本文選題：RNA干擾 + CD�。� 參考：《免疫學(xué)雜志》2017年01期

【摘要】：目的運(yùn)用RNAi慢病毒沉默CD59的表達(dá),觀察其對(duì)急性T淋巴細(xì)胞白血病Jurkat細(xì)胞株增殖、凋亡的影響。方法構(gòu)建CD59 RNAi-EGFP融合蛋白慢病毒載體,轉(zhuǎn)染急性T系白血病Jurkat細(xì)胞株,篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系,空病毒組為陰性對(duì)照,未處理的Jurkat細(xì)胞系作為空白對(duì)照;熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀觀察各組的細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率;ELISA檢測各組細(xì)胞CD59的表達(dá)情況;RT-PCR檢測各組CD59基因以及凋亡相關(guān)基因Bcl-2/Bax m RNA的表達(dá);CCK8表達(dá)檢測細(xì)胞增殖效率的改變;流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果熒光顯微鏡和FCM觀察轉(zhuǎn)染效率在90%以上;ELISA結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞CD59蛋白表達(dá)降低;RT-PCR結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組CD59、Bcl-2 m RNA表達(dá)水平降低(P0.05),Bax m RNA表達(dá)水平升高(P0.05);CCK8結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖效率明顯降低(P0.05);流式細(xì)胞儀結(jié)果顯示沉默CD59的表達(dá)能夠促進(jìn)細(xì)胞凋亡(P0.05)。結(jié)論沉默D59基因表達(dá)可抑制急性T系白血病Jurkat細(xì)胞株的增殖能力并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,為臨床急性T系白血病的治療提供了新靶標(biāo)、新思路。
[Abstract]:Objective to observe the effect of RNAi lentivirus on the proliferation and apoptosis of Jurkat cell line of acute T lymphocyte leukemia (AML) by silencing the expression of CD59. Methods CD59 RNAi-EGFP fusion protein lentivirus vector was constructed and transfected into Jurkat cell line of acute T-lineage leukemia. Stable transfected cell lines were selected. The empty virus group was negative control and the untreated Jurkat cell line was used as blank control. Fluorescence microscope and flow cytometry were used to observe the efficiency of cell transfection and Elisa to detect the expression of CD59 in each group. RT-PCR was used to detect the expression of CD59 gene and the expression of apoptosis-related gene Bcl-2/Bax m RNA. Apoptosis was detected by flow cytometry. Results fluorescence microscope and FCM showed that the transfection efficiency was more than 90%. The results of Elisa showed that the expression of CD59 protein in the experimental group was decreased. The result of RT-PCR showed that the expression of CD59 Bcl 2 m RNA decreased in the experimental group. The expression level of Bax m RNA in the experimental group was increased. The results showed that the expression level of CD59 protein in the experimental group was higher than that in the experimental group. The results of flow cytometry showed that silencing the expression of CD59 could promote cell apoptosis. Conclusion silencing the expression of D59 gene can inhibit the proliferation ability and induce apoptosis of Jurkat cell line of acute T-lineage leukemia, which provides a new target and new idea for clinical treatment of acute T-lineage leukemia.
【作者單位】： 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院;山東農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81273206)
【分類號(hào)】：R733.71

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;用生物工程分子防治白血病[J];浙江中醫(yī)雜志;2000年11期

2 殷慧君,劉樂宇;殘留白血病細(xì)胞的定量檢測及其臨床意義[J];中國小兒血液;2000年04期

3 ;白血病[J];國外科技資料目錄.醫(yī)藥衛(wèi)生;2000年03期

4 陸道培;根治白血病的道路[J];中華內(nèi)科雜志;2001年04期

5 ;白血病[J];國外科技資料目錄.醫(yī)藥衛(wèi)生;2001年02期

6 ;白血病[J];國外科技資料目錄.醫(yī)藥衛(wèi)生;2001年08期

7 ;中國科學(xué)家探索出白血病調(diào)控治療新模式[J];科技廣場;2002年05期

8 ;白血病重要致病因素被發(fā)現(xiàn)[J];發(fā)明與創(chuàng)新;2003年11期

9 余蓮,陳隆天;白血病患者血清腫瘤特異性生長因子水平及其與治療效果的關(guān)系[J];臨床血液學(xué)雜志;2003年01期

10 ;白血病[J];微量元素與健康研究;2003年05期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 陸化;丁燁;盧瑞南;吳雨潔;張建富;仇海榮;劉澎;李建勇;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)急性淋巴細(xì)胞白血病小鼠體內(nèi)白血病細(xì)胞生長的影響[A];第12屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

2 夏駿;周永烈;邱蓮女;高瑞蘭;;四嗪二甲酰胺阻滯白血病細(xì)胞周期及其機(jī)制的研究[A];2013年國家級(jí)“惡性血液系統(tǒng)疾病診治新進(jìn)展”學(xué)習(xí)班暨學(xué)術(shù)年會(huì)資料匯編[C];2013年

3 李慶華;藺亞妮;龐天翔;;RNA結(jié)合蛋白Sam68在白血病細(xì)胞中表達(dá)研究[A];第12屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

4 陳幸華;梁雪;張曦;高蕾;張誠;孔佩艷;彭賢貴;龔奕;王慶余;;人臍血源基質(zhì)細(xì)胞新型微環(huán)境對(duì)殘留白血病細(xì)胞的作用及機(jī)制探討[A];第12屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

5 歐陽仁榮;;21世紀(jì)初期治愈白血病?——白血病研究回顧與展望[A];中國臨床腫瘤學(xué)教育專輯（2001）——中國抗癌協(xié)會(huì)臨床腫瘤學(xué)協(xié)作中心（CSCO）第五屆年會(huì)論文集[C];2001年

6 許小平;費(fèi)新紅;高磊;江千里;;多藥耐藥微小殘留白血病模型的建立[A];第九屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2003年

7 陳立君;孫明艷;馬軍;;流式細(xì)胞儀雙色免疫熒光技術(shù)分析微量殘留白血病細(xì)胞的研究[A];慶祝黑龍江省免疫學(xué)會(huì)成立十周年（1993—2003）論文集[C];2003年

8 張忠玲;宋宇;李國忠;周晉;;白血病致顱內(nèi)靜脈竇血栓形成15例報(bào)告[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

9 岑建農(nóng);陳子興;李振江;邱橋成;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)白血病細(xì)胞的作用[A];2005年華東六省一市血液病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省血液病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2005年

10 李建勇;錢思軒;吳漢新;張閏;洪鳴;仇海榮;肖冰;;急性淋巴細(xì)胞白血病異基因造血干細(xì)胞移植后供者源白血病[A];2005年華東六省一市血液病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省血液病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2005年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 胡德榮;腺花素可誘導(dǎo)白血病細(xì)胞分化[N];健康報(bào);2012年

2 記者 夏茂盛;捷克白血病研究獲重大進(jìn)展[N];光明日?qǐng)?bào);2013年

3 時(shí)仲省;白血病貧血千萬別補(bǔ)鐵[N];健康時(shí)報(bào);2006年

4 主任醫(yī)師 容小翔;輸血會(huì)傳染上白血病嗎[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2007年

5 張忠霞;研究發(fā)現(xiàn)骨髓為白血病細(xì)胞提供“避風(fēng)港”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2007年

6 黃衍強(qiáng)　尚科;白血病患者康復(fù)須知[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2007年

7 記者 熊學(xué)莉　通訊員 曾理;“細(xì)胞導(dǎo)彈”點(diǎn)射白血病細(xì)胞[N];健康報(bào);2008年

8 胡曉震　本報(bào)主任記者 葉青 見習(xí)記者 魏宇佳;個(gè)體化治療：白血病不再是不治之癥[N];沈陽日?qǐng)?bào);2010年

9 本報(bào)記者 王彩歷 實(shí)習(xí)生 葉娜;白血病患者見曙光[N];衛(wèi)生與生活;2011年

10 白毅 張國清;“微移植”治療白血病取得突破[N];中國醫(yī)藥報(bào);2013年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 鄭曉輝;白血病細(xì)胞ADRM1的表達(dá)及其作用研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2014年

2 莊泳;轉(zhuǎn)錄因子AIOLOS在急性B淋巴細(xì)胞白血病中的表達(dá)及其功能的研究[D];山東大學(xué);2015年

3 許益笑;經(jīng)體外環(huán)路光動(dòng)力療法對(duì)白血病細(xì)胞的殺傷作用及機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

4 張帆;共同抑制哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶復(fù)合物2和熱休克蛋白90對(duì)白血病細(xì)胞的殺傷作用[D];中南大學(xué);2012年

5 丁光生;電磁輻射凈化自體造血干細(xì)胞移植物中殘留白血病細(xì)胞的機(jī)制研究[D];華南理工大學(xué);2002年

6 張鵬霞;齊墩果酸對(duì)人類白血病細(xì)胞的抑制作用及其機(jī)制的探討[D];吉林大學(xué);2008年

7 趙克溫;磷脂爬行酶1的表達(dá)調(diào)控及其在白血病細(xì)胞分化中的作用研究[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2005年

8 許文林;白血病細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子自分泌鏈作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2004年

9 郭萌;低氧和低氧模擬化合物誘導(dǎo)白血病細(xì)胞分化和凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2007年

10 蘆殿榮;“十一五”國家科技支撐計(jì)劃白血病課題設(shè)計(jì)特點(diǎn)與質(zhì)控管理體會(huì)[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 金文東;白細(xì)胞和白血病細(xì)胞熒光光譜特征研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

2 林黎明;白血病微環(huán)境中成骨細(xì)胞與白血病細(xì)胞相互作用研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

3 李亞飛;CD58在兒童B-ALL中的表達(dá)及其用于MRD檢測的可行性研究[D];鄭州大學(xué);2015年

4 李齊;白血病細(xì)胞糖代謝產(chǎn)物的分析[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

5 鐘錦潮;生物活性肽HP7抑制白血病細(xì)胞增殖的作用研究[D];福州大學(xué);2014年

6 孫曉曦;LukS-PV通過miR-125a-3p調(diào)控白血病細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2016年

7 王建玲;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分泌的exosomes在白血病細(xì)胞耐藥性中的作用研究[D];山東大學(xué);2016年

8 段寶敏;妊娠合并白血病22例臨床病例分析[D];山東大學(xué);2016年

9 陳亞;兒童白血病合并水痘臨床特征分析[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

10 王晉蜀;新甾醇類藥物NSC67657誘導(dǎo)白血病細(xì)胞HL-60單核系分化及其機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

，

本文編號(hào)：1815555