本文選題：PHA顆粒表面結(jié)合蛋白　切入點：-羥基丁酸--羥基己酸共聚酯　出處：《生物工程學(xué)報》2017年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：聚羥基脂肪酸(PHA)顆粒表面結(jié)合蛋白Pha P具有與疏水性高分子材料表面緊密結(jié)合的能力,本研究將EGFR靶向多肽(ETP)與PhaP進行融合表達,構(gòu)建了ETP-PhaP融合蛋白表達的重組工程菌Escherichia coli BL21(DE3)(pPI-ETP-P)。經(jīng)對工程菌株的誘導(dǎo)表達及ETP-PhaP融合蛋白的純化后,通過PhaP蛋白介導(dǎo)能夠有效地將ETP-PhaP融合蛋白修飾于3-羥基丁酸-3-羥基己酸共聚酯(PHBHHx)納米微球表面,構(gòu)建成為具有EGFR靶向作用的藥物遞送載體。分別檢測宮頸癌細胞系SiHa(EGFR高表達)和CaSKi(EGFR低表達)對ETP-PhaP修飾的PHBHHx納米藥物載體和未經(jīng)修飾的納米藥物載體的吞噬情況。結(jié)果顯示,純化的ETP-PhaP融合蛋白能夠很好地吸附于PHBHHx顆粒的表面,經(jīng)ETP-PhaP融合蛋白修飾的PHBHHx納米藥物載體對EGFR高表達的宮頸癌Si Ha細胞的靶向效果強于EGFR低表達的CaSKi細胞系。這一結(jié)果表明了PhaP介導(dǎo)的PHBHHx納米微球表面EGFR靶向多肽修飾具有簡便、高效的優(yōu)勢,為疏水性納米藥物載體表面功能多肽修飾提供了一種新策略。
[Abstract]:The surface binding protein (Pha P) of polyhydroxyl fatty acid (PHA) particles has the ability to bind closely to the surface of hydrophobic polymer materials. In this study, EGFR targeting polypeptide (EGFR) and PhaP were fused and expressed. A recombinant engineering strain Escherichia coli BL21DE3 was constructed for the expression of ETP-PhaP fusion protein. The recombinant strain was induced to express and expressed ETP-PhaP fusion protein. The ETP-PhaP fusion protein can be effectively modified onto the surface of 3-hydroxybutyric acid-3-hydroxycaproic acid copolyester (PHBHHx) microspheres by PhaP protein mediated. EGFR targeting drug delivery vector was constructed. The high expression of SiHa(EGFR and low expression of CaSKi(EGFR were detected in cervical cancer cell line. The phagocytosis of ETP-PhaP modified PHBHHx nano-drug carrier and unmodified nano-drug carrier were detected. The results showed that, The purified ETP-PhaP fusion protein can be adsorbed on the surface of PHBHHx particles. The targeting effect of PHBHHx nanoparticles modified with ETP-PhaP fusion protein on SIHA cells with high expression of EGFR was stronger than that of CaSKi cells with low expression of EGFR. The results showed that PhaP mediated EGFR targeted polypeptide modification on PHBHHx nanoparticles was simple and convenient. The advantages of high efficiency provide a new strategy for surface modification of hydrophobic nano drug carriers.
【作者單位】： 西安交通大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院生物醫(yī)學(xué)信息工程教育部重點實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(Nos.81172170,81371288)資助~~
【分類號】：R73-36

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本文編號：1645969