本文選題：口腔鱗狀細(xì)胞癌 + hnRNP��； 參考：《武漢大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：背景:口腔鱗狀細(xì)胞癌(Oral squamous cell carcinoma,OSCC)是人類頭頸部最常見(jiàn)的惡性腫瘤,具有高死亡率,是影響人類健康的重大疾病之一,但其發(fā)生、發(fā)展的機(jī)制并沒(méi)有被完全研究清楚。核不均一核糖核蛋白(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein,hnRNP)是一個(gè)蛋白超家族,種類繁多,其中hnRNP L是一個(gè)具有多種功能的可變剪切調(diào)控因子,參與一系列與RNA有關(guān)的生物學(xué)過(guò)程,如染色質(zhì)修飾、無(wú)內(nèi)含子mRNA的出核、poly(A)位點(diǎn)的選擇、維持mRNA的穩(wěn)定等。目前越來(lái)越多的研究表明,hnRNP L與腫瘤的形成和發(fā)展都有著重要關(guān)聯(lián),然而對(duì)于hnRNP L與口腔鱗狀細(xì)胞癌的關(guān)系仍未知。目的:本研究的目的是探索hnRNP L與口腔鱗狀細(xì)胞癌的關(guān)系及其可能存在的調(diào)控機(jī)制。方法:1.應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法,檢測(cè)hnRNP L在口腔鱗狀細(xì)胞癌組織和正�？谇徽衬そM織中的表達(dá)情況,并與SRSF3的表達(dá)水平進(jìn)行相關(guān)性分析。2.應(yīng)用轉(zhuǎn)染技術(shù)降低或增強(qiáng)293細(xì)胞和CAL27細(xì)胞中hnRNP L或SRSF3的表達(dá),通過(guò)免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)hnRNP L和SRSF3的表達(dá)情況。3.應(yīng)用RNAi技術(shù)降低CAL27細(xì)胞中hnRNP L的表達(dá),通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)SRSF3的轉(zhuǎn)錄水平和外顯子4的可變剪切。結(jié)果:1.HnRNP L在口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)程度顯著高于其在正常口腔粘膜組織中的表達(dá)程度,且hnRNP L與SRSF3在口腔鱗癌組織中的表達(dá)水平呈正相關(guān)的關(guān)系。2.降低或增強(qiáng)293細(xì)胞和CAL27細(xì)胞中hnRNP L的表達(dá)后,SRSF3的表達(dá)也降低或增強(qiáng);降低293細(xì)胞和CAL27細(xì)胞中SRSF3的表達(dá)后,hnRNP L的表達(dá)也降低。3.抑制CAL27細(xì)胞中hnRNPL的表達(dá)后,SRSF3mRNA的整體轉(zhuǎn)錄水平降低,包含外顯子4的剪切異構(gòu)體的相對(duì)比例增高。結(jié)論:HnRNP L在口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中高表達(dá),且與SRSF3在口腔鱗癌中的表達(dá)呈正相關(guān)。HnRNP L可能通過(guò)轉(zhuǎn)錄水平和轉(zhuǎn)錄后水平的共同作用來(lái)調(diào)控SRSF3的表達(dá),hnRNP L能夠調(diào)控SRSF3外顯子4的可變剪切,SRSF3可能是hnRNP L的靶基因。
[Abstract]:Background: oral squamous cell carcinoma (OSCC) is the most common malignant tumor in human head and neck. It has a high mortality rate and is one of the major diseases affecting human health. However, the mechanism of its occurrence and development has not been fully studied.Nuclear heterogeneous nuclear ribonucleoprotein (RNPs) is a superfamily of proteins, in which hnRNP L is a variable shear regulator with many functions involved in a series of biological processes related to RNA, such as chromatin modification.The selection of nucleocapsid polyanus A (PPA) site in mRNA without intron, maintaining the stability of mRNA, etc.At present, more and more studies show that hnRNP RNP L is associated with tumor formation and development. However, the relationship between hnRNP L and oral squamous cell carcinoma is still unknown.Objective: to explore the relationship between hnRNP L and oral squamous cell carcinoma and its possible regulatory mechanism.Method 1: 1.Immunohistochemical staining was used to detect the expression of hnRNP L in oral squamous cell carcinoma (OSCC) and normal oral mucosa.The expression of hnRNP L or SRSF3 in 293 cells and CAL27 cells was decreased or enhanced by transfection technique. The expression of hnRNP L and SRSF3 was detected by Western blotting.RNAi technique was used to reduce the expression of hnRNP L in CAL27 cells. Transcriptional level of SRSF3 and variable shearing of exon 4 were detected by reverse transcription PCR.Results 1. The expression of HnRNP L in oral squamous cell carcinoma was significantly higher than that in normal oral mucosa, and there was a positive correlation between the expression of hnRNP L and SRSF3 in oral squamous cell carcinoma.After decreasing or enhancing the expression of hnRNP L in 293 cells and CAL27 cells, the expression of SRSF3 in 293 cells and CAL27 cells was also decreased or enhanced, and the expression of SRSF3 RNP L in 293 cells and CAL27 cells was also decreased.After inhibiting the expression of hnRNPL in CAL27 cells, the overall transcription level of SSRSF3 mRNA decreased, and the relative proportion of the shearing isomers containing exon 4 was increased.ConclusionThe high expression of% HnRNP L in oral squamous cell carcinoma is found.HnRNP L may regulate the expression of SRSF3 by the interaction of transcription level and posttranscriptional level. HnRNP L may be the target gene of hnRNP L by regulating the variable shearing of SRSF3 exon 4.
【學(xué)位授予單位】：武漢大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R739.8

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本文編號(hào)：1731959