本文選題：姜黃揮發(fā)油 + SH-SY5Y��； 參考：《貴州醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：研究背景:神經(jīng)母細(xì)胞瘤(Neuroblastoma,NB)是兒童顱外最常見(jiàn)的實(shí)體瘤[1],其發(fā)病率在兒童惡性腫瘤中居第4位[2]。起源于胚胎期神經(jīng)嵴細(xì)胞,由未分化的交感神經(jīng)細(xì)胞組成,因其具有惡性程度高、發(fā)生轉(zhuǎn)移早、死亡率高且預(yù)后差而被稱為兒童癌癥之王[3]。臨床上主要依靠外科手術(shù)、放射治療、化學(xué)藥物等綜合治療方法。為提高治療效果和預(yù)防復(fù)發(fā)及保證患兒生活質(zhì)量,在治療神經(jīng)母細(xì)胞瘤中,化學(xué)藥物因可作用于腫瘤的始終而成為不可或缺的手段,但臨床實(shí)踐證明,化學(xué)藥物普遍存在不同程度的毒副作用及耐藥特性[4,5]。因此,國(guó)內(nèi)外學(xué)者逐漸將研究方向轉(zhuǎn)向?qū)B的生物學(xué)、遺傳學(xué)特性及發(fā)病機(jī)制的研究,對(duì)尋找新的腫瘤治療方法、提高患兒的治愈率和改善患兒的遠(yuǎn)期預(yù)后具有重要的臨床價(jià)值。所以本實(shí)驗(yàn)選用神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞株來(lái)研究姜黃揮發(fā)油(turmeric volatile oil,TVO)的抗腫瘤作用,并研究其聯(lián)合順鉑(Cisplatin,DDP)的抗NB作用。本文分兩部分進(jìn)行闡述:第一部分闡述姜黃揮發(fā)油對(duì)神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞增殖及侵襲力的影響;第二部分探討姜黃揮發(fā)油聯(lián)合小劑量順鉑對(duì)神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞的抑制作用。第一部分姜黃揮發(fā)油對(duì)神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞增殖及侵襲力的影響目的探討姜黃揮發(fā)油(TVO)對(duì)神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞株增殖、凋亡、遷移及侵襲能力的影響。方法分別用不同濃度的TVO(1.25~160 mg/L)行體外干預(yù)SH-SY5Y細(xì)胞,應(yīng)用MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率;細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)160 mg/LTVO對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞遷移能力的影響;應(yīng)用Transwell細(xì)胞侵襲試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力;用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果隨著TVO濃度的升高及干預(yù)時(shí)間的延長(zhǎng),SH-SY5Y細(xì)胞存活率逐漸減低(P0.01),凋亡率逐漸增加;經(jīng)160mg/L TVO的培養(yǎng)液培養(yǎng)0、12、24h后,SH-SY5Y細(xì)胞遷移度明顯低于對(duì)照組(P0.01);隨TVO濃度增高,SH-SY5Y細(xì)胞侵襲能力逐漸減弱(P0.01),且藥物濃度達(dá)到160 mg/L時(shí),侵襲力與順鉑無(wú)明顯差異。結(jié)論TVO能有效的抑制SH-SY5Y細(xì)胞增殖、凋亡、遷移及侵襲的作用。第二部分TVO聯(lián)合小劑量DDP對(duì)神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞抑制作用的研究目的研究TVO聯(lián)合小劑量DDP對(duì)體外神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞的增殖、凋亡的影響,并初步探討TVO聯(lián)合DDP作用于SH-SY5Y細(xì)胞的化療增敏作用的分子機(jī)制。方法分別用TVO、DDP、TVO聯(lián)合DDP處理SH-SY5Y細(xì)胞,應(yīng)用MTT法檢測(cè)處理后細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用,并計(jì)算半數(shù)抑制濃度(IC50);根據(jù)MTT檢測(cè)結(jié)果設(shè)空白對(duì)照組、TVO組、DDP組和TVO聯(lián)合DDP組,在倒置顯微鏡下觀察各組細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài);用Caspase-3檢測(cè)試劑盒檢測(cè)SH-SY5Y細(xì)胞Caspase-3酶的表達(dá)情況;用流式細(xì)胞儀檢測(cè)SH-SY5Y細(xì)胞總凋亡率。結(jié)果單獨(dú)TVO及DDP組隨著各自濃度的升高SH-SY5Y細(xì)胞增殖抑制率逐漸升高(P0.01),其各自IC50分別為23.231mg/L及2.617mg/ml;不同濃度TVO聯(lián)合小劑量DDP(0.625、1.25、2.5、5mg/ml)作用于SH-SY5Y細(xì)胞48h后的增殖抑制率出現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì),且與單獨(dú)DDP組及對(duì)照組比較差異具有顯著性(P0.01);不同濃度TVO聯(lián)合0.625mg/ml DDP及2.5mg/LTVO聯(lián)合2.5mg/ml DDP表現(xiàn)出藥物的相加作用,其余聯(lián)合組均表現(xiàn)出藥物的協(xié)同作用。倒置顯微鏡下見(jiàn)DDP組和TVO聯(lián)合DDP組SH-SY5Y細(xì)胞脫落死亡明顯,尤以聯(lián)合組更明顯,比空白對(duì)照組及TVO組細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,且數(shù)量稀少。TVO聯(lián)合DDP(0.625、1.25、2.5mg/ml)組和單獨(dú)TVO組的Caspase-3酶活性隨著藥物濃度增加酶活性隨之增強(qiáng)(P0.01);單獨(dú)DDP組與對(duì)照組Caspase-3酶活性水平相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);聯(lián)合組與單獨(dú)DDP組Caspase-3酶活性水平相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)示聯(lián)合組、DDP組、TVO組與對(duì)照組相比差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意(P0.01);不同濃度TVO聯(lián)合同一濃度DDP和單獨(dú)該濃度的DDP組相比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),且隨著TVO濃度的升高細(xì)胞總凋亡率逐漸升高。結(jié)論TVO聯(lián)合小劑量DDP可以增強(qiáng)DDP對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞株的增殖抑制作用,且具有明顯的協(xié)同效應(yīng),TVO對(duì)其增敏作用的機(jī)制可能是TVO協(xié)助DDP特異性激活Caspase-3酶,從而誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Background : Neuroblastomas ( NB ) is one of the most common solid tumors in children , and its incidence rate is in the fourth place in the malignant tumor of childhood . The neural crest cells derived from embryonic stage consist of undifferentiated sympathetic nerve cells , which have a high degree of malignancy , early metastasis , high mortality and poor prognosis . The effects of volatile oil ( TVO ) on proliferation , apoptosis , migration and invasion of SH - SYY cells were studied by MTT assay . Compared with control group , the activity of Caspase - 3 in DDP group and DDP group was significantly higher than that in control group ( P0.01 ) .

【學(xué)位授予單位】：貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R739.4

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本文編號(hào)：1840805