乳酸菌培養(yǎng)上清液下調(diào)Piwil2基因增強三陰性乳腺癌細胞對順鉑的敏感性
本文選題:乳酸菌培養(yǎng)上清液 切入點:乳腺腫瘤 出處:《第三軍醫(yī)大學學報》2017年12期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的探討乳酸菌培養(yǎng)上清液(lactobacilli supernatants,LS)處理乳腺癌細胞對順鉑(cisplatin,DDP)敏感性的影響及其機制。方法采用CCK-8和Western blot檢測不同濃度DDP(0、1、2、3、4、5μg/m L)和LS(體積分數(shù)分別為1%、5%、10%、20%)對三陰性乳腺癌細胞MDA-MB-231增殖和Piwil2基因表達的影響;瞬時轉(zhuǎn)染Piwil2 siRNA沉默MDA-MB-231細胞中Piwil2基因表達,Western blot檢測其沉默效果,CCK-8檢測Piwil2基因沉默后對MDA-MB-231細胞增殖的影響;2μg/m L DDP聯(lián)合不同濃度LS(體積分數(shù)分別為1%、5%、10%、20%)作用MDA-MB-231細胞,觀察細胞增殖抑制效應(yīng)和Piwil2蛋白表達的改變。結(jié)果高濃度DDP(≥3μg/m L)可抑制MDA-MB-231細胞的增殖(P0.05),而低濃度DDP(≤2μg/m L)不能有效抑制細胞增殖;DDP以劑量依賴性方式上調(diào)Piwil2蛋白的表達;siRNA沉默Piwil2表達可恢復2μg/m L DDP對細胞增殖的抑制。與對照組(乳酸菌培養(yǎng)基,MRS)比較,LS以劑量依賴性方式下調(diào)Piwil2蛋白的表達,但并不影響細胞的增殖;與單用2μg/m L DDP比較,2μg/m L DDP聯(lián)合20%LS處理可顯著下調(diào)Piwil2蛋白的表達并抑制細胞增殖(P0.05)。結(jié)論三陰性乳腺癌細胞中Piwil2的高表達可導致細胞對順鉑敏感性的降低,乳酸菌培養(yǎng)上清液可通過下調(diào)Piwil2基因的表達增強三陰性乳腺癌細胞對順鉑的敏感性。
[Abstract]:Objective to explore the culture supernatant of lactic acid bacteria (lactobacilli supernatants, LS) treatment of breast cancer cells to cisplatin (cisplatin, DDP) sensitivity and its mechanism. Methods CCK-8 and Western blot to detect different concentrations of DDP (0,1,2,3,4,5 g/m L) and LS (volume fraction respectively 1%, 5%, 10%, 20%) effect on the expression of the proliferation and Piwil2 three negative breast cancer cell MDA-MB-231 gene; expression of Piwil2 transfected Piwil2 silence siRNA gene in MDA-MB-231 cells, Western blot to detect the silencing effect on the proliferation of MDA-MB-231 cell CCK-8 detection after Piwil2 gene silencing; 2 g/m L DDP combined with different concentrations of LS (volume fraction of 1%, 10%, 5% respectively. 20%) MDA-MB-231 cells, observe the inhibitory effect of cell proliferation and the expression of Piwil2 protein was observed. Results the high concentration of DDP (3 g/m L) inhibited MDA-MB-231 cell proliferation (P0.05), while low concentrations of DDP (less than 2 g/m L) can effectively inhibit cell proliferation; DDP expression in a dose-dependent manner up-regulated Piwil2 protein expression; siRNA silencing of Piwil2 2 g/m L DDP recovery inhibition on cell proliferation. And the control group (lactic acid bacteria culture medium, MRS, LS) expression of Piwil2 protein in a dose dependent manner, but does not affect cell proliferation; with 2 g/m L DDP, 2 g/m L DDP combined with 20%LS treatment can significantly reduce Piwil2 protein expression and inhibit cell proliferation (P0.05). Conclusion the high expression of Piwil2 three negative breast cancer cells can cause cells to cisplatin sensitivity decreased, lactic acid bacteria culture supernatant can enhance the sensitivity of cells to cisplatin three negative breast cancer by down regulating the expression of Piwil2.
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學新橋醫(yī)院普通外科;第三軍醫(yī)大學基礎(chǔ)醫(yī)學部生物化學與分子生物學教研室;
【基金】:國家自然科學基金面上項目(31571459,81272908)~~
【分類號】:R737.9
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,本文編號:1598266
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