本文選題：腫瘤標(biāo)志物　切入點(diǎn)：比色生物傳感　出處：《濟(jì)南大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：腫瘤標(biāo)志物(Tumor Marker)是出現(xiàn)在血液和組織中與腫瘤有關(guān)的分子,其檢測對腫瘤患者的診斷有重要意義。因此,發(fā)展一種早期靈敏檢測腫瘤標(biāo)志物的方法對臨床研究和治療至關(guān)重要。近年來,基于納米材料類過氧化物酶活性的比色生物傳感由于成本低、易于制備和實(shí)用等優(yōu)點(diǎn)而受到研究者越來越多的關(guān)注,比色生物傳感的關(guān)鍵是將檢測這一事件轉(zhuǎn)化為顏色的變化并且肉眼可識別。與生物酶相比,人工模擬酶具有穩(wěn)定的催化活性,耐酸堿和溫度能力強(qiáng),對蛋白質(zhì)變性不敏感和生產(chǎn)成本低等優(yōu)點(diǎn)。在人工模擬酶中,特別是無機(jī)納米材料模擬生物酶由于其獨(dú)特的大小、形狀、低毒性和高生物相容性等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于比色生物傳感。本論文主要以制備的具有類過氧化物酶活性的納米粒子Pd-Cu納米粒子和NH_2-GS@Pt-Pd-Ru納米復(fù)合物為類過氧化物酶敏感材料,采用比色技術(shù),分別建立了檢測癌胚抗原(CEA)和甲胎蛋白(AFP)的比色生物傳感新方法。在過氧化氫存在的條件下,具有類過氧化物酶活性的Pd-Cu納米粒子和NH_2-GS@Pt-Pd-Ru納米復(fù)合物可以催化辣根過氧化物酶的底物3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)產(chǎn)生顏色反應(yīng),并且與辣根過氧化物酶相似,Pd-Cu納米粒子和NH_2-GS@Pt-Pd-Ru納米復(fù)合物的催化活性依賴于pH、溫度和過氧化氫濃度。具體研究內(nèi)容如下:(1)癌胚抗原(CEA)是結(jié)腸癌的一種特異性標(biāo)志物并被廣泛接受作為結(jié)腸癌診斷附屬物。因此,探索一種簡單、廉價(jià)、快速、靈敏檢測血清中CEA的檢測方法,對結(jié)腸癌患者的的臨床診斷有重要意義。本文根據(jù)自己探索的方法合成了介孔狀的Pd-Cu納米粒子,并用透射電鏡(TEM)、X射線衍射譜(XRD)和能量散射X-射線圖譜(EDS)進(jìn)行表征。類過氧化物酶活性研究發(fā)現(xiàn),制備的Pd-Cu納米粒子可以催化H_2O_2氧化TMB發(fā)生顯色反應(yīng),其對H_2O_2和TMB的米氏常數(shù)分別為427 mM和0.173 mM,表現(xiàn)出較高親和力,對H_2O_2和TMB的催化常數(shù)分別高于HRP,其中對于TMB的催化常數(shù)是HRP的4.7倍,表明Pd-Cu納米粒子具有較高的催化活性。Pd-Cu納米粒子進(jìn)一步負(fù)載癌胚抗原抗體,以TMB為顯色探針,建立了檢測CEA的比色生物傳感新方法。在優(yōu)化條件下,線性范圍是0.0005~10.00 ng/m L,最低檢測限是0.10 pg/mL。此方法操作簡單、穩(wěn)定性好、靈敏度高,結(jié)果令人滿意。(2)甲胎蛋白(AFP)是在卵黃囊中產(chǎn)生的血漿蛋白,是在臨床診斷中眾所周知的腫瘤標(biāo)志物。AFP在成人血漿中濃度的上升可以被認(rèn)為是肝細(xì)胞癌或上皮性卵巢腫瘤的標(biāo)志物。因此,發(fā)展一種準(zhǔn)確而靈敏的檢測AFP的方法對于臨床研究至關(guān)重要。在這篇文章里,我們通過新型的理化方法合成了有一定大小和形狀的Pt-Pd-Ru納米枝晶(Nanodendrites)并通過透射電鏡進(jìn)行表征,由于Pt-Pd-Ru納米粒子在水溶液中的分散性差,我們將其負(fù)載到氨基化石墨烯上(NH_2-GS),得到NH_2-GS@Pt-Pd-Ru納米復(fù)合物,制備的這種NH_2-GS@Pt-Pd-Ru納米復(fù)合物具有類似于過氧化物酶的高催化活性,我們把這種納米材料應(yīng)用在比色生物傳感中,用于檢測腫瘤標(biāo)志物甲胎蛋白。類過氧化物酶活性研究發(fā)現(xiàn),制備的NH_2-GS@Pt-Pd-Ru納米復(fù)合物可以催化H_2O_2氧化TMB發(fā)生顯色反應(yīng),其對H_2O_2和TMB的米氏常數(shù)分別為267 m M和0.136 mM,表現(xiàn)出較高親和力,對H_2O_2和TMB的催化常數(shù)分別高于HRP,其中對于TMB的催化常數(shù)是HRP的2.2倍,表明NH_2-GS-Pt-Pd-Ru納米粒子具有較高的催化活性。由于NH_2-GS@Pt-Pd-Ru納米復(fù)合物獨(dú)特的結(jié)構(gòu)和特性,能夠很好的負(fù)載甲胎蛋白抗體,以TMB為顯色探針,建立了檢測AFP的比色生物傳感新方法。在優(yōu)化條件下,線性范圍是0.0005~50.00 ng/mL,最低檢測限是0.10 pg/m L。此方法重現(xiàn)性高、靈敏度好、穩(wěn)定性強(qiáng),可被應(yīng)用于多種腫瘤標(biāo)志物的檢測。
[Abstract]:In recent years , it has been found that Pd - Cu nanoparticles and NH _ 2 - GS @ Pt - Pd - Ru nano - complexes have the advantages of stable catalytic activity , strong acid - base and high temperature , and no sensitivity to protein denaturation and low production cost .

【學(xué)位授予單位】：濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R730.43

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1693384