發(fā)布時間：2018-03-10 20:45

  本文選題：IDH　切入點：2羥基戊二酸　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：膠質(zhì)瘤(Glioma)作為最常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤,至今仍是人類未攻克的、并嚴(yán)重危害人類健康及生存質(zhì)量的疾病。根據(jù)其組織病理學(xué)特征,世界衛(wèi)生組織(WHO)也將中樞神經(jīng)系統(tǒng)膠質(zhì)瘤分為Ⅰ～Ⅳ級,而隨著目前對膠質(zhì)瘤研究的進(jìn)一步深入,傳統(tǒng)的組織病理學(xué)分類并不能解釋許多特征性的臨床現(xiàn)象,也與不斷進(jìn)展的分子基因水平研究顯示出了在臨床治療及預(yù)后指導(dǎo)方面的不足,在有關(guān)膠質(zhì)瘤的分子基因研究中,異檸檬酸脫氫酶基因(Isocitrate Dehydrogenase Gene,IDH)突變顯示出了極大的臨床指導(dǎo)意義,也值得更加深入的研究。IDH突變的研究由2008年P(guān)arsons等利用高通量測序技術(shù)而發(fā)現(xiàn)的;2009年Dang,L主導(dǎo)的研究提出,并實驗證明IDH突變能夠?qū)е麓侔┐x物2-輕基戊二酸(2-hydroxyglutamte,2-HG)的積聚,而高水平的2-HG能夠在體內(nèi)促進(jìn)膠質(zhì)瘤的發(fā)生和惡性進(jìn)展。多數(shù)研究者對IDH突變的研究多集中在293T細(xì)胞等細(xì)胞系及膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系,臨床數(shù)據(jù)提示IDH突變較多發(fā)生在較低級別膠質(zhì)瘤(80%),加之細(xì)胞系與臨床的距離,本研究應(yīng)用較低級別膠質(zhì)瘤原代細(xì)胞的研究顯得頗有意義。IDH基因產(chǎn)生異檸檬酸脫氫酶(Isocitrate Dehydrogenase),在生理水平下根據(jù)分布的不同部位可以分為IDH1、IDH2和IDH3三個亞型,IDH1位于細(xì)胞質(zhì),IDH2和IDH3位于線粒體,其功能基本一致,因此IDH1即能反應(yīng)IDH的特征且更具有代表性。2-HG作為IDH突變產(chǎn)生的促癌代謝物,由于其與IDH突變的緊密關(guān)系也成為了被研究的重要靶點。已有的研究發(fā)現(xiàn)IDH1突變后,細(xì)胞基因組和組蛋白發(fā)生超甲基化,因而細(xì)胞分化受到抑制,還有研究證明IDH1突變以及外源性2-HG的作用使上皮細(xì)胞發(fā)生間質(zhì)變,而這些都未曾在膠質(zhì)瘤,特別是較低級別膠質(zhì)瘤中得到驗證,而且IDH1突變對腫瘤的促進(jìn)作用也無法解釋IDH突變型膠質(zhì)瘤的良好預(yù)后,甚至與之相背。本次研究目的在探討異檸檬酸脫氫酶1(IDH1)及其代謝產(chǎn)物2-羥基戊二酸(2-hydroxyglutarate,2-HG)對膠質(zhì)瘤增殖、遷移等惡性行為的作用機(jī)制。已有研究證明在正常乳腺上皮細(xì)胞以及大腸癌細(xì)胞中,IDH突變能夠通過上皮細(xì)胞間質(zhì)變(EMT)影響腫瘤細(xì)胞的形態(tài)和功能,而在膠質(zhì)瘤中尚未有研究證明這一機(jī)制。本文所示研究通過進(jìn)行原代和細(xì)胞系的細(xì)胞培養(yǎng)得到實驗對象,細(xì)胞增殖實驗(CCK-8)實驗檢測細(xì)胞增殖能力,劃痕實驗檢測細(xì)胞遷移能力,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)實驗檢測上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)基因的mRNA表達(dá)。實驗證明,IDH突變型膠質(zhì)瘤細(xì)胞以及外源性加入2-HG的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞形態(tài)會發(fā)生間質(zhì)樣改變,隨2-HG濃度的升高作用愈明顯;IDH突變促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖和遷移能力,下調(diào)上皮細(xì)胞標(biāo)志物E-鈣黏蛋白(E-Cadherin)的表達(dá),上調(diào)了間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物波形蛋白(Vimentin)和β-鏈蛋白(β-catenin)的表達(dá)。因此我們可以認(rèn)為2-HG能夠促進(jìn)IDH野生型膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的增殖、遷移。
[Abstract]:Glioma (Glioma) is the most common malignant tumor in the central nervous system. It is still a disease that has not been solved by human beings and seriously endangers human health and quality of life. According to its histopathological features, Glioma is the most common malignant tumor in the central nervous system. The World Health Organization (WHO) also classifies gliomas in the central nervous system as grade 鈪，

本文編號：1595005