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血清miR-210的檢測及其在結(jié)直腸癌診斷中的應(yīng)用研究

發(fā)布時間:2018-04-12 11:59

  本文選題:結(jié)直腸癌 + miR-210。 參考:《山東大學(xué)》2015年碩士論文


【摘要】:目的:通過檢測結(jié)直腸癌(Colorectal cancer,CRC)患者中血清miR-210表達(dá)水平,分析其與患者臨床病理特征的相關(guān)性,并探討血清miR-210對CRC診斷的臨床意義。方法:1.通過逆轉(zhuǎn)錄實(shí)時熒光定量PCR(reverse transcription quantitative real-time PCR, qRT-PCR)檢測60例CRC患者血清(實(shí)驗(yàn)組)和60例來我院健康查體者(對照組)血清的miR-210的表達(dá)水平,分析實(shí)驗(yàn)組血清miR-210表達(dá)水平與其臨床病理參數(shù)間的關(guān)系。2.通過術(shù)后隨訪選取實(shí)驗(yàn)組中30例術(shù)后復(fù)發(fā)患者,檢測其術(shù)后1月和術(shù)后復(fù)發(fā)時患者血清中miR-210的表達(dá)水平,利用患者血清miR-210表達(dá)差異分析其動態(tài)變化趨勢。3.采用全自動電化學(xué)免疫分析儀檢測兩組受試者血清CA199及CEA的水平,繪制miR-210、CA199及CEA的ROC曲線,得出三者各自診斷結(jié)直腸癌的曲線下面積(AUC)。利用miR-210的ROC曲線,結(jié)合約登指數(shù)定義,得出miR-210的診斷臨界值。4.根據(jù)CEA和CA19-9試劑盒診斷參考值和實(shí)驗(yàn)求得的miR-210診斷臨界值,分別計(jì)算出120名受試者真假陽性例數(shù),即a、b、c、d值,運(yùn)用公式:敏感性=a/a+c;特異性=d/b+d;陽性預(yù)測值=a/a+b;陰性預(yù)測值=d/c+d;準(zhǔn)確率=(a+d)/(a+b+c+d),分別計(jì)算出三者診斷結(jié)直腸癌的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值及準(zhǔn)確率,由此比較CEA、CA19-9及miR-210對結(jié)直腸癌的診斷效能。結(jié)果:1.通過逆轉(zhuǎn)錄實(shí)時定量PCR方法檢測實(shí)驗(yàn)組和對照組血清miR-210水平得出,實(shí)驗(yàn)組患者血清miR-210的水平顯著高于對照組患者血清miR-210水平(P0.0001)。實(shí)驗(yàn)組患者血清miR-210表達(dá)水平分別與結(jié)直腸癌腫瘤大小、浸潤程度、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移及TNM分期有明顯相關(guān)性,統(tǒng)計(jì)得出P值分別為:0.037、0.031、0.001及0.003,均小于0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:實(shí)驗(yàn)組血清miR-210表達(dá)水平與患者性別、年齡大小、腫瘤分型及腫瘤分化程度無相關(guān)性(P均0.05)。2.實(shí)驗(yàn)組中30例術(shù)后隨訪復(fù)發(fā)患者行腹腔鏡輔助結(jié)直腸癌根治術(shù)后1月后血清miR-210表達(dá)較術(shù)前顯著降低(P0.001),而術(shù)后出院隨訪期間發(fā)生局部復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移時的血清miR-210表達(dá)水平較術(shù)后1月時顯著升高(P0.001)。3.通過繪制]miR-210、CEA及CA19-9診斷CRC的ROC曲線,分別得出三者的曲線下面積(AUC)為0.825、0.662及0.613。根據(jù)約登指數(shù)定義得出miR-210診斷CRC的臨界值為33.57。比較三者AUC值得出miR-210對CRC的診斷準(zhǔn)確性均高于CEA(Z=2.601,P0.01)及CA19-9(Z=3.253,P0.01)的準(zhǔn)確性。4.利用miR-210、CEA及CA19-9的診斷臨界值分別計(jì)算120名受試者真假陽性例數(shù),即a、b、c、d值,運(yùn)用公式:敏感性=a/a+c;特異性=d/b+d;陽性預(yù)測值=a/a+b;陰性預(yù)測值=d/c+d;準(zhǔn)確率=(a+d)/(a+b+c+d),計(jì)算出miR-210診斷結(jié)直腸癌的敏感性為73.3%,特異性為78.3%,陽性預(yù)測值為75.9%,陰性預(yù)測值為74.2%,準(zhǔn)確性為75%,均高于CEA診斷結(jié)直腸癌的敏感性(60%)、特異性(66.7%)、陽性預(yù)測值(64.3%)、陰性預(yù)測值(62.5%)、準(zhǔn)確性(63.3%)及CA19-9診斷結(jié)直腸癌的敏感性(50%)、特異性(65%)、陽性預(yù)測值(58.8%)、陰性預(yù)測值(56.5%)、準(zhǔn)確性(57.5%)。因此得出miR-210對結(jié)直腸癌的診斷效能高于CEA及CA19-9。結(jié)論:循環(huán)miR-210在結(jié)直腸癌患者中高表達(dá),檢測其水平有助于提高結(jié)直腸癌的診斷率,進(jìn)而有望成為一種新的結(jié)直腸癌診斷的非侵入性分子標(biāo)志物。
[Abstract]:Objective: through the detection of colorectal cancer (Colorectal, cancer, CRC) level of serum miR-210 expression in patients with analysis of its correlation with clinical pathological characteristics of the patients, and to explore the clinical significance of serum miR-210 in the diagnosis of CRC. Methods: 1. by real-time fluorescence quantitative PCR (reverse transcription quantitative real-time PCR reverse transcriptase, qRT-PCR) detection of 60 serum samples from patients with CRC (experimental group) and 60 cases of healthy persons (control group) the expression level of serum miR-210,.2. expression level analysis of serum miR-210 in experimental group and the clinical pathological parameters of the patients were followed up through the selection of experimental group in 30 cases of patients with postoperative recurrence, to detect the expression of miR-210 in serum of patients with the after January and postoperative recurrence, the differential expression of serum miR-210 in patients with analysis of the dynamic change trend of.3. was detected in two subjects using automatic electrochemical immunoassay analyzer. Serum CA199 and CEA levels, drawing miR-210, ROC curve and CA199 CEA, the three respective diagnosis of colorectal carcinoma. The area under the curve (AUC). The ROC curve of miR-210, combined with the Youden index definition, the miR-210 diagnostic critical value.4. according to the CEA and CA19-9 diagnostic kit and experimental reference values miR-210 diagnostic critical value, were calculated for 120 subjects and the number of positive cases, namely a, B, C, D, using the formula: =a/a+c sensitivity; specificity =d/b+d; positive predictive value and negative predictive value of =a/a+b; =d/c+d; accuracy rate = (a+d) / (a+b+c +d), to calculate sensitivity three, the diagnosis of colorectal cancer specificity, positive predictive value, negative predictive value and accuracy, which compared the diagnostic efficacy of CA19-9 and CEA, miR-210 in colorectal carcinoma. Results: 1. the experimental group by reverse real-time quantitative PCR detection method and the control group that the level of serum miR-210 Patients in the experimental group, the serum levels of miR-210 were significantly higher than the control group. The serum level of miR-210 (P0.0001) expression in the experimental group of serum miR-210 levels in patients with colorectal cancer and tumor size, tumor invasion, lymph node metastasis and TNM staging have obvious correlation, a statistical P value were 0.037,0.031,0.001 and 0.003 were less than 0.05. There was statistical significance in experimental group, the expression of serum miR-210 levels in patients with gender, age, tumor type and tumor differentiation degree of correlation (P 0.05).2. in the experimental group of 30 cases of postoperative follow-up recurrence underwent laparoscopic assisted radical resection of colorectal cancer after January after the expression of serum miR-210 decreased significantly (P0.001) during the postoperative follow-up, while serum miR-210 local recurrence or distant metastasis when the expression level was significantly increased after January (P0.001.3.) by drawing miR-210 and CA19-9], CEA. The ROC curve of broken CRC, three area under the curve (AUC) were obtained for 0.825,0.662 and 0.613. according to the critical value of Youden index definitions of miR-210 diagnosis for CRC 33.57. three AUC is miR-210 on the diagnostic accuracy of CRC was higher than that of CEA (Z=2.601, P0.01) and CA19-9 (Z=3.253, P0.01) the accuracy of.4. the use of miR-210, CEA and CA19-9 in the diagnosis of critical value were calculated in 120 subjects and the number of positive cases, namely a, B, C, D, using the formula: =a/a+c sensitivity; specificity =d/b+d; positive predictive value and negative predictive value of =a/a+b; =d/c+d; accuracy rate = (a+d) / (a+b+c+d). Calculate the sensitivity of miR-210 in diagnosis of colorectal cancer was 73.3%, the specificity was 78.3%, the positive predictive value was 75.9%, the negative predictive value was 74.2%, the accuracy was 75%, sensitivity was higher than that of CEA in the diagnosis of colorectal cancer (60%), specificity (66.7%), positive predictive value, negative predictive value (64.3%) (62.5%), The accuracy sensitivity (63.3%) and CA19-9 in the diagnosis of colorectal cancer (50%), specificity (65%), positive predictive value, negative predictive value (58.8%) (56.5%), accuracy (57.5%). Therefore the diagnostic efficacy of miR-210 for colorectal cancer is higher than that of CEA and CA19-9.. Conclusion: high expression of circulating miR-210 in patients with colorectal cancer the level of detection, help to improve the diagnosis rate of colorectal cancer, which is expected to become a new non-invasive diagnosis of colorectal cancer molecular markers.

【學(xué)位授予單位】:山東大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R735.34

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