發(fā)布時間：2018-05-05 23:51

  本文選題：食管鱗癌 + RKIP��； 參考：《廣西醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的分析Raf激酶抑制蛋白(phosphatidylethanolamine-binding proteins,RKIP)和基質(zhì)金屬蛋白酶-10(Matrix metalloproteinase-10,MMP-10)mRNA和蛋白質(zhì)在食管鱗癌組織中的表達(dá)情況以及兩者之間的相互關(guān)系,并分析其表達(dá)的高低與臨床病理和預(yù)后之間的關(guān)系。方法收取42例食管鱗癌患者的手術(shù)標(biāo)本(2015年2月-2016年2月),提取癌和癌旁組織中的RNA,逆轉(zhuǎn)錄成cDNA后使用熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測RKIP和MMP-10在RNA水平的表達(dá)情況,探索二者表達(dá)與臨床病理的關(guān)系以及二者相關(guān)性,并使用免疫組織化學(xué)SP法檢測部分標(biāo)本的癌與癌旁組織的蛋白表達(dá),探究其表達(dá)差異。同時取2011-07—2014-11廣西醫(yī)科大學(xué)胸外科手術(shù)切除的食管鱗癌組織、癌旁組織的病理蠟塊,采用免疫組織化學(xué)SP法檢測檢其中RKIP和MMP-10蛋白的表達(dá),同樣分析其表達(dá)與臨床病理的關(guān)系和二者相關(guān)性,并作出預(yù)后分析;結(jié)果在新鮮組織標(biāo)本中RKIP和MMP-10表達(dá)的研究中發(fā)現(xiàn),癌旁正常組織中RKIP mRNA的表達(dá)量為鱗癌中的2.01倍,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=5.126,P=0.000);食管鱗癌組織中的MMP-10 mRNA的表達(dá)水平高于癌旁正常組織,為癌旁組織的2.08倍,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=5.983,P=0.000);RKIP和MMP-10的mRNA的表達(dá)量與患者的性別、年齡、分化程度均無關(guān)(P0.05),與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期有關(guān);RKIP mRNA的低表達(dá)和MMP-10 mRNA的高表達(dá)往往導(dǎo)致更晚的分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的傾向;RKIP mRNA和MMP-10 mRNA在RNA水平的表達(dá)同樣呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)(r=-0.527,P=0.000)。為了研究同一組織中RNA和蛋白表達(dá)的關(guān)系,同時對同批樣本中的35例組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)SP法進(jìn)行兩指標(biāo)蛋白水平的檢測,發(fā)現(xiàn)RKIP蛋白在癌組織中的表達(dá)明顯低于癌旁組織(x2=11.209,P=0.001),MMP-10蛋白在癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁組織(x2=23.333,P=0.000),RKIP和MMP-10的轉(zhuǎn)錄水平與翻譯水平的表達(dá)趨勢一致。而在生存分析資料的免疫組織化學(xué)的研究中發(fā)現(xiàn)RKIP在食管鱗癌組織、癌旁組織的陽性表達(dá)率分別為28.26%、67.39%,食管鱗癌組織中的RKIP陽性表達(dá)率明顯低于癌旁正常組織,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=28.227,P=0.001);MMP-10在食管鱗癌組織、癌旁組織的陽性表達(dá)率分別為71.74%、9.78%,食管鱗癌中MMP-10的陽性表達(dá)率明顯高于癌旁組織,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=73.127,P=0.000);RKIP和MMP-10的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.372,P=0.000);在與臨床病理學(xué)關(guān)系的研究中發(fā)現(xiàn)RKIP的表達(dá)僅與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P0.05);而MMP-10的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否以及TNM分期密切相關(guān)(P0.05),Kaplan-Meier生存分析得出RKIP陰性的生存率低于陽性組(P0.01);MMP-10陽性組的生存率低于陰性組(P0.01),Cox回歸分析得出淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、RKIP陰性表達(dá)以及MMP-10陽性表達(dá)均可作為食管鱗癌患者的獨(dú)立預(yù)后因子。結(jié)論RKIP和MMP-10在RNA和蛋白質(zhì)水平表達(dá)趨勢一致,且RKIP的低表達(dá)和MMP-10的高表達(dá)可能與食管鱗癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲以及轉(zhuǎn)移密切相關(guān),在食管鱗癌的診斷和評估有著很大的價值,并有可能作為食管鱗癌患者診療過程中的一個潛在的生物靶點(diǎn)。同時兩指標(biāo)的表達(dá)有很強(qiáng)的預(yù)后相關(guān)性,并且通過研究發(fā)現(xiàn)可視為獨(dú)立的預(yù)后因子。二者在食管鱗癌組織中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān),RKIP可能通下調(diào)MMP-10的途徑參與到食管鱗癌的侵襲、轉(zhuǎn)移等過程。
[Abstract]:Objective to analyze the expression of Raf kinase inhibitor (phosphatidylethanolamine-binding proteins, RKIP) and matrix metalloproteinase -10 (Matrix metalloproteinase-10, MMP-10) mRNA and protein in esophageal squamous cell carcinoma and the relationship between them, and analyze the relationship between the expression level and the clinicopathology and prognosis. Methods 42 cases of esophageal squamous cell carcinoma (February 2015 -2016 February) were collected to extract RNA from cancer and paracancerous tissues. After reverse transcription to cDNA, the expression of RKIP and MMP-10 at RNA level was detected by fluorescence quantitative PCR (qRT-PCR), and the relationship between the expression and the clinicopathology was explored and the correlation between the two groups was explored and the immunohistochemical S was used. P method was used to detect the protein expression of cancer and paracancerous tissue in some specimens, and to explore the difference in expression. At the same time, the expression of RKIP and MMP-10 protein in the tissue of the esophageal squamous cell resection in the Department of thoracic surgery of the Department of thoracic surgery of Guangxi Medical University was detected by the immunohistochemical SP method, and the expression and clinical analysis were also analyzed. The correlation of pathology and the correlation between the two and the prognosis analysis were made. Results in the study of the expression of RKIP and MMP-10 in fresh tissue specimens, the expression of RKIP mRNA in the normal tissue adjacent to the carcinoma was 2.01 times that of the squamous cell carcinoma (t=5.126, P=0.000), and the expression level of MMP-10 mRNA in the tissue of the esophageal squamous cell carcinoma was higher than that of the normal side of the carcinoma. The tissue, 2.08 times the para cancerous tissue, was statistically significant (t=5.983, P=0.000); the expression of mRNA in RKIP and MMP-10 was not related to the sex, age, and degree of differentiation of the patients (P0.05), related to lymph node metastasis and TNM staging; the low expression of RKIP mRNA and the high expression of MMP-10 mRNA tended to lead to a later stage and lymph node metastasis. The expression of RKIP mRNA and MMP-10 mRNA at RNA level was also negatively correlated (r=-0.527, P=0.000). In order to study the relationship between RNA and protein expression in the same tissue, the expression of two index proteins in 35 tissues in the same sample was detected by immunohistochemical SP method, and the expression of RKIP protein in cancer tissues was significantly lower than that in the same group. The expression of MMP-10 protein in the cancerous tissue (x2=11.209, P=0.001) was significantly higher than that of the para cancerous tissue (x2=23.333, P=0.000). The transcriptional level of RKIP and MMP-10 was consistent with the translation level. In the immunohistochemical study of survival analysis, RKIP was found in the squamous cell carcinoma of the esophagus, and the positive expression rate of the para cancer tissues was found. The positive expression rate of RKIP in the tissues of esophageal squamous cell carcinoma was significantly lower than that of normal tissues adjacent to the carcinoma (x2=28.227, P=0.001), and the positive expression rate of MMP-10 in the tissues of esophageal squamous cell carcinoma was 71.74% and 9.78% respectively, and the positive rate of MMP-10 in esophageal squamous cell carcinoma was significantly higher than that in the para cancerous tissue, and the difference was found. Statistical significance (x2=73.127, P=0.000); the expression of RKIP and MMP-10 was negatively correlated (r=-0.372, P=0.000). In the study of the relationship with clinicopathology, the expression of RKIP was only associated with lymph node metastasis (P0.05), and the expression of MMP-10 was closely related to lymph node metastasis and TNM stage (P0.05), and Kaplan-Meier survival analysis showed negative negative. The survival rate of the group was lower than that of the positive group (P0.01), the survival rate of the MMP-10 positive group was lower than the negative group (P0.01), the Cox regression analysis showed that the lymph node metastasis, the negative expression of RKIP and the positive expression of MMP-10 could be the independent prognostic factors of the patients with esophageal squamous cell carcinoma. Conclusion RKIP and MMP-10 are consistent with the expression trend of RNA and protein levels, and the low expression and M of RKIP. The high expression of MP-10 may be closely related to the occurrence, development, invasion and metastasis of esophageal squamous cell carcinoma. It is of great value in the diagnosis and evaluation of squamous carcinoma of the esophagus, and may be a potential biological target in the diagnosis and treatment of esophageal squamous cell carcinoma. At the same time, the expression of the two indicators has a strong prognostic correlation and is found through research. It can be seen as an independent prognostic factor. The expression of two in the squamous cell carcinoma of the esophagus is negatively correlated, and RKIP may be involved in the invasion and metastasis of esophageal squamous cell carcinoma through the way of reducing the MMP-10.

【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R735.1

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本文編號：1849806