發(fā)布時間：2018-03-10 16:45

  本文選題：三陰性乳腺癌　切入點：順鉑　出處：《吉林大學》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：背景:三陰性乳腺癌(Triple-negative breast cancer,TNBC)因缺乏針對性的靶向治療藥物,預后差,已成為乳腺癌治療的重要挑戰(zhàn)。新輔助化療的臨床研究結(jié)果表明,單藥順鉑(Cisplatin,CDDP)便能取得較高的病理完全緩解率,但其副作用較大。另有研究表明傳統(tǒng)戒酒藥雙硫侖(Disulfiram,DSF)具有抗腫瘤作用,能有效抑制多種腫瘤細胞的生長,并能增加傳統(tǒng)化療藥物的化療敏感性,顯示其與傳統(tǒng)化療藥物聯(lián)合應用的前瞻性意義,而目前尚缺乏DSF與CDDP聯(lián)合應用治療TNBC的相關(guān)實驗研究。納米藥物所具有的靶向性輸送和控制釋放等方面的優(yōu)勢為其進一步增強體內(nèi)抗腫瘤效果,降低化療藥物的毒副作用提供了又一思路。在正常組織中的微血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)完整,血管間隙比較致密,大分子和納米顆粒不易透過血管壁。而實體腫瘤組織中,新生的腫瘤血管結(jié)構(gòu)完整性差,血管壁間隙較寬,腫瘤區(qū)域缺乏濾除顆粒的淋巴回流系統(tǒng)。納米載藥膠束利用腫瘤組織部位的這些特點,被動靶向聚集在腫瘤部位,而不能在正常組織中聚集,從而提高藥物在腫瘤處的分布,從而顯示出其靶向釋放作用,明顯降低藥物的毒副作用,成為研究熱點和藥物開發(fā)的新方向,而目前尚缺乏納米膠束載藥DSF聯(lián)合納米膠束載藥CDDP的研究。目的:通過體內(nèi)及體外實驗,觀察DSF和CDDP單獨應用及聯(lián)合應用、以及DSF和CDDP的納米載藥膠束單獨應用及聯(lián)合應用對TNBC細胞系MDA-MB-231的生長抑制影響,并初步分析探討其可能機制。方法:1.MTT法檢測DSF、CDDP及其納米載藥膠束單獨及聯(lián)合應用在不同藥物濃度比情況下作用于MDA-MB-231細胞72 h后的生長抑制作用。流式細胞儀分別檢測DSF、CDDP及其納米載藥膠束單獨及聯(lián)合應用作用于MDA-MB-231細胞24 h后凋亡細胞變化。2.建立TNBC細胞系MDA-MB-231的BALB/c裸鼠移植瘤模型,當腫瘤體積達到50mm3時,將裸鼠稱重并隨機分為5組,每組6只,分別為PBS組(即對照組),CDDP組,CDDP載藥膠束(PLG-Pt)組,DSF載藥膠束(L-DSF)組,PLG-Pt㤘L-DSF組,給藥劑量:CDDP為5 mg/kg,DSF為15 mg/kg,分別于第0、2、4、7、9、11天尾靜脈注射給藥,定時間測量裸鼠體重及腫瘤大小。3.應用流式細胞儀檢測DSF、CDDP及其納米載藥膠束單獨及聯(lián)合應用作用于MDA-MB-231細胞3 h后的細胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平含量變化。電感耦合等離子體質(zhì)譜儀分別檢測DSF、CDDP及其納米載藥膠束單獨及聯(lián)合應用作用于MDA-MB-231細胞4 h、24 h后的細胞內(nèi)鉑含量的變化。結(jié)果:1.DSF與CDDP聯(lián)合應用作用于MDA-MB-231細胞72 h可明顯增強CDDP的抗腫瘤細胞增殖效應,在達到相同抑制效果時,CDDP的應用劑量大大降低。單獨應用CDDP作用于細胞后半數(shù)抑制濃度為32.012μM,DSF與CDDP以摩爾比4:60的比例聯(lián)合應用后,半數(shù)抑制濃度降至16.901μM;作用于MDA-MB-231細胞24h后,CDDP和DSF均可引起凋亡的發(fā)生,細胞凋亡數(shù)分別為28.2%和21.6%,當CDDP與DSF聯(lián)合應用時,凋亡細胞數(shù)增至52.6%,P0.001。DSF和CDDP載藥膠束聯(lián)合應用同樣表現(xiàn)出類似明顯的抑制效應。2.體內(nèi)試驗顯示,空白對照組小鼠腫瘤體積在第21天達到297.14±18.85 mm3,而治療組均表現(xiàn)出明顯的腫瘤抑制效果,P0.001。CDDP組雖表現(xiàn)出較強的抑瘤效果,但產(chǎn)生了嚴重的毒副作用造成不可逆的體重下降,給藥3次后停止治療,而停藥后這一損傷無法逆轉(zhuǎn),停藥后的5天內(nèi)小鼠相繼死亡。CDDP載藥膠束組在載有相同劑量的CDDP情況下也可表現(xiàn)出明顯的抑瘤效果,腫瘤體積為115.31±4.50 mm3,但體重未出現(xiàn)明顯的下降,生存期得到明顯延長,直至實驗結(jié)束小鼠仍存活。CDDP載藥膠束與DSF載藥膠束聯(lián)合應用后取得了更加明顯的抑瘤效果,腫瘤體積為67.30±17.60 mm3優(yōu)于任何一個單獨治療組,P0.05。3.微量的DSF與CDDP聯(lián)合應用后,與單獨應用CDDP相比,能明顯增加細胞內(nèi)ROS含量,P0.05。電感耦合等離子體質(zhì)譜儀結(jié)果顯示,作用于MDA-MB-231細胞24 h后,CDDP組細胞內(nèi)鉑的含量為(22.062±1.229)ng Pt/106 cells,而DSFCDDP組細胞內(nèi)鉑的含量為(28.607±1.380)ng Pt/106 cells,二者有明顯統(tǒng)計學差異,P0.01。一定時間內(nèi),DSF載藥膠束和CDDP載藥膠束聯(lián)合應用時,細胞內(nèi)ROS含量及鉑內(nèi)吞量均明顯增加,與小分子藥聯(lián)合應用時機制類似。結(jié)論:1.DSF與CDDP聯(lián)合應用能明顯抑制TNBC細胞系MDA-MB-231的增殖。2.CDDP納米載藥膠束同樣能有效抑制裸鼠體內(nèi)腫瘤的生長,但毒性較CDDP明顯降低,延長了裸鼠的生存期。3.CDDP載藥膠束與DSF載藥膠束均有明顯的抑瘤效果,當二者聯(lián)合應用后,抑瘤效果進一步增強。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.9

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

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本文編號：1594204