本文選題：腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞　切入點(diǎn)：miR-183　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：研究背景非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)目前是全球最常見(jiàn)的癌癥之一,早期遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是肺癌高死亡率的主要原因。越來(lái)越多的研究表明,腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞(cancer stem-like cells,CSLCs)或腫瘤始動(dòng)細(xì)胞(tumor initiating cells,TICs),具有較強(qiáng)的侵襲性,在惡性腫瘤局部浸潤(rùn)和形成遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移中起重要作用。微小RNAs(microRNAs,miRNAs)是一組小型、內(nèi)源性非編碼RNAs,通過(guò)部分或完全綁定mRNAs3′-UTR區(qū)負(fù)性調(diào)控基因的表達(dá)。最新證據(jù)表明,miRNAs的異常表達(dá)與大量癌癥疾病中的腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞失調(diào)密切相關(guān),例如miR-181與肝癌CSLCs,miR-34與胰腺癌CSLCs,miR-340與神經(jīng)膠質(zhì)瘤CSLCs,miR-125a與乳腺癌CSLCs,miR-17與卵巢癌CSLCs,miR-146a與結(jié)直腸癌CSLCs以及miR-320與前列腺癌CSLCs等等。課題組先前的研究顯示,miR-183可以調(diào)節(jié)NSCLC的侵襲性和增長(zhǎng)。然而,miR-183的確切作用機(jī)制尚不清楚,是否通過(guò)調(diào)節(jié)CSLCs進(jìn)而影響NSCLC的生物學(xué)行為,也不明確。因此,深入探討miR-183異常表達(dá)在CSLCs中的作用,將有助于認(rèn)識(shí)NSCLC細(xì)胞浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的生物學(xué)行為及其潛在機(jī)制,為臨床病情監(jiān)測(cè)和防治提供新的思路。研究目的1.基于紫杉醇結(jié)合無(wú)血清培養(yǎng)獲取CD133+/CD326+A549CSLCs并驗(yàn)證miR-183在CD133+/CD326+A549CSLCs中的表達(dá)。2.探討miR-183在CD133+/CD326+A549CSLCs中的作用。3.初步闡明miR-183調(diào)控CD133+/CD326+A549CSLCs侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制。研究方法一.miR-183在CD133+/CD326+A549CSLCs中的表達(dá)1.通過(guò)課題組前期逆向誘導(dǎo)聯(lián)合藥物篩選富集肺腺癌始動(dòng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法分離培養(yǎng)CD133+/CD326+A549CSLCs;應(yīng)用流式熒光檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)CD133+/CD326+A549CSLCS比例;進(jìn)行激光共聚焦方法直觀觀測(cè)CD133和CD326分子標(biāo)記在富集細(xì)胞中的表達(dá)。2.應(yīng)用實(shí)時(shí)定量pcr技術(shù)檢測(cè)普通a549細(xì)胞和cd133+/cd326+a549cslcs中mir-183的表達(dá)情況。二.mir-183在cd133+/cd326+a549cslcs中的作用1.通過(guò)構(gòu)建mir-183慢病毒過(guò)表達(dá)和干擾載體,首先根據(jù)基因序列設(shè)計(jì)并合成互補(bǔ)oligodna,經(jīng)過(guò)退火、連接將目的片段連接至pcdna6.2-gw/emgfp質(zhì)粒上,經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)化后挑取3個(gè)克隆,搖菌抽提質(zhì)粒后進(jìn)行測(cè)序,驗(yàn)證pcdna6.2-gw/emgfp-mi-183重組克隆中插入片段序列與設(shè)計(jì)的寡聚單鏈dna序列一致;使用invitrogen公司的bp重組系統(tǒng)將目的片段重組到載體pdonr221上,從平板挑取陽(yáng)性克隆并測(cè)序驗(yàn)證,所得結(jié)果符合設(shè)計(jì)要求;最后用構(gòu)建的慢病毒表達(dá)載體和重組質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293t細(xì)胞,包裝病毒,組裝成plenti6.3-anti-mir-183,收集病毒原液,超速離心濃縮,并通過(guò)測(cè)定方法獲得病毒滴度。經(jīng)過(guò)測(cè)序結(jié)果顯示,我們成功構(gòu)建了plenti6.3-mir-183和plenti6.3-anti-mir-183慢病毒載體,并得到了較為準(zhǔn)確的病毒滴度值,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究奠定了基礎(chǔ)。2.通過(guò)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)構(gòu)建mir-183過(guò)表達(dá)和干擾的cd133+/cd326+a549cslcs,實(shí)時(shí)定量pcr檢測(cè)mir-183在轉(zhuǎn)染慢病毒載體的cd133+/cd326+a549cslcs中的表達(dá)。3.裸鼠體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn),并通過(guò)生物熒光技術(shù)檢測(cè)裸鼠肺部形成轉(zhuǎn)移瘤熒光強(qiáng)度;cck8檢測(cè)mir-183過(guò)表達(dá)組cd133+/cd326+a549cslcs增殖效應(yīng);體外transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)mir-183過(guò)表達(dá)或低表達(dá)的cd133+/cd326+a549cslcs的遷移和侵襲現(xiàn)象。三.mir-183調(diào)控cd133+/cd326+a549cslcs侵襲遷移的作用機(jī)制1.基于生物信息學(xué)預(yù)測(cè)分析平臺(tái),預(yù)測(cè)mir-183下游靶點(diǎn);雙熒光素酶基因報(bào)告載體系統(tǒng)間接驗(yàn)證mir-183下游靶基因ptpn4;qrt-pcr和westernblot直接驗(yàn)證經(jīng)慢病毒轉(zhuǎn)染低表達(dá)mir-183的cd133+/cd326+a549cslcs中ptpn4基因和蛋白表達(dá)水平。2.構(gòu)建了ptpn4過(guò)表達(dá)質(zhì)粒,并設(shè)計(jì)mir-183過(guò)表達(dá)和ptpn4過(guò)表達(dá)共轉(zhuǎn)染cd133+/cd326+a549cslcs實(shí)驗(yàn),應(yīng)用westernblot檢測(cè)了四組中ptpn4的蛋白表達(dá)水平;重復(fù)transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了四組中侵襲的細(xì)胞數(shù)。3.結(jié)合臨床肺腺癌標(biāo)本,應(yīng)用qrt-pcr檢測(cè)組織標(biāo)本中ptpn4基因的表達(dá)水平。研究結(jié)果1.mir-183在cd133+/cd326+a549cslcs中的表達(dá)顯著升高依據(jù)課題組前期逆向誘導(dǎo)聯(lián)合藥物篩選富集肺腺癌始動(dòng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法,采用臨床用紫杉醇針劑(30mg/5ml),加藥濃度選定0.1μmol/l,加藥時(shí)間為48h;利用活細(xì)胞與細(xì)胞碎片的質(zhì)量差異采用rpm800轉(zhuǎn)進(jìn)行離心,所得細(xì)胞克隆繼續(xù)無(wú)血清懸浮培養(yǎng),經(jīng)過(guò)兩周時(shí)間,細(xì)胞的活性能夠恢復(fù)如初,在體外可以連續(xù)傳代培養(yǎng),細(xì)胞大量成球生長(zhǎng),細(xì)胞膜圓潤(rùn)完整,胞漿折光性好,隔天即可以傳代。流式熒光檢測(cè)技術(shù)可見(jiàn)富集的cd133+/cd326+a549cslcs比例在68%左右。激光共聚焦檢測(cè),結(jié)果提示經(jīng)無(wú)血清培養(yǎng)傳代至第五代的a549成球細(xì)胞大量表達(dá)cd133/cd326分子。上述結(jié)果提示我們成功分離富集了cd133+/cd326+a549cslcs,根據(jù)課題組前期實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),此類細(xì)胞可以作為a549細(xì)胞始動(dòng)細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究。實(shí)時(shí)定量pcr技術(shù)檢測(cè)普通a549細(xì)胞和cd133+/cd326+a549cslcs中mir-183的表達(dá),發(fā)現(xiàn)cd133+/cd326+a549cslcs中mir-183表達(dá)較普通a549細(xì)胞顯著升高。2.mir-183促進(jìn)cd133+/cd326+a549cslcs侵襲和遷移。為進(jìn)一步研究mir-183在cd133+/cd326+a549cslcs中的作用,我們成功構(gòu)建了mir-183慢病毒過(guò)表達(dá)和干擾載體plenti6.3-mir-183和plenti6.3-anti-mir-183,我們將其轉(zhuǎn)染cd133+/cd326+a549cslcs,建立mir-183過(guò)表達(dá)和干擾的cd133+/cd326+a549cslcs,免疫熒光結(jié)果提示攜帶有g(shù)fp的慢病毒質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)染進(jìn)cd133+/cd326+a549cslcs;經(jīng)實(shí)時(shí)定量pcr檢測(cè)mir-183在轉(zhuǎn)染慢病毒載體的cd133+/cd326+a549cslcs中的表達(dá),plenti6.3-mir-183轉(zhuǎn)染組中mir-183較對(duì)照組顯著升高,而在plenti6.3-anti-mir-183轉(zhuǎn)染組中mir-183較對(duì)照組顯著降低,這一結(jié)果進(jìn)一步證明我們轉(zhuǎn)染成功。由此我們獲得了穩(wěn)定表達(dá)mir-183和anti-183的cd133+/cd326+a549cslcs,這些細(xì)胞為我們隨后體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)研究mir-183在肺腺癌始動(dòng)細(xì)胞中的作用提供了細(xì)胞支撐。結(jié)合課題組前期實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),我們進(jìn)行了裸鼠體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn),經(jīng)裸鼠尾靜脈注射plenti6.3-mir-183轉(zhuǎn)染的cd133+/cd326+a549cslcs,28天后經(jīng)生物熒光技術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)裸鼠肺部形成轉(zhuǎn)移瘤,且mir-183過(guò)表達(dá)組所形成的轉(zhuǎn)移瘤的熒光強(qiáng)度較對(duì)照組明顯增強(qiáng);同時(shí)為排除cd133+/cd326+a549cslcs增殖所帶來(lái)的影響,我們用cck8對(duì)mir-183過(guò)表達(dá)組和對(duì)照組進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果顯示兩組無(wú)明顯差異;我們還進(jìn)行了體外transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了mir-183過(guò)表達(dá)或低表達(dá)的cd133/cd326雙陽(yáng)性細(xì)胞的遷移和侵襲現(xiàn)象,發(fā)現(xiàn)mir-183過(guò)表達(dá)組較對(duì)照組產(chǎn)生遷移和侵襲的細(xì)胞數(shù)明顯增多,而mir-183低表達(dá)組則較對(duì)照組遷移及侵襲的細(xì)胞數(shù)明顯減少。體內(nèi)外結(jié)果均提示mir-183在cd133+/cd326+a549cslcs中發(fā)揮促侵襲和遷移的作用,表明mir-183可作為致癌基因促進(jìn)腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移。3.mir-183通過(guò)負(fù)調(diào)控ptpn4促進(jìn)cd133+/cd326+a549cslcs侵襲作用我們利用targetscan、pictar、miranda等網(wǎng)絡(luò)mirna靶基因預(yù)測(cè)系統(tǒng),發(fā)現(xiàn)mir-183潛在的下游靶點(diǎn)包括有癌基因、抑癌基因、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子,細(xì)胞周期調(diào)控基因和與侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)的分子,例如EGR1,PTPN4,ZEB1,PTEN和PDCD4等。我們利用雙熒光素酶基因報(bào)告載體系統(tǒng)將PTPN4野生型和突變型的3′-UTR區(qū)重組到pGL3質(zhì)粒載體上,然后和miR-183共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,通過(guò)熒光活性檢測(cè),野生型組熒光強(qiáng)度顯著降低,而突變組無(wú)明顯變化。隨后我們又通過(guò)在基因水平和蛋白水平直接檢測(cè)經(jīng)慢病毒轉(zhuǎn)染低表達(dá)miR-183的CD133+/CD326+A549 CSLCS,PTPN4基因和蛋白表達(dá)水平較對(duì)照組明顯上升。間接實(shí)驗(yàn)和直接實(shí)驗(yàn)均驗(yàn)證了PTPN4是miR-183下游靶點(diǎn)之一。我們構(gòu)建了PTPN4過(guò)表達(dá)載體,并設(shè)計(jì)了共轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),首先,我們應(yīng)用western blot檢測(cè)了四組中PTPN4的蛋白表達(dá)水平,可見(jiàn)miR-control+PTPN4過(guò)表達(dá)組PTPN4較其他三組顯著上升,miR-183過(guò)表達(dá)+vector組較其他組明顯下降;其次我們利用上述四組細(xì)胞重復(fù)了Transwell侵襲實(shí)驗(yàn),細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果顯示miR-183過(guò)表達(dá)+vector組侵襲細(xì)胞數(shù)最多,與miR-control+vector組和miR-183過(guò)表達(dá)+PTPN4過(guò)表達(dá)組存在明顯差異,而miR-control+PTPN4過(guò)表達(dá)組發(fā)生侵襲的細(xì)胞數(shù)最少,較miR-control+vector組有顯著差異;最后我們對(duì)臨床肺腺癌標(biāo)本檢測(cè)了miR-183和PTPN4基因的表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)無(wú)轉(zhuǎn)移標(biāo)本的PTPN4基因表達(dá)較有轉(zhuǎn)移標(biāo)本顯著降低;相關(guān)分析表明,在同一肺腺癌組織標(biāo)本中miR-183表達(dá)水平與PTPN4mRNA表達(dá)水平呈顯著負(fù)相關(guān)。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,miR-183可以通過(guò)直接負(fù)調(diào)控下游靶基因PTPN4發(fā)揮促進(jìn)CD133+/CD326+A549 CSLCS侵襲遷移的作用。研究結(jié)論miR-183可以通過(guò)綁定PTPN4的3′UTR區(qū)使其降解和抑制翻譯,從而達(dá)到抑制PTPN4的表達(dá)。CD133+/CD326+A549 CSLCs中miR-183高表達(dá)可以通過(guò)抑制PTPN4表達(dá)而促進(jìn)CD133+/CD326+A549 CSLCs侵襲和遷移。
[Abstract]:The expression of miR - 183 in CD133 + / CD326 + A549CSLCs was studied . The expression level of ptpn4 gene and protein in the lung of nude mice were determined by means of biological fluorescence technique . The results showed that mir - 183 could be used as a cancer gene to promote invasion and metastasis of tumor .

【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R734.2

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 常秀青 ,Tony Sheldon;低焦油含量香煙與肺腺癌發(fā)病率上升有關(guān)[J];英國(guó)醫(yī)學(xué)雜志(中文版);2002年01期

2 鄧小梅,何權(quán)瀛;細(xì)支氣管肺泡細(xì)胞癌與其他類型肺腺癌的對(duì)比分析[J];中國(guó)呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志;2005年03期

3 楊長(zhǎng)青;王蓮芳;;飛行人員右肺腺癌1例[J];海軍醫(yī)學(xué)雜志;2006年04期

4 陳小兵;閆明;羅素霞;李寧;鄒宏志;韓黎麗;;84例青年肺腺癌早期誤診原因分析[J];實(shí)用診斷與治療雜志;2007年09期

5 陳小兵;閆明;曾軍杰;羅素霞;;青年女性肺腺癌首發(fā)癥狀及早期誤診原因分析[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生;2009年06期

6 周琪;段亮;姜格寧;丁嘉安;;青年男性肺腺癌臨床特征對(duì)預(yù)后的影響[J];中國(guó)癌癥雜志;2009年08期

7 張文麗;;以高熱為首發(fā)癥狀的肺腺癌病例并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[J];甘肅醫(yī)藥;2013年07期

8 郭哲;肺腺癌病人的預(yù)防性頭顱照射[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊(cè));1988年06期

9 劉福升，，李險(xiǎn)峰，楊愛(ài)民，王彤;肺腺癌誤診肺結(jié)核16例分析[J];中國(guó)防癆雜志;1994年01期

10 余偉江;放療及合并化療治療Ⅲ期肺腺癌療效分析[J];腫瘤防治研究;1994年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 孫強(qiáng);顧春東;雷霆;王金;李錦繡;;浸潤(rùn)性周圍型小肺腺癌(≤2cm)不同病理亞型的比較[A];第13屆全國(guó)肺癌學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2013年

2 袁明遠(yuǎn);;周圍型肺腺癌病灶的放射學(xué)分類及其臨床價(jià)值[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第16次全國(guó)放射學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2009年

3 顧國(guó)浩;;生物芯片在肺腺癌診斷中的應(yīng)用進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)成立30周年慶典大會(huì)資料匯編[C];2009年

4 林嘉穎;吳一龍;楊學(xué)寧;喬貴賓;王坤;陳剛;;不同預(yù)后的肺腺癌患者酪氨酸激酶信號(hào)傳導(dǎo)通路異常的初步探討[A];第三屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)教育論文集[C];2004年

5 湯秀英;吳立紅;張燁;;肺腺癌的超微觀察及異質(zhì)性探討[A];第八次全國(guó)電子顯微學(xué)會(huì)議論文摘要集（Ⅰ）[C];1994年

6 徐芝君;應(yīng)可凈;;胸部CT基本正常肺腺癌伴慢性DIC一例并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[A];浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸系病分會(huì)成立三十周年慶典活動(dòng)暨2008年呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

7 邵艷;洪偉俊;寧允葉;胥武劍;李強(qiáng);;肺腺癌惡性轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白的初步篩查[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2011（第十二次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議）論文匯編[C];2011年

8 王恩華;;解讀及評(píng)價(jià)國(guó)際多學(xué)科肺腺癌分類[A];2012年浙江省病理學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2012年

9 宋正波;朱慧能;郭振英;吳偉;孫文勇;張沂平;;肺腺癌新分類在預(yù)測(cè)Ⅰ期非小細(xì)胞肺腺癌預(yù)后中的價(jià)值[A];第13屆全國(guó)肺癌學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2013年

10 趙燕妮;曹菊;牟向東;闕呈立;;肺腺癌影像反復(fù)波動(dòng)病例報(bào)告一例并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2013第十四次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前8條

1 丁香;日發(fā)現(xiàn)肺腺癌的預(yù)測(cè)因子[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

2 仇逸邋孫國(guó)根;吸煙丈夫的妻子,患肺腺癌風(fēng)險(xiǎn)高[N];新華每日電訊;2007年

3 曾理;肺腺癌早診研究關(guān)注“起源”[N];健康報(bào);2008年

4 記者 李天舒　胡德榮;為何不吸煙者也患肺癌[N];健康報(bào);2010年

5 記者 胡德榮;非吸煙肺腺癌人群致癌基因突變譜建立[N];健康報(bào);2011年

6 高原;或與MiR-21分子有關(guān)[N];廣東科技報(bào);2009年

7 海飛魚;探索肺癌突變基因[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2008年

8 健康時(shí)報(bào)記者 王志勝;一樣的腫瘤,不一樣治法[N];健康時(shí)報(bào);2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 孫正亮;肺腺癌的分子分型特征及其與病理分型的關(guān)聯(lián)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 朱聰惠;miR-183負(fù)調(diào)控下游靶基因PTPN4促進(jìn)肺腺癌始動(dòng)細(xì)胞侵襲遷移作用的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2016年

3 董瑜;中國(guó)人群肺腺癌驅(qū)動(dòng)基因表達(dá)與臨床特征及預(yù)后的相關(guān)性研究[D];上海交通大學(xué);2013年

4 楊欣;肺腺癌預(yù)后相關(guān)的臨床病理因素分析及分子病理研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

5 鄭華;篩選肺腺癌相關(guān)血清自身抗體標(biāo)志物[D];北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所;2010年

6 張揚(yáng);肺腺癌致癌基因突變研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

7 張麗;基于IASLC/ATS/ERS國(guó)際多學(xué)科新分類的肺腺癌影像學(xué)及相關(guān)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

8 楊繼要;肺腺癌腫瘤相關(guān)抗原的篩選鑒定及克隆表達(dá)[D];鄭州大學(xué);2006年

9 何萍;染色體15q25.1區(qū)域基因多態(tài)性與中國(guó)南方人群肺腺癌易感性的關(guān)聯(lián)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

10 李亞光;PI3K-Akt通路與肺腺癌術(shù)后患者預(yù)后的相關(guān)性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 蘇帆;rhPDCD5蛋白對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞化療作用的研究[D];石河子大學(xué);2015年

2 卜靜;順鉑聯(lián)合雷帕霉素、3-MA對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞及其裸鼠原位移植瘤的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 韓承剛;寶石CT灌注成像在肺腺癌生物治療療效評(píng)價(jià)中的應(yīng)用價(jià)值[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

4 展峰峰;肺腺癌患者組織中EML4-ALK融合基因與TYMS mRNA表達(dá)的關(guān)系[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

5 趙玉澤;Ago2蛋白在EGFR突變的肺腺癌患者中的表達(dá)及臨床意義[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

6 孫天宇;轉(zhuǎn)錄輔助因子4過(guò)表達(dá)與肺腺癌淋巴轉(zhuǎn)移和預(yù)后的相關(guān)性[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

7 崔巍;肺腺癌患者外周血IL-17A~+T細(xì)胞和相關(guān)細(xì)胞因子檢測(cè)及意義[D];浙江大學(xué);2015年

8 趙鳳芝;bFGF單抗聯(lián)合Lobaplatin抑制肺腺癌細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移和誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制研究[D];暨南大學(xué);2015年

9 邊猛;溫通法聯(lián)合化療對(duì)EGFR-TKIs耐藥后的脾腎陽(yáng)虛型肺腺癌患者的臨床療效觀察[D];河南中醫(yī)學(xué)院;2015年

10 高正亞;Ⅰ期肺腺癌患者外周血和淋巴結(jié)中CK19及LUNX mRNA的表達(dá)與微轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究[D];蘇州大學(xué);2015年

本文編號(hào)：1670529