本文選題：骨橋蛋白　切入點：乙肝病毒x蛋白　出處：《免疫學(xué)雜志》2017年07期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的在乙型肝炎病毒(HBV)相關(guān)性肝細(xì)胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中探討乙肝病毒x蛋白(HBx)對骨橋蛋白(osteopontin,OPN)表達(dá)及肝癌細(xì)胞干性的影響。方法采用免疫印跡(Western blot,WB)及免疫組化等方法在肝癌組織標(biāo)本上檢測OPN表達(dá)水平與患者性別、年齡、AFP、HBV病毒復(fù)制量、腫瘤大小、TNM分期等臨床病理因素的關(guān)系;在穩(wěn)定整合HBV基因組的HepG2.2.15細(xì)胞系及慢病毒介導(dǎo)的HBx轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞中,進(jìn)一步驗證HBV及HBx過表達(dá)對OPN及干性相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Nanog、Oct4,干性細(xì)胞表面標(biāo)記分子CD44、CD90、Ep CAM表達(dá)水平的影響。結(jié)果免疫組化及WB檢測結(jié)果均表明OPN在HBV陽性的HCC肝癌組織中的表達(dá)水平顯著高于HBV陰性的肝癌組織(P0.05)。HepG2.2.15細(xì)胞中OPN的mRNA及蛋白質(zhì)含量較HepG2細(xì)胞顯著增加(P0.05);在HepG2細(xì)胞中,過表達(dá)HBx顯著上調(diào)OPN mRNA及蛋白質(zhì)水平(P0.05),流式細(xì)胞術(shù)定量分析顯示過表達(dá)HBx的HepG2細(xì)胞中Ep CAM、CD90陽性的干性細(xì)胞數(shù)量明顯升高(P0.05),實時定量PCR顯示干性相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Nanog、Oct4及其表面標(biāo)志分子CD44、CD90、Ep CAM水平顯著升高。結(jié)論 HBx能夠顯著上調(diào)OPN的表達(dá),并增強(qiáng)肝癌細(xì)胞的干性,提示HBx/OPN/肝癌細(xì)胞干性增強(qiáng)通路可能在HBV相關(guān)HCC患者預(yù)后不良中具有重要作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of hepatitis B virus x protein (HBX) on the expression of osteopontin OPN (OPN) and the dryness of hepatoma cells in hepatocellular carcinoma (HCC) associated with hepatitis B virus (HBV). The expression level of OPN and the sex of patients were detected in cancer tissues. Clinical and pathological factors, such as HBV replication, tumor size, TNM staging, etc., in the HepG2.2.15 cell lines that stably integrate the HBV genome and the lentivirus-mediated HBx transfection into HepG2 cells, To further verify the effect of HBV and HBx overexpression on the expression of OPN and the dry-related transcription factor Nanog-Oct4, CD4hCD90Ep CAM, a marker molecule on the surface of dry cells. Results the results of immunohistochemistry and WB showed that OPN was present in HBV positive HCC HCC tissues. The mRNA and protein contents of OPN in P0.05N. HepG2.2.15 cells were significantly higher than those in HepG2 cells, while in HepG2 cells, the expression level of OPN was significantly higher than that of HepG2 cells. Overexpression of HBx significantly upregulated OPN mRNA and protein level (P0.05). Quantitative analysis by flow cytometry showed that the number of CD90 positive dry cells in HepG2 cells with HBx overexpression was significantly higher than that of P0.05. Real-time quantitative PCR showed the dry related transcription factor Nanogan Oct4, and. The expression of OPN was significantly up-regulated by HBx. The increased dryness of HBx/OPN/ hepatoma cells may play an important role in the poor prognosis of HBV related HCC patients.
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所肝膽外科;第三軍醫(yī)大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院病理研究所;重慶醫(yī)科大學(xué)分子醫(yī)學(xué)與腫瘤研究中心;重慶第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所肝膽外科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81372270,81270482)
【分類號】：R735.7

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本文編號：1559110