在肝癌細(xì)胞SK-Hep1中沉默STAT3基因增強(qiáng)sorafenib療效的初步研究
本文選題:肝癌 切入點(diǎn):Sorafenib 出處:《中國(guó)生物工程雜志》2017年12期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的:研究STAT3在肝癌細(xì)胞SK-Hep1對(duì)sorafenib抗性中的作用,并探討STAT3基因沉默在增強(qiáng)sorafenib肝癌療效中的作用。方法:應(yīng)用基于shRNA的基因沉默技術(shù)在肝癌細(xì)胞SKHep1中敲減STAT3;用CCK8法檢測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)情況與對(duì)sorafenib的敏感性;蛋白印跡法(Western blot)檢測(cè)STAT3、p-STAT3(Y705)、p-STAT3(S727)以及其下游蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果:成功構(gòu)建了STAT3敲減的細(xì)胞株SK-Hep1-sh STAT3。該細(xì)胞中STAT3蛋白表達(dá)降低,細(xì)胞增殖明顯受到抑制。Sorafenib的處理下調(diào)了STAT3的磷酸化水平及其下游蛋白Mcl-1和Cyclin D1的表達(dá)。STAT3基因敲減的SK-Hep1細(xì)胞,對(duì)sorafenib的敏感性增強(qiáng)。結(jié)論:基于shRNA的STAT3基因沉默能明顯抑制SK-Hep1細(xì)胞增殖,提高細(xì)胞對(duì)sorafenib的敏感性,有望成為提高sorafenib抗肝癌療效的一種新手段。
[Abstract]:Objective: to study the role of STAT3 in the resistance of hepatocellular carcinoma cell line SK-Hep1 to sorafenib. To explore the role of STAT3 gene silencing in enhancing the efficacy of sorafenib hepatocarcinoma methods: using shRNA based gene silencing technique to knock down STAT3 in SKHep1 cells and to detect cell growth and sensitivity to sorafenib by CCK8 assay. Western blotting was used to detect the expression of STAT3pSTAT3Y705 and its downstream protein. Results: STAT3 knockout cell line SK-Hep1-sh STAT3 was successfully constructed. The expression of STAT3 protein in the cell was decreased. Cell proliferation was significantly inhibited by the treatment of. Sorafenib down-regulated the phosphorylation level of STAT3 and the expression of downstream proteins Mcl-1 and Cyclin D1. STAT3 gene knockout of SK-Hep1 cells. Conclusion: STAT3 gene silencing based on shRNA can significantly inhibit the proliferation of SK-Hep1 cells and increase the sensitivity of SK-Hep1 cells to sorafenib, which is expected to be a new method to improve the anti-hepatoma effect of sorafenib.
【作者單位】: 福建生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院食品與生物工程系;福建醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【基金】:福建省教育廳中青年教師教育科研項(xiàng)目(JA14410) 福建省科技廳自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(2015J01293) 福建省自然科學(xué)基金杰青項(xiàng)目(2015J06017) 福建省青年拔尖創(chuàng)新人才 福建省科技計(jì)劃(2014Y2008)資助項(xiàng)目
【分類號(hào)】:R735.7
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