外泌體對A549細(xì)胞增殖、凋亡及遷移功能的影響
本文選題:肺癌 切入點:外泌體 出處:《廣東醫(yī)學(xué)》2017年10期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的觀察肺癌細(xì)胞來源的外泌體對腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡及遷移能力的影響。方法采用多步超速離心法從肺癌A549細(xì)胞的培養(yǎng)液上清中分離出肺癌細(xì)胞來源的外泌體,并通過透射電子顯微鏡觀察外泌體形態(tài),利用Western blot檢測其表面跨膜蛋白的表達(dá)。采用MTT法、ELISA法分別檢測外泌體對A549細(xì)胞增殖和凋亡的影響;采用Transwell法了解外泌體對A549細(xì)胞遷移能力的影響。結(jié)果觀察所提取的外泌體大小均勻,形態(tài)規(guī)則,多為圓形及橢圓形膜性囊泡盤狀結(jié)構(gòu),直徑30~100 nm,其外周包被被膜,表面具有豐富的四次跨膜蛋白CD9、CD63等。MTT法提示外泌體對A549細(xì)胞具有促增殖作用,且其影響具有時間和劑量依賴特征(P0.05),ELISA法檢測用外泌體共培育后的A549細(xì)胞的凋亡情況,結(jié)果顯示外泌體在一定程度上抑制腫瘤細(xì)胞凋亡(F=365.496,P=0.000)。Transwell法觀察顯示,外泌體具有促進A549細(xì)胞遷移運動的作用(F=252.005,P=0.000)。結(jié)論肺癌細(xì)胞來源的外泌體能促進A549細(xì)胞增殖、減少其凋亡、增強其遷移運動的能力。
[Abstract]:Objective To observe the exosome sources of lung cancer cells on tumor cell proliferation, apoptosis and migration. Method using multi step ultracentrifugation separation of exosomes from lung cancer cells from the culture supernatant of lung cancer A549 cells, and the exosome morphology was observed by transmission electron microscope, to detect the expression of the surface membrane protein by Western blot. By MTT method, respectively, to detect the influence of exosomes on proliferation and apoptosis of A549 cells by ELISA; Transwell was used to understand the effect of exosomes on the migration of A549 cells. Results exosomes from the uniform size and regular shape, mostly round and oval membranous sac bubble disc structure, diameter 30~100 nm, peripheral coated film, four transmembrane protein CD9 has rich surface, CD63.MTT suggested that exosomes could promote proliferation of A549 cells, and the effect is dose and time Dependence (P0.05), apoptosis of ELISA was measured by exosomes were after incubation of A549 cells, results showed that exosomes inhibit the apoptosis of tumor cells to a certain extent (F=365.496, P=0.000).Transwell observation showed that exosomes can promote A549 cell migration function (F=252.005, P=0.000) conclusion. Lung cancer cells derived extracellular fitness promote A549 cell proliferation, reduce apoptosis, enhance the ability of migration.
【作者單位】: 廣州市紅十字會醫(yī)院心胸外科;暨南大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院;
【基金】:廣州市產(chǎn)學(xué)研協(xié)同創(chuàng)新重大專項項目(編號:201604020063)
【分類號】:R734.2
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,本文編號:1593578
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