左卡尼汀聯(lián)合多西他賽對(duì)GLC-82細(xì)胞增殖與凋亡影響研究
發(fā)布時(shí)間:2018-04-11 08:29
本文選題:GLC-細(xì)胞 + L-CNT; 參考:《中華腫瘤防治雜志》2017年04期
【摘要】:目的左卡尼汀(levocarnitine,L-CNT)在改善由化療藥物引起的心臟毒性和周?chē)窠?jīng)毒性方面有一定的作用。本實(shí)驗(yàn)旨在研究聯(lián)合應(yīng)用時(shí),L-CNT對(duì)多西他賽(docetaxel,DTX)抑制非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)GLC-82細(xì)胞增殖作用的影響,初步探討其作用機(jī)制。方法 MTT法檢測(cè)不同濃度L-CNT(0.625、1.25、2.5、5、10、20、40和80μg/mL)和DTX(0.01、0.1、1、5、10、20、40和80μg/mL)分別對(duì)GLC-82細(xì)胞增殖作用的影響,倒置顯微鏡觀察其形態(tài)的變化。以終濃度為1.25、20、80μg/mL L-CNT分別和DTX(9.301μg/mL)聯(lián)合,同時(shí)處理GLC-82細(xì)胞24h,MTT法檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞增殖作用的影響,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡的變化,蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)Bcl-2、Bax和ANT1蛋白表達(dá)的情況。結(jié)果與陰性對(duì)照組相比,L-CNT(1.25、20和80μg/mL)對(duì)GLC-82細(xì)胞作用24h后,促進(jìn)增殖率分別為(14.52±0.73)%、(27.03±1.21)%和(19.77±0.65)%,F=42.538,P=0.001;48h后分別為(11.37±0.13)%、(19.56±1.01)%和(14.89±0.51)%,F=52.119,P=0.001。與DTX(27.319μg/mL)單藥組相比,L-CNT(1.25、20和80μg/mL)、DTX聯(lián)合用藥組的細(xì)胞增殖率由(49.49±2.52)%增加至(52.64±2.43)%、(59.44±3.20)%和(53.15±2.37)%,F=7.412,P=0.011。與DTX(9.301μg/mL)單藥組相比,L-CNT(1.25、20和80μg/mL)、DTX聯(lián)合用藥組GLC-82細(xì)胞密度增大,細(xì)胞凋亡率由(24.67±1.95)%分別降低至(21.90±1.98)%、(14.38±2.35)%和(22.42±1.43)%,F=15.697,P=0.001。L-CNT、DTX聯(lián)合作用后,抑凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)增多,促凋亡蛋白Bax表達(dá)減少,同時(shí)ANT1蛋白表達(dá)降低。結(jié)論 L-CNT和DTX聯(lián)合應(yīng)用對(duì)GLC-82細(xì)胞增殖與凋亡有一定的影響,主要通過(guò)下調(diào)Bax和上調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá)以及影響線(xiàn)粒體膜通透性轉(zhuǎn)換孔的開(kāi)放和關(guān)閉,減弱DTX對(duì)細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用。
[Abstract]:The purpose of L-carnitine (levocarnitine, L-CNT) has certain cardiac toxicity and peripheral neurotoxicity caused by chemotherapy in improving. This experiment aims to study on combined application of L-CNT and docetaxel (docetaxel, DTX) on inhibition of non-small cell lung cancer (non-small cell lung cancer, NSCLC) effect on the proliferation of GLC-82 cells and explore its the mechanism of different concentrations of L-CNT. The detection method of MTT (0.625,1.25,2.5,5,10,20,40 and 80 g/mL) and DTX (0.01,0.1,1,5,10,20,40 and 80 g/mL respectively) effect on the proliferation of GLC-82 cells, the morphological changes observed under inverted microscope. The final concentration of 1.25,20,80 g/mL and DTX L-CNT respectively (9.301 g/mL), and GLC-82 24h cells, to detect the effects of cell proliferation induced by MTT method. The change of cell apoptosis was detected by flow cytometry, detection of Bcl-2 protein blot, Bax and ANT1. 鐧借〃杈劇殑鎯呭喌.緇撴灉涓庨槾鎬у鐓х粍鐩告瘮,L-CNT(1.25,20鍜,
本文編號(hào):1735210
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