本文選題：結(jié)直腸癌 + 外周血游離DNA　； 參考：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2016年博士論文

【摘要】：研究背景結(jié)直腸癌是世界上最常見的癌癥之一,隨著我國生活習(xí)慣和飲食結(jié)構(gòu)的改變以及人口老齡化進程的加快,在我國結(jié)直腸癌發(fā)病率近幾年呈上升趨勢。提高結(jié)直腸癌的早期診斷率對于及時發(fā)現(xiàn)、治療及改善患者預(yù)后非常重要,然而結(jié)直腸癌的早期診斷仍然有許多困難。血清腫瘤標(biāo)志物檢測是常用的結(jié)直腸癌早期篩查方法之一,然而其敏感度及特異度卻不盡如人意。近年來,外周血cf-DNA作為一種新的腫瘤標(biāo)志物在結(jié)直腸癌的早期診斷方面起到重要作用。本研究通過提取患者外周血cf-DNA及腫瘤組織DNA,進行外周血cf-DNA濃度測定、高通量外顯子測序及生物信息學(xué)分析,試圖找出對結(jié)直腸癌早期診斷有意義的相關(guān)位點；并通過免疫組化染色方法,初步了解PTEN蛋白、NOK蛋白在結(jié)直腸癌及正常結(jié)腸黏膜組織中的表達情況,了解其表達與腫瘤分化程度是否存在相關(guān)性可能。研究方法1、選取2015.9-2016.5期間于北京協(xié)和醫(yī)院初診為潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)直腸腺瘤、早癌、進展期癌的患者,通過腸鏡或手術(shù)方式收集腺瘤及腫瘤原發(fā)灶標(biāo)本和癌旁正常組織(同一例患者的癌組織與癌旁組織成對采集),同時收集患者外周血標(biāo)本。通過DNA提取、片段化、擴增、捕獲等步驟,檢測外周血cf-DNA濃度,并對樣本進行高通量外顯子測序。2、選取2015.1-2016.6于北京協(xié)和醫(yī)院接受手術(shù)治療的結(jié)腸癌患者腫瘤蠟塊,取距癌腫邊緣8cm以上鄰近無增生的正常結(jié)腸黏膜作對正常組織行自身對照,經(jīng)HE染色再次確認(rèn)原始組織學(xué)診斷后行PTEN及NOK免疫組化檢測。研究結(jié)果1、共獲得來自6個患者的外周血、原發(fā)灶及癌旁正常組織共19份樣本,經(jīng)外周血cf-DNA濃度測定,炎癥性腸病及結(jié)直腸癌病人外周血cf-DNA濃度均較結(jié)直腸腺瘤病人為高。2、初步結(jié)果顯示PTEN在正常結(jié)腸黏膜組織中的表達高于結(jié)腸癌組織,而NOK在腫瘤組織中表達則高于正常結(jié)腸黏膜組織,且NOK在中、高分化結(jié)腸癌組織中趨于胞膜分布。結(jié)論外周血cf-DNA濃度檢測結(jié)合高通量外顯子測序可能用于結(jié)直腸癌的輔助診斷,但還需要擴大樣本量及進一步實驗研究。PTEN的缺失、突變可能與結(jié)腸癌發(fā)生相關(guān),NOK可能在結(jié)腸癌的發(fā)生、發(fā)展過程中有一定作用,值得后續(xù)進一步實驗研究其分子機理及臨床應(yīng)用前景。
[Abstract]:Background Colorectal cancer is one of the most common cancers in the world. With the changes of living habits and diet structure and the acceleration of population aging, the incidence of colorectal cancer in China has been increasing in recent years. It is very important to improve the early diagnosis rate of colorectal cancer for timely detection, treatment and improvement of prognosis. However, there are still many difficulties in early diagnosis of colorectal cancer. Detection of serum tumor markers is one of the commonly used early screening methods for colorectal cancer, but its sensitivity and specificity are not satisfactory. In recent years, peripheral blood cf-DNA, as a new tumor marker, plays an important role in the early diagnosis of colorectal cancer. In this study, we extracted cf-DNA from patients' peripheral blood and tumor DNA, determined the concentration of cf-DNA in peripheral blood, sequenced high throughput exons and analyzed bioinformatics to find the relevant sites for early diagnosis of colorectal cancer. The expression of PTEN protein in colorectal cancer and normal colonic mucosa was studied by immunohistochemical staining, and the correlation between the expression and the degree of tumor differentiation was investigated. Methods 1. The patients who were first diagnosed as ulcerative colitis, colorectal adenoma, early cancer, advanced cancer in Peking Union Hospital from May to June 2015.were selected. The specimens of adenoma and primary tumor and adjacent normal tissue were collected by endoscopy or surgery. The cancer tissue and adjacent tissue of the same patient were collected in pairs and the peripheral blood samples were collected at the same time. The concentration of cf-DNA in peripheral blood was detected by DNA extraction, fragmentation, amplification and capture, and the samples were sequenced by high-throughput exon .2The wax pieces of colon cancer patients who underwent surgical treatment in Peking Union Hospital from January to June 2016 were selected. The normal colon mucosa above the edge of 8cm was used as a self control group. The original histologic diagnosis was confirmed by HE staining and PTEN and NOK were detected by immunohistochemistry. Results 1. A total of 19 samples of peripheral blood, primary focus and adjacent normal tissues from 6 patients were obtained. The cf-DNA concentration in peripheral blood was measured. The concentration of cf-DNA in peripheral blood of patients with inflammatory bowel disease and colorectal cancer was higher than that of patients with colorectal adenoma. The preliminary results showed that the expression of PTEN in normal colonic mucosa was higher than that in colon carcinoma. The expression of NOK in tumor tissues was higher than that in normal colonic mucosa, and NOK tended to be cellular membrane distribution in well-differentiated colon cancer tissues. Conclusion Peripheral blood cf-DNA concentration detection combined with high-throughput exon sequencing may be used in the auxiliary diagnosis of colorectal cancer, but it is necessary to expand the sample size and further study the deletion of .PTEN. The mutation may be related to the carcinogenesis of colon cancer. NOK may play a certain role in the development of colon cancer. It is worthy of further experimental study on its molecular mechanism and clinical application prospect.
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.34

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9 ;降低結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)有新療法[N];人民日報;2003年

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本文編號：1788517