本文選題：miR-a + 肺癌　； 參考：《中國腫瘤臨床》2017年07期

【摘要】：目的:研究微小RNA-200a(miR-200a)對肺癌細(xì)胞增殖的影響,并探討其分子機(jī)制。方法:采用Real-time PCR檢測15例非小細(xì)胞肺癌組織和對應(yīng)癌旁組織、人肺癌細(xì)胞株(A549、NCI-H520、SK-MES-1)及人正常肺支氣管上皮細(xì)胞株16HBE中miR-200a的表達(dá)水平。用CCK-8法檢測miR-200a對A549肺癌細(xì)胞增殖活性的影響。通過生物信息學(xué)方法預(yù)測miR-200a可能的靶基因,雙熒光素酶報告基因?qū)嶒灲Y(jié)合Real-time PCR和Western blot驗證miR-200a對靶基因YAP1的調(diào)控作用。CCK-8法檢測下調(diào)靶基因YAP1對A549肺癌細(xì)胞株增殖活性的影響。結(jié)果:miR-200a在非小細(xì)胞肺癌組織和肺癌細(xì)胞系中表達(dá)明顯降低(P0.01)。上調(diào)miR-200a表達(dá)后明顯抑制A549肺癌細(xì)胞的增殖活力(P0.01)。雙熒光素酶報告基因顯示miR-200a可以直接作用于靶基因YAP1的3'-UTR區(qū)域抑制熒光素酶活性(P0.01),Real-time PCR和Western blot檢測顯示上調(diào)miR-200a的表達(dá)能夠明顯下調(diào)A549肺癌細(xì)胞YAP1 mRNA和蛋白的表達(dá)水平(P0.01)。CCK-8法顯示下調(diào)YAP1的表達(dá)能夠明顯抑制A549肺癌細(xì)胞的增殖活性(P0.01)。結(jié)論:miR-200a通過靶向作用于YAP1基因來抑制肺癌細(xì)胞的增殖,從而在肺癌中發(fā)揮抑癌基因的功能。
[Abstract]:Aim: to study the effects of microRNA-200a- miR-200a on the proliferation of lung cancer cells and its molecular mechanism.Methods: Real-time PCR was used to detect the expression of miR-200a in 15 cases of non-small cell lung cancer (NSCLC) and its adjacent tissues, human lung cancer cell line A549 (NCI-H520SK-MES-1) and human normal pulmonary bronchial epithelial cell line (16HBE).The effect of miR-200a on proliferation of A549 lung cancer cells was detected by CCK-8 assay.The possible target genes of miR-200a were predicted by bioinformatics. The double luciferase reporter gene experiment combined with Real-time PCR and Western blot was used to verify the effect of miR-200a on the target gene YAP1. CCK-8 method was used to detect the effect of down-regulating target gene YAP1 on the proliferation of A549 lung cancer cell line.Results the expression of 1% miR-200a was significantly decreased in non-small cell lung cancer tissues and lung cancer cell lines.After upregulation of miR-200a expression, the proliferative activity of A549 lung cancer cells was significantly inhibited (P 0.01).Double luciferase reporter gene showed that miR-200a could directly inhibit luciferase activity in 3'-UTR region of target gene YAP1 Real-time PCR and Western blot showed that up-regulation of miR-200a expression could significantly down-regulate the expression of YAP1 mRNA and protein in A549 lung cancer cell line.The down-regulated expression of YAP1 could significantly inhibit the proliferation activity of A549 lung cancer cells.ConclusionTwo miR-200a can inhibit the proliferation of lung cancer cells by targeting YAP1 gene and thus play the role of tumor suppressor gene in lung cancer.
【作者單位】： 新汶礦業(yè)集團(tuán)中心醫(yī)院腫瘤科;山東大學(xué)附屬濟(jì)南市中心醫(yī)院胸外科;
【分類號】：R734.2

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本文編號：1769564