本文選題：Wdr5 + 原發(fā)性肝癌�。� 參考：《蘭州大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：目的:研究發(fā)現(xiàn)Wdr5在干細(xì)胞的分化、全能性維持以及腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用,下調(diào)Wdr5可以抑制成骨細(xì)胞的增殖,而上調(diào)Wdr5可以促進(jìn)膀胱癌細(xì)胞的增殖及自我更新能力。然而Wdr5對肝癌細(xì)胞增殖能力的影響未見報道。本研究擬通過構(gòu)建Wdr5干擾模型,采用慢病毒轉(zhuǎn)染的方法感染肝癌細(xì)胞后觀察肝癌細(xì)胞增殖能力的變化來探討其對肝癌細(xì)胞增殖能力的影響及其可能的機(jī)制,為原發(fā)性肝癌的診斷及臨床治療提供新的的思路及理論依據(jù)。方法:通過構(gòu)建Wdr5的shRNA模型shWdr5 A和shWdr5 B,并通過慢病毒轉(zhuǎn)染方法感染靶細(xì)胞(人肝癌細(xì)胞株Huh7和HepG2),用qPCR和Western blot方法檢測干擾后Wdr5的表達(dá)水平驗證感染效果。進(jìn)而通過克隆形成實驗和MTT法檢測下調(diào)或沉默Wdr5表達(dá)之后對肝細(xì)胞增殖的影響,并用qPCR和Western blot檢測Wnt通路中關(guān)鍵基因β-catenin表達(dá)水平的變化來探索Wdr5是否通過經(jīng)典Wnt/β-catenin通路,并調(diào)節(jié)關(guān)鍵基因β-catenin的表達(dá)而影響肝癌細(xì)胞的增殖。結(jié)果:成功構(gòu)建Wdr5的干擾模型后,通過慢病毒轉(zhuǎn)染方法感染肝癌細(xì)胞株Huh7和HepG2,qPCR和Western blot實驗結(jié)果顯示干擾后Wdr5的表達(dá)水平較對照組明顯下降。克隆形成實驗和MTT法結(jié)果顯示,當(dāng)Wdr5表達(dá)被沉默或下調(diào)后,肝癌細(xì)胞株Huh7和HepG2的克隆形成和細(xì)胞增殖能力顯著降低。進(jìn)一步通過qPCR和Western blot法檢測Wnt通路關(guān)鍵基因β-catenin表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)在Huh7細(xì)胞株中,Wdr5被干擾后,β-catenin的表達(dá)水平顯著降低。結(jié)論:Wdr5對肝癌細(xì)胞的增殖具有重要調(diào)節(jié)作用,下調(diào)Wdr5能抑制肝癌細(xì)胞的增殖,而這一作用的重要機(jī)制可能是通過經(jīng)典Wnt/β-catenin通路,并調(diào)節(jié)關(guān)鍵基因β-catenin的表達(dá)來實現(xiàn)的。
[Abstract]:Objective: Wdr5 plays an important role in stem cell differentiation, totipotent maintenance and tumorigenesis and progression. Down-regulation of Wdr5 can inhibit the proliferation of osteoblasts. Upregulation of Wdr5 could promote the proliferation and self-renewal of bladder cancer cells. However, the effect of Wdr5 on the proliferation of hepatoma cells has not been reported. The aim of this study was to investigate the effect of lentivirus transfection on the proliferation of hepatoma cells and its possible mechanism by constructing a Wdr5 interference model and observing the changes of the proliferation ability of hepatoma cells after infection with lentivirus. To provide a new way of thinking and theoretical basis for the diagnosis and clinical treatment of primary liver cancer. Methods: Wdr5 shRNA model shWdr5 A and shWdr5 B were constructed, and the target cells (Huh7 and HepG2) were infected by lentivirus transfection. The expression level of Wdr5 was detected by qPCR and Western blot methods. Then the effects of down-regulation or silencing of Wdr5 on the proliferation of hepatocytes were detected by clone formation assay and MTT assay. The changes of 尾 -catenin expression level in Wnt pathway were detected by qPCR and Western blot to explore whether Wdr5 passed through the classical Wnt/ 尾 -catenin pathway. The expression of 尾-catenin, a key gene, also affected the proliferation of hepatoma cells. Results: after successfully constructing the interference model of Wdr5, the expression level of Wdr5 was significantly decreased after lentivirus transfection of Huh7 and HepG2 qPCR and Western blot. The results of clone formation assay and MTT assay showed that when the expression of Wdr5 was silenced or down-regulated, the clone formation and proliferation of Huh7 and HepG2 were significantly decreased. Furthermore, the expression of 尾 -catenin, a key gene in Wnt pathway, was detected by qPCR and Western blot. It was found that the expression of 尾 -catenin was significantly decreased after the interference of Wdr5 in Huh7 cell line. Conclusion Wdr5 plays an important role in regulating the proliferation of HCC cells, and down-regulating Wdr5 can inhibit the proliferation of HCC cells. The important mechanism of this action may be through the classical Wnt/ 尾 -catenin pathway and the regulation of the expression of the key gene 尾 -catenin.
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.7

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 蔣小玲,鄧欣,聶廣,楊大國;剔毒護(hù)肝方及其拆方對人肝癌細(xì)胞增殖及端粒酶活性的影響[J];中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志;2004年02期

2 孫宏偉;沈鋒;吳孟超;;瞬時受體勢C可能存在介導(dǎo)肝癌細(xì)胞增殖的作用[J];腫瘤;2006年04期

3 田文禮;趙亞周;彭文君;;蜂膠對肝癌細(xì)胞增殖及其脂肪沉積的影響[J];食品科學(xué);2012年09期

4 楊春;陳文;鐘曉琳;王忠瓊;陳楓;夏紀(jì)毅;;丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白4B對肝癌細(xì)胞增殖的影響[J];山東醫(yī)藥;2012年32期

5 王靜;宗瑞強(qiáng);莫艷波;田國華;郝禮森;張國志;;無花果漿液對肝癌細(xì)胞增殖抑制作用研究[J];中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2014年04期

6 康九紅,魏亞明,鄭榮梁;二乙基二硫代氨基甲酸鈉對人肝癌細(xì)胞增殖、再分化與凋亡的作用(英文)[J];Acta Pharmacologica Sinica;2001年09期

7 胡輝,荊緒斌,蔡先彬;過氧化氫在乙醇抑制肝癌細(xì)胞增殖中的作用[J];臨床消化病雜志;2005年03期

8 史冬梅;馬天樂;涂水平;譚繼宏;喬敏敏;章永平;江石湖;;X-染色體相關(guān)凋亡抑制蛋白相關(guān)因子1抑制肝癌細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡的實驗研究[J];中華消化雜志;2006年10期

9 趙新;;兒茶素抑制肝癌細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)凋亡作用研究[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2012年10期

10 王迎春;劉炎芳;邢蘭花;楊旭;李小歡;;曲古抑菌素A對人肝癌細(xì)胞增殖凋亡影響及其機(jī)制的探討[J];中華腫瘤防治雜志;2013年06期

相關(guān)會議論文 前10條

1 徐艷敏;錢程;;低濃度阿霉素促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖[A];中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會2010年學(xué)術(shù)年會日程及論文匯編[C];2010年

2 田晶;周士勝;陶凌;董玲;楊安鋼;;尼氟滅酸對肝癌細(xì)胞增殖的影響[A];中國生理學(xué)會第21屆全國代表大會暨學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2002年

3 秦敏;白文元;譚莉莉;;白藜蘆醇抑制人肝癌細(xì)胞增殖與促進(jìn)其凋亡的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國消化病學(xué)術(shù)會議論文匯編（下冊）[C];2007年

4 鐘寧;董明;程寶泉;張尚忠;李延青;;大蒜素和阿霉素對裸小鼠皮下移植肝癌細(xì)胞增殖、分化和凋亡影響的實驗研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國消化病學(xué)術(shù)會議論文匯編（下冊）[C];2007年

5 陶立平;陶佳南;陶富山;;寬帶中遠(yuǎn)紅外線輻射對肝癌細(xì)胞增殖細(xì)胞核抗原的研究[A];第八屆全國紅外加熱暨紅外醫(yī)學(xué)發(fā)展研討會論文及論文摘要集[C];2001年

6 劉珊林;;抗氧化干預(yù)對腫瘤生長和肝癌細(xì)胞增殖的抑制作用研究[A];面向21世紀(jì)的科技進(jìn)步與社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展（下冊）[C];1999年

7 高金亭;鄭樹森;梁廷波;吳麗花;余松峰;金晶;吳李鳴;徐世國;;環(huán)孢素A和他克莫司聯(lián)合表阿霉素對肝癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響[A];2005年浙江省器官移植學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

8 高金亭;鄭樹森;梁廷波;吳麗花;余松峰;金晶;吳李鳴;徐世國;;環(huán)孢素A和他克莫司聯(lián)合表阿霉素對肝癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響[A];2005年浙江省外科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

9 任開環(huán);邵榮光;;MR-1基因功能研究:促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖、粘附和遷移[A];2009醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十一屆全國腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會議論文集[C];2009年

10 巴一;吳雄志;謝廣茹;陳丹;王偉;;守宮硫酸多糖對人肝癌細(xì)胞增殖與分化的影響[A];第四屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

相關(guān)重要報紙文章 前2條

1 何德功;日發(fā)現(xiàn)致腸癌和肝癌細(xì)胞增殖的酶[N];中國勞動保障報;2004年

2 ;乙型肝炎病毒x蛋白對人肝癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響[N];中國醫(yī)藥報;2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 楊思俊;癌基因RMP與抑癌基因PTEN的相互拮抗作用及其對肝癌細(xì)胞增殖的影響[D];蘇州大學(xué);2015年

2 馬孝明;MY06在肝癌細(xì)胞增殖及侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2015年

3 王貴明;SOX18基因?qū)Ω伟┘?xì)胞增殖、遷移及侵襲作用的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

4 崔靜;ARK5在肝癌組織中的表達(dá)及對肝癌細(xì)胞增殖、凋亡和侵襲的影響[D];鄭州大學(xué);2016年

5 周彥明;曲格列酮抑制肝癌細(xì)胞增殖及其作用機(jī)制的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

6 崔越宏;17AAG對肝癌細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移的抑制及其機(jī)制的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

7 魏雙;Ku80分子對人肝癌細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)制的研究[D];華中科技大學(xué);2011年

8 孫慧燕;Hsa-miR-486-5p抑制肝癌細(xì)胞增殖及侵襲的作用及機(jī)制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2012年

9 路欣;HSD17B4促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖及其機(jī)制的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

10 王琦;乙型肝炎病毒X蛋白突變體致癌作用及其信號傳導(dǎo)途徑的研究[D];南開大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 楊海洋;鈣通道蛋白STIM1&Orai1對肝癌細(xì)胞增殖、凋亡、侵襲作用的初步研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 彭云云;NLRC5靶向Wnt/β-catenin信號通路調(diào)控肝癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的功能及機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

3 黃道斌;葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78對肝癌細(xì)胞增殖、自噬及體外血管生成的影響[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2015年

4 周勇;TLR4調(diào)控腫瘤增殖相關(guān)蛋白CDK4、CDK6對HBV相關(guān)性肝癌細(xì)胞增殖的作用[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2015年

5 嚴(yán)曉娣;shRNA干預(yù)IGF-I受體活化對肝癌細(xì)胞增殖抑制及其分子機(jī)制研究[D];南通大學(xué);2014年

6 吳國慧;Wnt10b基因失活對人肝癌細(xì)胞增殖、周期、凋亡、遷移及侵襲的影響[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2015年

7 代航;MicroRNA-30a-5p對肝癌細(xì)胞增殖凋亡及侵襲轉(zhuǎn)移的實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

8 李鳳霞;Myrothecine A通過miR-221調(diào)控肝癌細(xì)胞增殖及樹突狀細(xì)胞成熟機(jī)制的研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2015年

9 肖澤林;乙肝病毒X蛋白通過SPHK1促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖的作用及其分子機(jī)制的研究[D];南開大學(xué);2015年

10 武承鳳;MIF通過ERK信號通路對肝癌細(xì)胞增殖的實驗研究[D];甘肅中醫(yī)藥大學(xué);2016年

，

本文編號：1867245