發(fā)布時間：2018-03-10 20:45

  本文選題：IDH　切入點：2羥基戊二酸　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：膠質(zhì)瘤(Glioma)作為最常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤,至今仍是人類未攻克的、并嚴重危害人類健康及生存質(zhì)量的疾病。根據(jù)其組織病理學(xué)特征,世界衛(wèi)生組織(WHO)也將中樞神經(jīng)系統(tǒng)膠質(zhì)瘤分為Ⅰ～Ⅳ級,而隨著目前對膠質(zhì)瘤研究的進一步深入,傳統(tǒng)的組織病理學(xué)分類并不能解釋許多特征性的臨床現(xiàn)象,也與不斷進展的分子基因水平研究顯示出了在臨床治療及預(yù)后指導(dǎo)方面的不足,在有關(guān)膠質(zhì)瘤的分子基因研究中,異檸檬酸脫氫酶基因(Isocitrate Dehydrogenase Gene,IDH)突變顯示出了極大的臨床指導(dǎo)意義,也值得更加深入的研究。IDH突變的研究由2008年P(guān)arsons等利用高通量測序技術(shù)而發(fā)現(xiàn)的;2009年Dang,L主導(dǎo)的研究提出,并實驗證明IDH突變能夠?qū)е麓侔┐x物2-輕基戊二酸(2-hydroxyglutamte,2-HG)的積聚,而高水平的2-HG能夠在體內(nèi)促進膠質(zhì)瘤的發(fā)生和惡性進展。多數(shù)研究者對IDH突變的研究多集中在293T細胞等細胞系及膠質(zhì)母細胞瘤細胞系,臨床數(shù)據(jù)提示IDH突變較多發(fā)生在較低級別膠質(zhì)瘤(80%),加之細胞系與臨床的距離,本研究應(yīng)用較低級別膠質(zhì)瘤原代細胞的研究顯得頗有意義。IDH基因產(chǎn)生異檸檬酸脫氫酶(Isocitrate Dehydrogenase),在生理水平下根據(jù)分布的不同部位可以分為IDH1、IDH2和IDH3三個亞型,IDH1位于細胞質(zhì),IDH2和IDH3位于線粒體,其功能基本一致,因此IDH1即能反應(yīng)IDH的特征且更具有代表性。2-HG作為IDH突變產(chǎn)生的促癌代謝物,由于其與IDH突變的緊密關(guān)系也成為了被研究的重要靶點。已有的研究發(fā)現(xiàn)IDH1突變后,細胞基因組和組蛋白發(fā)生超甲基化,因而細胞分化受到抑制,還有研究證明IDH1突變以及外源性2-HG的作用使上皮細胞發(fā)生間質(zhì)變,而這些都未曾在膠質(zhì)瘤,特別是較低級別膠質(zhì)瘤中得到驗證,而且IDH1突變對腫瘤的促進作用也無法解釋IDH突變型膠質(zhì)瘤的良好預(yù)后,甚至與之相背。本次研究目的在探討異檸檬酸脫氫酶1(IDH1)及其代謝產(chǎn)物2-羥基戊二酸(2-hydroxyglutarate,2-HG)對膠質(zhì)瘤增殖、遷移等惡性行為的作用機制。已有研究證明在正常乳腺上皮細胞以及大腸癌細胞中,IDH突變能夠通過上皮細胞間質(zhì)變(EMT)影響腫瘤細胞的形態(tài)和功能,而在膠質(zhì)瘤中尚未有研究證明這一機制。本文所示研究通過進行原代和細胞系的細胞培養(yǎng)得到實驗對象,細胞增殖實驗(CCK-8)實驗檢測細胞增殖能力,劃痕實驗檢測細胞遷移能力,聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)實驗檢測上皮細胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)基因的mRNA表達。實驗證明,IDH突變型膠質(zhì)瘤細胞以及外源性加入2-HG的膠質(zhì)母細胞瘤細胞形態(tài)會發(fā)生間質(zhì)樣改變,隨2-HG濃度的升高作用愈明顯;IDH突變促進膠質(zhì)瘤細胞的增殖和遷移能力,下調(diào)上皮細胞標志物E-鈣黏蛋白(E-Cadherin)的表達,上調(diào)了間質(zhì)細胞標志物波形蛋白(Vimentin)和β-鏈蛋白(β-catenin)的表達。因此我們可以認為2-HG能夠促進IDH野生型膠質(zhì)母細胞瘤的增殖、遷移。
[Abstract]:Glioma (Glioma) is the most common malignant tumor in the central nervous system. It is still a disease that has not been solved by human beings and seriously endangers human health and quality of life. According to its histopathological features, Glioma is the most common malignant tumor in the central nervous system. The World Health Organization (WHO) also classifies gliomas in the central nervous system as grade 鈪，

本文編號：1595005