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缺氧對乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞干性的影響

發(fā)布時間:2018-05-02 22:36

  本文選題:乳腺癌 + 缺氧 ; 參考:《南華大學(xué)》2015年碩士論文


【摘要】:目的:1、通過構(gòu)建人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞缺氧模型,檢測缺氧對MDA-MB-231細(xì)胞干細(xì)胞標(biāo)記物表達(dá)及自我更新能力、分化的情況,探討缺氧對MDA-MB-231細(xì)胞“干性”調(diào)控作用。2、初步探討Notch信號在缺氧環(huán)境下對乳腺癌干細(xì)胞“干性”維持的作用方法:1、利用化學(xué)制劑二氯化鈷(cobalt chloride Co Cl2)誘導(dǎo),構(gòu)建人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞缺氧模型。通過Western Blot檢測MDA-MB-231細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)因子(hypoxia-inducible factor-la,HIF-la)表達(dá)情況,驗(yàn)證細(xì)胞缺氧模型構(gòu)建成功。2、缺氧對MDA-MB-231細(xì)胞“干性”調(diào)節(jié)作用:采用平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞的自我更新能力,流式細(xì)胞儀檢測缺氧對MDA-MB-231的CD44+CD24-/low型細(xì)胞的表達(dá)情況,免疫印跡試驗(yàn)(Western blot)檢測干性標(biāo)志物蛋白乙醛脫氫酶1(aldehyde dehydrogenase 1ALDH1)的表達(dá)情況。3、Notch信號通路在缺氧環(huán)境下對乳腺癌干細(xì)胞“干性”調(diào)節(jié)作用的初步研究:采用Western blot檢測缺氧對乳腺癌干細(xì)胞Notch信號關(guān)鍵分子{Notch1、Hes-1、(Notch intercellular domain NICD)}表達(dá)的情況。結(jié)果:1、缺氧使MDA-MB-231細(xì)胞平板克隆能力明顯增強(qiáng)、CD44+CD24-/low細(xì)胞比例增多、干性標(biāo)記物蛋白表達(dá)增強(qiáng)。2、缺氧使Notch信號關(guān)鍵分子(Notch1、Hes-1、NICD)在MDA-MB-231細(xì)胞中表達(dá)增強(qiáng)。結(jié)論:1、缺氧可誘導(dǎo)乳腺癌MDA-MB-231干細(xì)胞“干性”維持或增強(qiáng)。2、Notch信號通路在缺氧對乳腺癌干細(xì)胞“干性”調(diào)節(jié)作用中發(fā)揮著重要作用。
[Abstract]:Objective to construct a hypoxia model of human breast cancer MDA-MB-231 cells to detect the expression of markers, self-renewal ability and differentiation of MDA-MB-231 stem cells induced by hypoxia. To investigate the effect of hypoxia on "dryness" of MDA-MB-231 cells, and to explore the effect of Notch signal on the maintenance of "dryness" of breast cancer stem cells in anoxic environment. The hypoxia model of human breast cancer MDA-MB-231 cells was established. The expression of hypoxia-inducible factor hypoxia-inducible factor-lahla (HIF-laA) in MDA-MB-231 cells was detected by Western Blot. The results showed that the hypoxia model was successfully constructed. The effect of hypoxia on the "dryness" of MDA-MB-231 cells was determined. Flow cytometry was used to detect the expression of hypoxia on CD44 CD24-/low type cells of MDA-MB-231. Western blotting to detect the expression of protein aldehyde dehydrogenase (1(aldehyde dehydrogenase 1ALDH1) in human breast cancer stem cells: a preliminary study on the role of Notch signaling pathway in the regulation of "dryness" of breast cancer stem cells under hypoxia: Western blot was used to detect hypoxia. Expression of Notch signal key molecule {Notch1Hes-1Hes-1 Notch intercellular domain NICD} in breast cancer stem cells. Results at 1: 1, hypoxia significantly increased the percentage of CD44 CD24-/low cells, increased the expression of dry marker protein, and increased the expression of Notch signal key molecule, Notch1Hes-1NICD, in MDA-MB-231 cells. Conclusion: 1, hypoxia can induce MDA-MB-231 stem cells to maintain or enhance the signal pathway of Notch in breast cancer, which may play an important role in the regulation of stem cell dryness by hypoxia.
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R737.9

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本文編號:1835776


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