本文選題：miR-　切入點(diǎn)：甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-(TTF-)　出處：《西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年02期

【摘要】：目的觀察甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1(TTF-1)啟動(dòng)子調(diào)控miR-7表達(dá)對(duì)人肺癌細(xì)胞體外凋亡的影響,并探討其意義。方法將前期構(gòu)建的TTF-1啟動(dòng)子調(diào)控miR-7真核表達(dá)載體(命名為p-T-miR-7)與對(duì)照載體p-cont分別體外瞬時(shí)轉(zhuǎn)染人肺癌95D細(xì)胞,采用FCM法檢測(cè)95D細(xì)胞凋亡比例;TUNEL法檢測(cè)95D細(xì)胞凋亡情況;Western blot檢測(cè)各組中磷酸化Caspase3和磷酸化Caspase9的蛋白的表達(dá);共聚焦顯微技術(shù)檢測(cè)miR-7靶分子CGGBP1和EGFR蛋白的表達(dá);最后,采用Western blot檢測(cè)各組中磷酸化Akt和Erk蛋白的表達(dá)。結(jié)果體外轉(zhuǎn)染48h后,與p-cont轉(zhuǎn)染組相比,轉(zhuǎn)染p-T-miR-7組細(xì)胞凋亡比例明顯增加(P0.05);磷酸化Caspase3和磷酸化Caspase9蛋白水平均顯著增加(P0.05),同時(shí)EGFR和CGGBP1蛋白表達(dá)均明顯降低,且細(xì)胞中磷酸化Akt和Erk蛋白水平亦顯著降低(P0.05)。結(jié)論 TTF-1啟動(dòng)子調(diào)控miR-7表達(dá)可導(dǎo)致人肺癌細(xì)胞的凋亡。這為后續(xù)基于miR-7的人肺癌基因靶向治療策略的開發(fā)提供了前期實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of thyroid transcription factor-1 TTF-1) promoter on apoptosis of human lung cancer cells in vitro by regulating the expression of miR-7. Methods the eukaryotic expression vector of miR-7 regulated by TTF-1 promoter (named p-T-miR-7) and the control vector p-cont were transiently transfected into human lung cancer 95D cells in vitro. The apoptosis of 95D cells was detected by FCM and Tunel. The expression of phosphorylated Caspase3 and phosphorylated Caspase9 in each group was detected by Western blot. The expression of CGGBP1 and EGFR was detected by confocal microscopy. Western blot was used to detect the expression of phosphorylated Akt and Erk protein in each group. Results after transfection in vitro for 48 hours, the expression of phosphorylated Akt and Erk protein was compared with that of p-cont transfection group. The ratio of apoptosis and phosphorylated Caspase3 and phosphorylated Caspase9 protein were significantly increased, while the expression of EGFR and CGGBP1 protein were significantly decreased in p-T-miR-7 transfected group. The level of phosphorylated Akt and Erk protein also decreased significantly. Conclusion the regulation of miR-7 expression by TTF-1 promoter can lead to apoptosis of human lung cancer cells, which provides a preliminary experimental basis for the further development of targeted therapy strategy for human lung cancer gene based on miR-7.
【作者單位】： 貴州省遵義醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室;貴州省普通高等學(xué)校特色藥物腫瘤防治特色重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;貴州省生物治療人才基地;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.31370918) 貴州省高層次人才項(xiàng)目(黔科合人才(2016)4031號(hào)) 貴州省教育廳特色重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)項(xiàng)目(黔教合KY字[2014]212)~~
【分類號(hào)】：R734.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 陳超;趙娟娟;胡艷;郭萌萌;陶弋婧;周涯;秦娜琳;鄭靜;徐林;;TTF-1啟動(dòng)子調(diào)控microRNA-7真核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2014年03期

2 胡燕;廖珍媛;陳超;秦娜琳;鄭靜;田丹;李永菊;朱順飛;羅軍敏;徐林;;過表達(dá)microRNA-7通過下調(diào)CGG結(jié)合蛋白1的表達(dá)抑制人肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2014年02期

3 徐林;任濤;秦安東;周涯;羅軍敏;姚新生;李穎;;microRNA-7對(duì)人肺癌95D細(xì)胞體外侵襲的作用[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年01期

4 徐林;任濤;周涯;秦安東;鄭靜;;微小RNA-7對(duì)人肺癌95D細(xì)胞體外增殖的作用[J];腫瘤;2010年09期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 徐華林;趙娟娟;褚風(fēng)云;郭萌萌;何志旭;陳超;徐林;;微小RNA-7慢病毒過表達(dá)載體的構(gòu)建及其作用[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2016年05期

2 徐華林;趙娟娟;崔盼盼;郭萌萌;陶弋婧;陳超;徐林;;MicroRNA-7在CD4~+T細(xì)胞體外活化中的表達(dá)及意義[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2016年10期

3 鄭文;趙娟娟;朱順飛;徐華林;雷良玉;盧佳;賈力;褚風(fēng)云;王海嶸;徐林;;微小RNA-7敲減對(duì)小鼠脾臟中T淋巴細(xì)胞體外功能的影響[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2016年05期

4 褚風(fēng)云;郭萌萌;陳超;徐林;;微小RNA-7的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2016年04期

5 陳艷艷;廖嬌;趙玉霞;;MicroRNA-7與肺癌關(guān)系的研究進(jìn)展[J];實(shí)用腫瘤學(xué)雜志;2016年01期

6 趙娟娟;徐華林;陶弋婧;郭萌萌;周涯;陳超;秦娜琳;鄭靜;田丹;徐林;;基于SYBR Green Ⅰ的莖-環(huán)Real-time PCR定量檢測(cè)miRNA-7方法的建立[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2015年06期

7 楊亞蕊;何云;龔春梅;;microRNA與肺癌發(fā)生發(fā)展關(guān)系的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2015年22期

8 陶弋婧;朱順飛;陳超;趙娟娟;郭萌萌;張憶雄;秦娜林;徐林;;microRNA-7基因敲減對(duì)小鼠CD4~+SP細(xì)胞胸腺發(fā)育的影響[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2015年09期

9 趙娟娟;朱順飛;徐華林;胡燕;郭萌萌;陶弋婧;周涯;秦娜琳;鄭靜;徐林;;microRNA-7對(duì)小鼠腸系膜淋巴結(jié)αβT淋巴細(xì)胞組成的影響[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2015年09期

10 曾春艷;占一姍;黃俊;陳江;呂農(nóng)華;陳幼祥;;微RNA-7在人結(jié)直腸癌組織中表達(dá)的臨床意義及其與黏著斑激酶的相關(guān)性[J];中華消化雜志;2015年08期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 朱順飛;廖珍媛;胡燕;陳超;李永菊;劉思靜;羅軍敏;熊思東;徐林;;微小RNA-7過表達(dá)對(duì)人肺癌細(xì)胞體內(nèi)外轉(zhuǎn)移的影響[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2013年05期

2 宋永祥;李穎;秦安東;廖珍媛;李永菊;羅軍敏;任濤;徐林;;miRNA-7真核表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年04期

3 邵嵐;宋正波;張沂平;蘇丹;;肺癌分子分型與靶向治療研究進(jìn)展[J];中國(guó)肺癌雜志;2012年09期

4 鄭靜;李穎;秦安東;秦娜琳;羅軍敏;徐林;;miRNA-7在小鼠不同組織器官中表達(dá)的檢測(cè)及其意義[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年02期

5 徐林;任濤;秦安東;周涯;羅軍敏;姚新生;李穎;;microRNA-7對(duì)人肺癌95D細(xì)胞體外侵襲的作用[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年01期

6 徐林;任濤;周涯;秦安東;鄭靜;;微小RNA-7對(duì)人肺癌95D細(xì)胞體外增殖的作用[J];腫瘤;2010年09期

7 李子明;陳智偉;牛曉敏;陸舜;廖美琳;張杰;;抗EGFR單抗聯(lián)合EGFR酪氨酸激酶抑制劑對(duì)人肺腺癌細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制[J];腫瘤;2010年06期

8 ;Suppression of Type 1 Insulin-like Growth Factor Receptor Expression by Small Interfering RNA Inhibits A549 Human Lung Cancer Cell Invasion in vitro and Metastasis in Xenograft Nude Mice[J];Acta Biochimica et Biophysica Sinica;2007年02期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳衛(wèi);蘇踴躍;梁光萍;陳建;張曼輝;羅向東;;β_1整合素啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告基因載體的構(gòu)建與鑒定[J];山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2006年09期

2 彭方毅,張青云,周柔麗,邵根澤,涂植光;LAPTM4B啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告基因重組體的構(gòu)建[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2005年03期

3 姚金翠;胡婭莉;;胰島素樣生長(zhǎng)因子2啟動(dòng)子特異性的研究進(jìn)展[J];中國(guó)婦幼健康研究;2006年06期

4 吳冰,王燕,任繼鴻,趙輝,張利潮,張惠中;survivin啟動(dòng)子的克隆及在HeLa細(xì)胞中的特異生物活性[J];中國(guó)腫瘤生物治療雜志;2005年02期

5 鄒俊,徐明;基因矯正治療中的啟動(dòng)子研究[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊(cè));2005年11期

6 朱孝榮;朱園園;高秀先;袁紅花;孫懷昌;高殿帥;;小鼠酪氨酸羥化酶啟動(dòng)子序列分析[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào);2009年01期

7 王衛(wèi)東,陳正堂,李德志,段玉忠,王志新,曹正懷;缺氧及輻射雙敏感性啟動(dòng)子增強(qiáng)抑瘤素M表達(dá)治療肺癌的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;2004年04期

8 陳衛(wèi);蘇踴躍;梁光萍;陳建;張曼輝;羅向東;;人β1整合素近端和遠(yuǎn)端啟動(dòng)子報(bào)告基因載體的構(gòu)建和鑒定及啟動(dòng)活性分析[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2007年02期

9 張翔;郝曉柯;劉家云;蘇明權(quán);;Probasin啟動(dòng)子的克隆及其在不同腫瘤細(xì)胞系中的表達(dá)活性[J];中國(guó)腫瘤生物治療雜志;2007年03期

10 朱慧;曹傳華;謝叢華;;Egr-1啟動(dòng)子輻射誘導(dǎo)的基因表達(dá)特性[J];武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年02期

相關(guān)會(huì)議論文 前3條

1 劉燕;熊承良;;uPA基因啟動(dòng)子的研究與展望[A];湖北省性學(xué)會(huì)第二屆第二次學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2005年

2 李桂英;孫紅光;朱迅;杜柏榕;;以綠色熒光蛋白為報(bào)告蛋白檢測(cè)真核表達(dá)載體pcDNA3.1PLN中L-plastin啟動(dòng)子的活性[A];中國(guó)的遺傳學(xué)研究——中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)第七次代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];2003年

3 黃蕤;馬曉娟;李素平;牟達(dá);曾浩;匡安仁;;Survivin啟動(dòng)子特異性調(diào)控hNIS基因表達(dá)介導(dǎo)~(131)I和~(99m)TcO_4~-對(duì)腫瘤治療和顯像[A];第四屆全國(guó)中青年核醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 張中橋;FAS啟動(dòng)子 腫瘤細(xì)胞的探測(cè)器[N];健康報(bào);2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 陳莉;大豆根系特異啟動(dòng)子GmPRP2p和GmTIPp的克隆及表達(dá)特性分析[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2014年

2 馬卉;水稻PHD-finger家族低溫誘導(dǎo)基因的鑒定與啟動(dòng)子功能分析[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 葉榮建;水稻組織特異表達(dá)啟動(dòng)子的分離克隆、功能分析及應(yīng)用[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

4 左永春;基于多類特征融合的基因啟動(dòng)子相關(guān)問題的理論研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2011年

5 楊青杰;黃龍膽類胡蘿卜素生物合成基因啟動(dòng)子的功能分析[D];東北師范大學(xué);2013年

6 王衛(wèi)東;缺氧/輻射雙敏感性啟動(dòng)子的構(gòu)建與肺癌放射—基因治療實(shí)驗(yàn)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2003年

7 湯紹輝;人肝癌胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅱ基因啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)與功能研究[D];暨南大學(xué);2004年

8 彭楠;硫化葉菌阿拉伯糖啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄調(diào)控及其應(yīng)用[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

9 蔡萌;病原誘導(dǎo)啟動(dòng)子和組織特異性啟動(dòng)子的分離克隆和功能鑒定[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

10 熊杰;新型嵌合啟動(dòng)子在腫瘤治療中的應(yīng)用[D];武漢大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 何丹丹;病原物誘導(dǎo)啟動(dòng)子GST1響應(yīng)柑橘潰瘍病誘導(dǎo)的功能結(jié)構(gòu)域研究[D];西南大學(xué);2015年

2 敬帆;蠟梅CpAGL6基因啟動(dòng)子的克隆及功能的初步分析[D];西南大學(xué);2015年

3 趙小琴;三個(gè)油菜種子特異表達(dá)啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)和功能比較研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

4 鄧恩澤;基于序列物理化學(xué)特征的啟動(dòng)子預(yù)測(cè)研究[D];電子科技大學(xué);2015年

5 曾小紅;花生果皮豐富表達(dá)基因及其啟動(dòng)子的克隆與分析[D];福建農(nóng)林大學(xué);2012年

6 胡倩;牛α-actin基因啟動(dòng)子的改造及其功能驗(yàn)證[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

7 周文波;PUB19啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)分析及其應(yīng)用研究[D];西南科技大學(xué);2015年

8 王芳;棉花種子特異表達(dá)的α球蛋白A基因啟動(dòng)子的表達(dá)分析[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

9 李楠楠;黃瓜CsFBXL基因啟動(dòng)子的克隆及黃瓜生長(zhǎng)發(fā)育中實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析內(nèi)參基因篩選[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

10 胡艷平;木薯細(xì)胞壁酸性轉(zhuǎn)化酶基因MeCWINV1啟動(dòng)子的克隆與功能分析[D];海南大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：1669514