本文選題：晚期糖基化終末產物受體　切入點：胰腺癌　出處：《四川大學學報(醫(yī)學版)》2017年01期

【摘要】：目的探討晚期糖基化終末產物受體(receptor for advanced glycation end products,RAGE)對胰腺癌PANC-1細胞增殖及轉染后接種裸鼠在成瘤過程中的作用。方法構建RAGE短發(fā)夾RNA(shRNA),即shRNARAGE-1、-2、-3質粒,轉染胰腺癌PANC-1細胞后,采用八肽膽囊收縮素(CCK-8)法、逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)和Western blot檢測shRNA RAGE對細胞增殖、RAGE表達的影響,篩選干擾效果最好的shRNA RAGE質粒;將轉染了shRNARAGE質粒的PANC-1細胞接種于裸鼠皮下,觀察成瘤時間,并測量計算腫瘤體積;采用RT-PCR和Western blot檢測shRNARAGE對RAGE、基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)2和9(MMP-2和MMP-9)、核因子-κB(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells,NF-κB)、血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的mRNA及蛋白表達的影響,并采用免疫組化方法對腫瘤進行微血管計數(shù),計算微血管密度。結果轉染shRNARAGE24h后CCK-8檢測細胞的吸光度(A)值低于對照組(P0.05),且在轉染48h時最明顯。RT-PCR和Western blot檢測顯示,shRNA RAGE-2質粒轉染后下調RAGE表達效果最好。轉染shRNA RAGE-2質粒的PANC-1細胞接種于裸鼠后,裸鼠成瘤時間、腫瘤體積低于shRNARAGE-1,-3,裸鼠腫瘤組織RAGE、MMP-2、NF-κB、MMP-9、VEGF mRNA及蛋白表達低于shRNA RAGE-1,-3(P0.05),其微血管密度也低于shRNARAGE-1,-3(P0.001)。結論 RAGE參與了胰腺癌的發(fā)生發(fā)展過程。RAGE可影響胰腺癌腫瘤生長及微血管形成。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of advanced glycosylation end product receptor for advanced glycation end products on the proliferation of pancreatic cancer PANC-1 cells and the effect of transfection in nude mice. Methods the short hairpin RNA-shRNA-shRNA-shRNA-shRNA-3 plasmid was constructed and transfected into PANC-1 cells of pancreatic cancer. Using CCK-8 method, reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blot were used to detect the effect of shRNA RAGE on cell proliferation and rage expression. The shRNA RAGE plasmid with the best interfering effect was screened, and the PANC-1 cells transfected with shRNARAGE plasmid were inoculated subcutaneously into nude mice. RT-PCR and Western blot were used to detect the effect of shRNARAGE on mRNA and protein expression of RAGE, matrix metalloproteinase 2, 9(MMP-2 and MMP-9, nuclear factor- 魏 1# factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells of NF- 魏 B, vascular endothelial growth factor (VEGF) and vascular endothelial growth factor (VEGF) endothelial growth factor (VEGF). The microvessels of the tumor were counted by immunohistochemical method. Results after transfection of shRNARAGE24h, the absorbance of CCK-8 was lower than that of control group (P0.05A). The results of RT-PCR and Western blot analysis showed that the expression of RAGE was the best after transfection of RAGE-2 plasmid. ShRNA RAGE-2 was transfected with shRNA RAGE-2. The granulocyte PANC-1 cells were inoculated in nude mice. The tumorigenesis time and tumor volume of nude mice were lower than that of shRNARAGE-1 / 3, and the expression of VEGF mRNA and protein in tumor tissue of nude mice was lower than that of shRNA RAGE-1 / 3P0. 05, and the microvessel density was lower than that of shRNARAGE-1- 3 / P0. 001.Conclusion RAGE may play an important role in the development of pancreatic carcinoma. Rage can affect the growth and microangiogenesis of pancreatic carcinoma.
【作者單位】： 四川大學華西醫(yī)院胰腺外科;四川大學華西醫(yī)院血管外科;
【基金】：四川省科技廳科技支撐計劃項目(No.2013FZ0020)資助
【分類號】：R735.9

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