本文選題：肝細胞肝癌 + 血管緊張素Ⅱ　； 參考：《青島大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:(1)探討血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)及血管緊張素Ⅱ1型受體(angiotensinⅡtype 1receptor,ATl R)拮抗劑對人肝癌Hep G2細胞生物學(xué)行為及缺氧誘生因子-1α(hypoxia inducible factor-1alpha,HIF-1α)表達的影響。(2)研究ATl R拮抗劑對裸鼠人Hep G2原位肝癌模型腫瘤組織中HIF-1α表達的影響。方法:體外培養(yǎng)人肝癌HepG2細胞。24 h后以不同濃度(10-8~10-6mol/L)的AngⅡ和ATl R拮抗劑坎地沙坦分別處理,每12h取出一組采用CCK-8法檢測AngⅡ?qū)θ烁伟〩ep G2細胞增殖的影響,直至第60h。24h后用Transwell法檢測人肝癌Hep G2細胞侵襲能力,用細胞同質(zhì)黏附實驗檢測人肝癌Hep G2細胞黏附能力,用ELISA法檢測人肝癌Hep G2細胞HIF-1α的表達水平。構(gòu)建穩(wěn)定的人肝癌Hep G2細胞裸鼠模型,將符合實驗要求的成功模型按照隨機法分為5組,空白對照組(0.9%Na Cl)、坎地沙坦低劑量組(5mg/kg/d)、坎地沙坦中劑量組(10mg/kg/d)、坎地沙坦高劑量組(20mg/kg/d)及5-FU組(25mg/kg/d)。連續(xù)喂養(yǎng)2周,第15天處死裸鼠,剝離腫瘤組織。應(yīng)用RNA提取試劑盒提取腫瘤組織RNA,應(yīng)用RT-PCR法檢測各組腫瘤標本HIF-1αm RNA的表達差異。提取腫瘤組織總蛋白,應(yīng)用Western Blot法檢測各組腫瘤組織HIF-1α蛋白的表達水平。結(jié)果:AngⅡ能提高人肝癌Hep G2細胞增殖能力,且藥物作用隨著作用時間及作用濃度的增加而增強,當(dāng)Ang II作用濃度為10-7mo1/L,作用時間為48h時,促增殖作用達到最高峰,且該作用可以被坎地沙坦所拮抗。AngⅡ亦能促進人肝癌Hep G2細胞侵襲能力、黏附能力及HIF-1α的表達,并隨著Ang II濃度的提高肝癌細胞上述指標均增高,在Ang II濃度為10-7mol/L時,肝癌細胞上述指標達到最高峰,然而Ang II濃度進一步增高至10-6mol/L,肝癌細胞上述指標與10-7mol/L相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),但與對照組相比,差異仍有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)�？驳厣程箍梢宰钄嗌鲜鲎饔�,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。RT-PCR和Western Blot分析顯示,隨坎地沙坦灌胃劑量的增高,裸鼠腫瘤組織中HIF-1αm RNA和蛋白表達水平進行性降低,與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),坎地沙坦低劑量組與5-FU組相比較,表達量有顯著差異(P0.05)。結(jié)論:(1)AngⅡ可促進肝癌細胞的增殖、侵襲、黏附及HIF-1α的表達,AT1R拮抗劑可拮抗上述作用。(2)AT1R拮抗劑可抑制肝癌組織中HIF-1α的表達,繼而削弱肝癌組織耐缺氧能力及血管生成。
[Abstract]:Objective: to investigate the effects of angiotensin 鈪，

本文編號：1807107