發(fā)布時(shí)間：2018-03-06 08:40

  本文選題：微流控芯片　切入點(diǎn)：多孔流分離　出處：《分析化學(xué)》2017年11期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：設(shè)計(jì)并制作了一種集多孔流分離(Multi-orifice flow fractionation,MOFF)技術(shù)與磁捕獲技術(shù)于一體的用于特異性分離和捕獲合成樣本中肝癌細(xì)胞Hep G2的多功能微流控細(xì)胞芯片。此芯片由玻璃基片和PDMS微通道蓋片組成,PDMS蓋片上含有3條進(jìn)樣通道、MOFF分離區(qū)和六邊形腔體的細(xì)胞富集檢測(cè)區(qū)。其中,MOFF分離區(qū)總長(zhǎng)20 mm,由80組長(zhǎng)度為0.18 mm、深度為50μm、收縮區(qū)域?qū)挾葹?.06 mm、擴(kuò)張區(qū)域?qū)挾葹?.20 mm的半菱形收縮/擴(kuò)張重復(fù)單元組成,每組收縮/擴(kuò)張重復(fù)單元間的夾角為103.0°。實(shí)驗(yàn)以肝癌細(xì)胞Hep G2-血細(xì)胞混懸液為樣本;根據(jù)磁珠表面修飾c-Met抗體能與肝癌細(xì)胞Hep G2特異性結(jié)合的原理,通過(guò)表面羧基化的磁珠、EDC(1 mg/m L)、NHS(1 mg/m L)和c-Met抗體制備了濃度為50μg/m L的免疫磁珠(AntiMNCs)懸浮液。在樣本流速為50μL/min條件下,利用外加磁場(chǎng)實(shí)現(xiàn)了血細(xì)胞合成樣本中微量肝癌細(xì)胞Hep G2的有效捕獲;采用微波加熱法以檸檬酸、硫脲為原料制備了用于熒光標(biāo)記Hep G2的碳量子點(diǎn),在芯片上實(shí)現(xiàn)了血液中肝癌細(xì)胞Hep G2的原位熒光可視化觀測(cè)。對(duì)芯片檢測(cè)區(qū)捕獲到的Hep G2進(jìn)行了顯微計(jì)數(shù)分析,對(duì)500μL血細(xì)胞(107cell/m L)中含10個(gè)Hep G2細(xì)胞的合成樣本,捕獲效率達(dá)到88.5%±6.7%(n=20)。結(jié)果表明,所設(shè)計(jì)的多模式多功能的微流控芯片具有良好的腫瘤細(xì)胞分離和檢測(cè)功能。
[Abstract]:A multifunctional microfluidic cell chip for specific isolation and capture of liver cancer cell line Hep G2 in synthetic samples was designed and fabricated, which integrates multi-orifice flow fractionation technique and magnetic capture technique. The microfluidic cell chip consists of glass substrate. And the PDMS microchannel capping plate consists of three sample injection channels, moff separation area and hexagonal cavity cell enrichment detection area. The total length of the PDMS is 20 mm, the length of 80 groups is 0.18 mm, the depth is 50 渭 m, and the width of contraction area is 0.06. A semirhombic contraction / dilatation repeating unit with a width of 0.20 mm in the expansion area, The angle of contraction / dilatation repeats in each group was 103.0 擄. The experiment took the suspension of Hep G2-blood cells as the sample, according to the principle that c-Met antibody modified by magnetic beads could specifically bind to Hep G2 of hepatoma cells. The suspension of 50 渭 g / mL immunomagnetic bead antiMNCswere prepared by carboxylated magnetic bead EDC1 mg/m mg/m L) and c-Met antibody. The flow rate of the sample was 50 渭 L / min. The effective capture of trace hepatoma cell Hep G2 in blood cell synthesis samples was realized by applying external magnetic field. Carbon quantum dots (QDs) for fluorescent labeling of Hep G2 were prepared by microwave heating method using citric acid and thiourea as raw materials. In situ fluorescence visualization of hepatoma cell Hep G2 in blood was carried out on the chip. The Hep G2 captured in the detection region of the microarray was counted and analyzed. The synthetic samples of 10 Hep G2 cells were obtained from the 500 渭 L blood cell line 107 cell / mL. The capture efficiency was 88.5% 鹵6.7 and 20%. The results showed that the multi-mode and multi-function microfluidic chip had a good function of tumor cell separation and detection.
【作者單位】： 重慶大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院;重慶大學(xué)微納系統(tǒng)及新材料技術(shù)國(guó)際研發(fā)中心;重慶大學(xué)新型微納器件與系統(tǒng)技術(shù)重點(diǎn)學(xué)科實(shí)驗(yàn)室;重慶大學(xué)光電工程學(xué)院微系統(tǒng)研究中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.21375156) 國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863)項(xiàng)目(No.2015AA021104) 重慶市前沿研究重點(diǎn)項(xiàng)目(No.cstc2015jcyj BX0010) 重慶市科學(xué)技術(shù)委員會(huì)社會(huì)民生科技創(chuàng)新項(xiàng)目(No.cstc2015shms zx00014)資助~~
【分類號(hào)】：O657.3;R735.7

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本文編號(hào)：1574106