本文選題：結直腸癌 + Nav1.5��； 參考：《遵義醫(yī)學院》2016年碩士論文

【摘要】：目的:探討結直腸癌耐藥細胞遷移及侵襲力與Na_v1.5離子通道表達及耐藥細胞膜電流水平的關系,及Na_v1.5功能對結直腸癌耐藥細胞遷移及侵襲力影響的可能機制。方法:以人結直腸癌親本細胞(SW620)和耐奧沙利鉑細胞(SW620/Ox R)為研究對象,采用CCK-8法和Transwell小室比較SW620細胞與SW620/OxR細胞的增殖、遷移及侵襲力差異,分別運用蛋白質印跡法(Western blot,WB)及全細胞膜片鉗技術等檢測兩種細胞Na_v1.5、P-糖蛋白(P-glycoprotein,p-gp)、上皮間質化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)標志物E-鈣黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和N-鈣黏蛋白(N-cadherin,N-cad)表達及細胞膜Na+電流水平,觀察鈉離子通道抑制劑河豚毒素(Tetrodotoxin,TTX)對兩種細胞上述指標的影響。結果:與結直腸癌SW620細胞比較,SW620/OxR細胞的增殖力無顯著變化(P0.05),而SW620/OxR細胞的遷移力和侵襲力卻顯著增加(P均0.01),Na_v1.5α亞基、P-gp和N-cad蛋白表達水平顯著上調(P均0.01),E-cad蛋白表達水平顯著下調(P0.01),Na+電流水平也顯著升高(P0.05);TTX能顯著降低兩種細胞的遷移力和侵襲力(P0.05~P0.01),且下調Na_v1.5α亞基表達蛋白表達水平(P均0.05),而TTX能顯著上調SW620細胞E-cad蛋白表達水平及下調SW620/OxR細胞N-cad蛋白表達水平(P均0.05);TTX對兩種細胞的增殖力均無影響(P0.05)。結論:(1)結直腸癌耐藥細胞Na+內向電流增加可能源于Na_v1.5α亞基蛋白表達上調,并參與結直腸癌的多藥耐藥;(2)Na_v1.5功能增強能促進結直腸癌耐藥細胞上皮間質化發(fā)生;(3)TTX降低結直腸癌細胞的遷移及侵襲力,可能部分與其抑制或逆轉結直腸癌細胞上皮間質化有關。
[Abstract]:Aim: to investigate the relationship between the migration and invasion of drug-resistant cells in colorectal cancer and the expression of Na_v1.5 ion channel and the current level of drug-resistant cell membrane, and the possible mechanism of the effect of Na_v1.5 function on the migration and invasiveness of drug-resistant colorectal cancer cells.Methods: CCK-8 assay and Transwell chamber were used to compare the proliferation, migration and invasiveness of SW620 cells and SW620/OxR cells.Western blotWB) and whole-cell patch clamp technique were used to detect the expression of P-glycoprotein P-glycoprotein p-gpP, the markers of E-cadherin E-cadherin (E-cadherin N-cadherin N-cadherin N-cadherin) and N-cadherin N-cadherin (N-cadherin N-cadn), and the Na current level of cell membrane in two kinds of cells, including Epithelial-mesenchymal transition (EMTT) and N-cadherin N-cadherin (N-cadherin N-cadherin).To observe the effects of Tetrodotoxin TTX, a sodium channel inhibitor, on these two kinds of cells.Results: compared with SW620 cells of colorectal cancer, the proliferative power of SW620 / OxR cells did not change significantly (P 0.05), while the mobility and invasiveness of SW620/OxR cells increased significantly (P 0.01). The expression level of P-gp and N-cad protein of nav1.5 偽 subunit was significantly up-regulated.The down-regulation of P0.01P0.01TTX significantly decreased the migration and invasiveness of the two kinds of cells, and down-regulated the expression of Na_v1.5 偽 subunit protein, both P and 0.05, while TTX significantly up-regulated and down-regulated the expression of E-cad protein in SW620 cells.The level of N-cad protein expression in SW620/OxR cells was 0. 05% and 0. 05% respectively, and there was no effect on the proliferation of the two kinds of cells.Conclusion the increase of Na inward current in drug-resistant colorectal cancer cells may be due to the up-regulation of Na_v1.5 偽 subunit protein expression.The enhanced function of Nav1.5 in multidrug resistant colorectal cancer can promote the occurrence of epithelial stroma in colorectal cancer cells. TTX can reduce the migration and invasion of colorectal cancer cells, which may be partly related to its inhibition or reversal of epithelial interstitial degeneration of colorectal cancer cells.
【學位授予單位】：遵義醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.34

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本文編號：1751872