本文選題：miR-a　切入點(diǎn)：c-Myc　出處：《中國免疫學(xué)雜志》2017年01期

【摘要】：目的:探討c-Myc調(diào)控PIK3R3對(duì)黑色素瘤B16-F10細(xì)胞的遷移和侵襲的影響。方法:運(yùn)用免疫組化檢測(cè)PIK3R3在正常皮膚組織和黑色素瘤組織的表達(dá);檢測(cè)慢病毒(LV3-c-Myc和LV3-PIK3R3)對(duì)c-Myc和PIK3R3基因的沉默效率;使用Ed U增殖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)沉默c-Myc和PIK3R3后黑色素瘤細(xì)胞株B16-F10的增殖情況;Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)c-Myc和PIK3R3的表達(dá)對(duì)黑色素瘤細(xì)胞B16-F10的侵襲能力的影響;劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)c-Myc和PIK3R3的表達(dá)對(duì)黑色素瘤細(xì)胞B16-F10遷移能力的影響;q PCR檢測(cè)沉默c-Myc和PIK3R3后miR-199a的表達(dá);q PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染miR-199a mimics和miR-199a inhibitor后c-Myc和PIK3R3的表達(dá);雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)檢測(cè)miR-199a對(duì)c-Myc和PIK3R3轉(zhuǎn)錄活性的影響。結(jié)果:和正常皮膚組織比較,PIK3R3在黑色素瘤組織中表達(dá)明顯增加;沉默c-Myc和PIK3R3基因后,黑色素瘤細(xì)胞株B16-F10的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移能力明顯降低;沉默c-Myc和PIK3R3基因后,miR-199a表達(dá)上調(diào);轉(zhuǎn)染miR-199a mimics后,c-Myc和PIK3R3表達(dá)降低;轉(zhuǎn)染miR-199a inhibitor后,c-Myc和PIK3R3表達(dá)上調(diào);雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果顯示,miR-199a可以直接調(diào)控c-Myc和PIK3R3的轉(zhuǎn)錄活性。結(jié)論:c-Myc可以通過miR-199a調(diào)控PIK3R3的表達(dá),從而促進(jìn)黑色素瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移能力。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of c-Myc on the migration and invasion of B16-F10 cells in melanoma. Methods: the expression of PIK3R3 in normal skin and melanoma tissues was detected by immunohistochemistry, and the silencing efficiency of c-Myc and PIK3R3 genes by lentivirus LV3-c-Myc and LV3-PIK3R3) was detected. The proliferation of melanoma cell line B16-F10 after c-Myc and PIK3R3 silencing was detected by Ed U proliferation assay. The effect of c-Myc and PIK3R3 expression on the invasion ability of B16-F10 was detected by transwell invasion assay. The effect of c-Myc and PIK3R3 expression on B16-F10 migration ability of melanoma cells was detected by scratch test. The expression of miR-199a after the silencing of c-Myc and PIK3R3 was detected by PCR. The expression of c-Myc and PIK3R3 after transfection of miR-199a mimics and miR-199a inhibitor was detected by miR-199a mimics and miR-199a inhibitor. Double luciferase reporter gene system was used to detect the effect of miR-199a on c-Myc and PIK3R3 transcriptional activities. Results: compared with normal skin tissues, the expression of PIK3R3 in melanoma tissues was significantly increased, and the proliferation of B16-F10 cells was observed after c-Myc and PIK3R3 gene silencing. The ability of invasion and metastasis was significantly decreased, the expression of miR-199a was up-regulated after silencing c-Myc and PIK3R3 gene, the expression of c-Myc and PIK3R3 was decreased after transfection of miR-199a mimics, and the expression of c-Myc and PIK3R3 was up-regulated after transfection of miR-199a inhibitor. The results of double luciferase reporter gene system showed that miR-199a could directly regulate the transcriptional activity of c-Myc and PIK3R3. Conclusion: c-Myc can regulate the expression of PIK3R3 through miR-199a, thus promoting the proliferation, invasion and migration of melanoma cells.
【作者單位】： 四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院四川省人民醫(yī)院皮膚外科;四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院 四川省人民醫(yī)院腎臟內(nèi)科;
【基金】：四川省衛(wèi)計(jì)委科研課題(No.140084)
【分類號(hào)】：R739.5

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