本文選題：結(jié)腸腫瘤　切入點(diǎn)：黃芩苷　出處：《腫瘤》2017年03期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:探討黃芩苷在體內(nèi)外對結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期的影響,以及其可能的分子作用機(jī)制。方法:不同質(zhì)量濃度(0、50、100、200、400和800μg/mL)的黃芩苷分別作用人正常結(jié)直腸黏膜FHC細(xì)胞和人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞48 h后,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化,并采用MTT法檢測各組細(xì)胞活力變化。FCM法檢測黃芩苷干預(yù)后結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞周期分布的變化;同時(shí),采用蛋白質(zhì)印跡法檢測凋亡相關(guān)蛋白聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(poly ADP-ribose polymerase-1,Parp-1)、X連鎖凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、caspase 3、p53、Bcl-2和Bax,以及細(xì)胞周期相關(guān)蛋白cyclin D1和cyclin B1表達(dá)水平的變化。此外,通過構(gòu)建結(jié)直腸癌HCT116細(xì)胞的原位移植瘤小鼠模型,觀察黃芩苷灌胃治療后小鼠體質(zhì)量以及體內(nèi)腫瘤生長體積的變化,并應(yīng)用TUNEL法檢測黃芩苷對移植瘤小鼠體內(nèi)腫瘤細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果:與黃芩苷未處理的對照組相比,50~800μg/mL黃芩苷對結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞活力有明顯的抑制作用(P值均0.05)。而且黃芩苷對正常結(jié)直腸黏膜細(xì)胞FHC的半數(shù)抑制濃度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值明顯高于HCT116細(xì)胞(P0.01)。200和400μg/mL黃芩苷處理后,結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的凋亡率明顯升高(P值均0.01);50和100μg/mL黃芩苷作用48 h后,Parp-1和caspase 3剪切體蛋白的表達(dá)水平比對照組均明顯升高(P值均0.01),而XIAP、NF-κB和Bcl-2蛋白的表達(dá)水平均明顯降低(P值均0.05)。100和200μg/mL黃芩苷處理后,HCT116細(xì)胞周期阻滯在G1期(P值均0.01);50和100μg/mL黃芩苷作用48 h后,cyclin D1和cyclin B1蛋白的表達(dá)水平均明顯降低(P值均0.01)。黃芩苷可以抑制小鼠原位移植瘤的生長(P0.01),并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡,但是對小鼠體質(zhì)量無明顯影響(P0.05)。結(jié)論:黃芩苷在體內(nèi)外均可以明顯抑制結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的生長活性,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并使細(xì)胞周期阻滯于G1期。
[Abstract]:Objective: to investigate the effects of baicalin on apoptosis and cell cycle of colon cancer cells in vitro and in vivo. Methods: baicalin at different concentrations (100 渭 g / mL and 800 渭 g / mL) treated FHC cells of normal colorectal mucosa and HCT116 cells of colon cancer respectively for 48 h, and observed the morphologic changes of cells under inverted microscope. The apoptosis rate and cell cycle distribution of colon cancer HCT116 cells after baicalin intervention were detected by MTT assay. The expression of apoptosis associated protein polyadenosine diphosphate polymerase 1 (poly ADP-ribose polymerase 1) and cyclin cyclin D1 and cyclin B1 were detected by Western blotting. The expression levels of X-linked inhibitor of apoptosis protein XIAPP, nuclear factor- 魏 BNF- 魏 Bncaspase 3p53Bcl-2 and cyclin B1, and cyclin-associated protein cyclin D1 and cyclin B1 were detected by Western blotting. In order to observe the changes of body mass and tumor growth volume in mice after baicalin administration, the orthotopic transplanted tumor model of colorectal cancer HCT116 cells was established. The effect of baicalin on tumor cell apoptosis in transplanted tumor mice was detected by TUNEL method. Results: compared with the untreated control group, baicalin (50 ~ 800 渭 g / mL) significantly inhibited the viability of colon cancer HCT116 cells (P < 0.05). The half maximal inhibitory concentration (IC50) of baicalin on FHC of normal colorectal mucosal cells was significantly higher than that of HCT116 cells treated with baicalin at the concentration of 0.01 渭 g / mL and 400 渭 g / mL, respectively. The apoptotic rate of colon cancer HCT116 cells was significantly increased by 0.01g / mL baicalin 50 and 100 渭 g / mL baicalin for 48 h. After 48 h treatment, the expression levels of Shear body proteins of PIP 1 and caspase 3 were significantly higher than those of the control group, while the expression levels of XIAP NF- 魏 B and Bcl-2 protein were significantly decreased compared with those of the control group. The cell cycle arrest of HCT116 cells treated with baicalin (0.05 渭 g 路100) and 200 渭 g / mL baicalin was inhibited in G1 phase. The expression levels of cyclin D1 and cyclin B1 protein were significantly decreased after exposed to baicalin at G1 phase for 48 h. Baicalin could inhibit the proto-displacement of HCT116 cells. The expression of cyclin D1 and cyclin B1 protein was significantly decreased after treatment with baicalin at G _ 1 phase. Baicalin could inhibit the proto-displacement of HCT116 cells. The growth of tumor was P0.01 and the apoptosis of tumor cells was promoted. Conclusion: baicalin can significantly inhibit the growth activity of colon cancer HCT116 cells in vitro and in vivo, induce apoptosis and arrest cell cycle in G1 phase.
【作者單位】： 南京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院江蘇省分子與醫(yī)學(xué)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;沈陽化工大學(xué)制藥與生物工程學(xué)院生物工程教研室;
【分類號】：R735.35

【參考文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1596468