本文選題：蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶2(PRMT2)　切入點(diǎn)：自噬　出處：《南華大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:明確蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶2(protein arginine methyltransferase 2,PRMT2)對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞自噬的影響,并初步探討其可能的分子機(jī)制。方法:根據(jù)MCF-7細(xì)胞中PRMT2表達(dá)水平分為PRMT2穩(wěn)定低表達(dá)組及PRMT2正常水平表達(dá)組。首先,蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western Blot,WB)分別檢測兩組細(xì)胞中自噬相關(guān)蛋白Beclin1、LC3(light chain3,輕鏈3)的表達(dá),初步探討PRMT2低表達(dá)對(duì)細(xì)胞自噬的影響。其次,WB方法分別檢測兩組細(xì)胞中自噬信號(hào)通路分子mTOR、ULK1、p-AMPK、AMPK(mTOR:mammalian target of rapamycin,雷帕霉素靶蛋白;ULK1:unc-51-like kinase 1,unc-51樣激酶1;AMPK:Adenosine monophosphate-activated protein kinase,單磷酸腺苷活化蛋白激酶)的表達(dá)并進(jìn)行分子機(jī)制的初步研究。第三,應(yīng)用免疫共沉淀方法初步研究PRMT2影響自噬的可能信號(hào)通路。結(jié)果:1.WB檢測結(jié)果表示:PRMT2穩(wěn)定低表達(dá)的MCF-7細(xì)胞中,自噬相關(guān)蛋白(Beclin1、LC3)表達(dá)增加。2.PRMT2穩(wěn)定低表達(dá)的MCF-7細(xì)胞中,mTOR、ULK1、p-AMPK表達(dá)均上調(diào),AMPK表達(dá)水平與普通MCF-7組無明顯差異。3.免疫共沉淀結(jié)果表示:MCF-7細(xì)胞中,PRMT2與AMPK之間以及Beclin1與PRMT2及AMPK之間均存在相互作用。結(jié)論:MCF-7細(xì)胞中,PRMT2可能通過與AMPK相互作用,經(jīng)AMPK/ULK1/Beclin1途徑,影響細(xì)胞自噬水平。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of protein arginine methyltransferase 2 protein arginine methyltransferase 2 (PRMT2) on autophagy of human breast cancer MCF-7 cells. Methods: according to the level of PRMT2 expression in MCF-7 cells, it was divided into two groups: PRMT2 stable low expression group and PRMT2 normal expression group. Western blotblotWB was used to detect the expression of the autophagy associated protein Beclin1 (LC3) chalight 3 (light chain 3) in two groups. To investigate the effect of low expression of PRMT2 on autophagy. Secondly, we detected the autophagy signal pathway molecule mTOROULK1, p-AMPK1, AMPC: mammalian target of rapamycin, ULK1: unc-51-like kinase 1 unc-51 like kinase 1 AMPK1: Adenosine monophosphate-activated protein kinase1, adenosine monophosphate activated protein. Enzyme) expression and preliminary study of molecular mechanism. Third, The possible signal pathway of PRMT2 affecting autophagy was studied by immunoprecipitation method. The expression of AMPK in MCF-7 cells with stable and low expression of PRMT2 was not significantly different from that in normal MCF-7 group. 3. The immunoprecipitation results showed that the expression of Beclin1, PRMT2 and AMPK in MCF-7 cells was higher than that in normal MCF-7 cells. 3. The results of immunoprecipitation showed that the expression of AMPK in MCF-7 cells with stable and low expression of PRMT2 was not significantly different from that in normal MCF-7 cells. 3. The results of immunoprecipitation indicated that there was no significant difference between Beclin1 and AMPK in MCF-7 cells and between Beclin1 and PRMT2 and AMPK. Conclusion PRMT2 may interact with AMPK in MCF-7 cells. The level of autophagy was affected by AMPK/ULK1/Beclin1 pathway.
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.9

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本文編號(hào)：1642946