本文選題：彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤 + miR-29b��； 參考：《鄭州大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)是一組臨床和生物學(xué)特性各異的異質(zhì)性腫瘤,約占非霍奇金淋巴瘤(non-hodgkin’s lymphoma,NHL)的40%,其在發(fā)展中國(guó)家高達(dá)60%,而現(xiàn)有治療方法只能使40-50%的病人獲得臨床持續(xù)緩解。因此尋找新的分子標(biāo)志在臨床上對(duì)其診斷和治療有著一定的積極意義。Micro RNAs(mi RNAs)作為一種單鏈的非編碼小分子RNA,其長(zhǎng)度約為22-25個(gè)堿基對(duì)構(gòu)成,該類RNA在轉(zhuǎn)錄之后對(duì)基因的表達(dá)起到調(diào)控作用,根據(jù)抑制或是降解靶基因功能其分為兩種。研究表明,mi RNAs對(duì)免疫系統(tǒng)的調(diào)控,在體內(nèi)細(xì)胞的增殖分化和生長(zhǎng)發(fā)育起著一定的重要作用,對(duì)腫瘤的發(fā)生發(fā)展也發(fā)揮著一定的抑制或促進(jìn)作用。在不同的腫瘤中,不同的mi RNAs表達(dá)模式也不盡相同,因此在臨床上可作為預(yù)測(cè)、診斷以及治療的生物學(xué)標(biāo)志。研究表明mi R-29b作為mi RNAs中的一員,它可以沉默一些潛在的癌基因,抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng),誘導(dǎo)凋亡,發(fā)揮抑癌基因的作用。研究也表明,mi R-29b功能存在著異質(zhì)性,目前mi R-29b在DLBCL中的表達(dá)及功能還缺乏相應(yīng)的研究,因此本研究通過(guò)分析mi R-29b在DLBCL細(xì)胞系中的表達(dá)、功能,探討mi R-29b在DLBCL發(fā)生發(fā)展中的功能。目的了解DLBCL細(xì)胞系中mi R-29b的表達(dá)情況;觀察mi R-29b mimic和mi R-29b inhibitor在DLBCL兩種細(xì)胞系SU-DHL-8,SU-DHL-10的轉(zhuǎn)染率情況;探討mi R-29b對(duì)SU-DHL-8,SU-DHL-10兩種細(xì)胞系增殖情況的影響;研究mi R-29b對(duì)DLBCL兩種細(xì)胞系SU-DHL-8,SU-DHL-10細(xì)胞遷移能力的影響。研究mi R-29b對(duì)DLBCL兩種細(xì)胞系SU-DHL-8,SU-DHL-10細(xì)胞凋亡的影響。方法1、利用Trizol試劑提取淋巴細(xì)胞和人正常淋巴結(jié)組織中總RNA,根據(jù)mi R-29b設(shè)計(jì)的反轉(zhuǎn)錄引物及q RT-PCR引物;利用q RT-PCR方法檢測(cè)DLBCL細(xì)胞系中mi R-29b的表達(dá)情況。2、根據(jù)mi R-29b的序列合成mi R-29b mimic和mi R-29b inhibitor,將合成的mi R-29b mimic和mi R-29b inhibitor轉(zhuǎn)染入DLBCL細(xì)胞系中,通過(guò)q RT-PCR方法檢測(cè)mi R-29b的表達(dá)量。3、通過(guò)利用CCK-8細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)mi R-29b對(duì)DLBCL細(xì)胞系細(xì)胞增殖能力的影響;4、運(yùn)用Transwell遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)mi R-29b對(duì)DLBCL細(xì)胞系細(xì)胞遷移能力的影響,并通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的凋亡情況。結(jié)果1.通過(guò)q RT-PCR方法檢測(cè)DLBCL細(xì)胞系中mi R-29b的表達(dá)結(jié)果顯示,mi R-29b在人正常淋巴結(jié)組織中表達(dá)顯著高于SU-DHL-10和SU-DHL-8細(xì)胞系中的表達(dá)量(P0.05)。2.mi R-29b mimic和mi R-29b inhibitor在DLBCL細(xì)胞系中轉(zhuǎn)染效率結(jié)果顯示,隨著濃度的改變,mi R-29b inhibitor轉(zhuǎn)染的細(xì)胞數(shù)量變化不明顯,差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而隨著濃度的增加,mi R-29b mimic轉(zhuǎn)染的細(xì)胞數(shù)量顯著增加(P0.05)。3.分別轉(zhuǎn)染mi R-29b mimic和mi R-29b inhibitor之后可改變DLBCL細(xì)胞mi R-29b的表達(dá),和正常mi R-29b的表達(dá)量相比,mi R-29b mimic的轉(zhuǎn)染使mi R-29b的表達(dá)量提高了200-300倍,結(jié)果有顯著性差異(P0.05);mi R-29b inhibitor和對(duì)照組相比抑制了mi R-29b的表達(dá),使mi R-29b的表達(dá)量降低50%左右(P0.05)。4.采用CCK-8細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)mi R-29b對(duì)SU-DHL-8,SU-DHL-10細(xì)胞系增殖的影響。結(jié)果顯示:和對(duì)照組相比,上調(diào)mi R-29b能夠顯著抑制細(xì)胞的增殖能力(P0.05),而下調(diào)mi R-29b則細(xì)胞的增殖能力顯著增強(qiáng)(P0.05)。5.采用Transwell遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)mi R-29b對(duì)DLBCL細(xì)胞系細(xì)胞遷移能力的影響。結(jié)果顯示:和對(duì)照組相比,上調(diào)mi R-29b可以顯著抑制細(xì)胞遷移能力(P0.05),而下調(diào)mi R-29b則細(xì)胞的遷移能力顯著增強(qiáng)(P0.05)。結(jié)論1.mi R-29b在DLBCL中的低表達(dá),推測(cè)mi R-29b表達(dá)可能參與了彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。2.mi R-29b在DLBCL中可以發(fā)揮著抑癌基因的作用,這有望成為新的以mi RNA為基礎(chǔ)的腫瘤干預(yù)物,尚需更深入研究。
[Abstract]:Diffuse large B cell lymphoma (diffuse large B-cell lymphoma, DLBCL) is a heterogeneous group of heterogeneous tumors with different clinical and biological characteristics, accounting for 40% of non Hodgkin's lymphoma (non-Hodgkin 's lymphoma, NHL), which is up to 60% in developing countries, and the existing treatment methods can only make persistent remission in 40-50% patients. The new molecular markers have certain positive significance in the clinical diagnosis and treatment of.Micro RNAs (MI RNAs) as a single strand of non coding small molecule RNA, whose length is about 22-25 base pairs, and this class RNA plays a regulatory role in the expression of genes after transcription, and the root is suppressed or degrade target genes into two kinds. The study shows that MI RNAs plays an important role in the proliferation, differentiation and growth of the immune system in the body. It also plays a certain inhibitory or promoting role on the development and development of the tumor. In different tumors, different mi RNAs expression patterns are different, so it can be used as a prediction, diagnosis and treatment in clinical. The biological markers of therapy show that MI R-29b, as a member of MI RNAs, can silence some of the potential oncogenes, inhibit the growth of tumor cells, induce apoptosis and play the role of tumor suppressor gene. The study also shows that the MI R-29b function exists heterogeneity, and the expression and function of MI R-29b in DLBCL are still lack of corresponding research, therefore, the expression and function of MI R-29b in DLBCL are still lacking. In this study, the expression and function of MI R-29b in the DLBCL cell line were analyzed to explore the function of MI R-29b in the development of DLBCL. Objective to understand the expression of MI R-29b in the DLBCL cell line, and to observe the transfection rate of MI R-29b mimic and MI R-29b mimic. The effect of the proliferation of two -10 cell lines; the effect of MI R-29b on the migration of SU-DHL-8 and SU-DHL-10 cells in the DLBCL two cell lines. The effect of MI R-29b on the apoptosis of DLBCL two cell lines SU-DHL-8 and SU-DHL-10 cells. Method 1 The expression of MI R-29b in the DLBCL cell line was detected by the reverse transcription primers and Q RT-PCR primers, and the MI R-29b expression in the DLBCL cell line was detected by the Q RT-PCR method. The effect of MI R-29b on the proliferation of DLBCL cell lines was detected by CCK-8 cell growth test. 4, the effect of MI R-29b on the cell migration ability of DLBCL cell lines was detected by Transwell migration test, and the cell apoptosis was detected by flow cytometry. Results the expression of MI expression in DLBCL cell line was detected by Q RT-PCR method. The results showed that the expression of MI R-29b in human normal lymph nodes was significantly higher than that in SU-DHL-10 and SU-DHL-8 cell lines (P0.05).2.mi R-29b mimic and MI R-29b inhibitor in the DLBCL cell lines. As the concentration increased, the number of cells transfected by Mi R-29b mimic increased significantly (P0.05).3. transfected to MI R-29b mimic and MI R-29b inhibitor, which could be changed by 200-300 times compared with the expression of normal mimic. There was significant difference (P0.05); MI R-29b inhibitor inhibited the expression of MI R-29b and reduced the expression of MI R-29b by about 50% (P0.05).4. (P0.05).4. using CCK-8 cell growth test to detect the effect of MI cell proliferation. Proliferation ability (P0.05), and down regulation of MI R-29b, the proliferation ability of cells increased significantly (P0.05).5. using Transwell migration test to detect the effect of MI R-29b on the migration ability of DLBCL cell line cells. The results showed that up regulation of MI R-29b could significantly inhibit cell migration capacity (P0.05), while down regulation, the migration energy of cells was down regulated. Force significantly enhanced (P0.05). Conclusion the low expression of 1.mi R-29b in DLBCL, it is presumed that MI R-29b expression may be involved in the development of diffuse large B cell lymphoma..2.mi R-29b can play the role of tumor suppressor gene in DLBCL, which is expected to be a new tumor intervention based on MI RNA. It is still needed to be further studied.

【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R733.1

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本文編號(hào)：1807339