDK1, while combined treatment significantly inhibited the level of pERK protein (P0.05) induced by radiotherapy. Conclusion: the maximum nontoxic dose of Tet can increase DNA fragmentation and apoptosis of CNE1 and CNE2 cells induced by radiotherapy. The mechanism of radiosensitization may be related to Tet regulation of ERK/CDC25C/CDK1/cyclin B1 pathway and removal of G 2 / M phase arrest induced by radiotherapy.
【作者單位】: 中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;
【基金】:廣東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.2014A030313142) 廣州市科技計(jì)劃對外科技合作專項(xiàng)(No.2013J4500013) 廣州市天河區(qū)科技計(jì)劃項(xiàng)目醫(yī)療衛(wèi)生專項(xiàng)(No.2013KW027)
【分類號(hào)】:R739.63
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,本文編號(hào):1871873
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