miR-125b靶向Sema4C調(diào)控STAT3信號(hào)通路影響非霍奇金淋巴瘤的侵襲遷移
本文選題:非霍奇金淋巴瘤 切入點(diǎn):miR-b 出處:《中國(guó)免疫學(xué)雜志》2017年07期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的:研究miR-125b靶向Sema4C調(diào)控STAT3信號(hào)通路影響非霍奇金淋巴瘤的侵襲遷移。方法:運(yùn)用QTPCR法檢測(cè)miR-125b在非霍奇金淋巴瘤組織和細(xì)胞株中的表達(dá);運(yùn)用免疫組化法檢測(cè)Sema4C在正常淋巴組織和非霍奇金淋巴瘤組織中的表達(dá);用雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)檢測(cè)miR-125b對(duì)Sema4C轉(zhuǎn)錄活性的影響;用Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)和劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-125b的表達(dá)對(duì)NK-92細(xì)胞侵襲能力的影響;用Western blot法檢測(cè)過(guò)表達(dá)miR-125b后NK-92細(xì)胞Sema4C的表達(dá)變化;Western blot法檢測(cè)沉默Sema4C后NK-92細(xì)胞STAT3信號(hào)通路的蛋白表達(dá)水平變化。結(jié)果:與正常淋巴組織比較,miR-125b在非霍奇金淋巴瘤組織中表達(dá)明顯降低[(0.48±0.05)%vs(1.59±0.38)%,P0.05],Sema4C在非霍奇金淋巴瘤中表達(dá)較高[(1.36±0.25)%vs(0.34±0.08)%,P0.05];過(guò)表達(dá)miR-125b后,NK-92細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力明顯降低[(326.25±7.75)%vs(58.75±5.76)%],Sema4C的表達(dá)水平下調(diào)[(84.26±6.94)%vs(15.61±4.68)%,P0.05]。沉默Sema4C后,NK-92細(xì)胞JAK和STAT3蛋白表達(dá)下調(diào)[(85.26±6.94)%vs(12.61±4.32)%,P0.05];雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果顯示,miR-125b可以直接調(diào)控Sema4C的轉(zhuǎn)錄活性。結(jié)論:在非霍奇金淋巴瘤組織和細(xì)胞株中,miR-125b可靶向Sema4C的表達(dá),從而調(diào)控非霍奇金淋巴瘤細(xì)胞的侵襲和遷移能力。
[Abstract]:Objective: to study the effect of STAT3 signaling pathway regulated by miR-125b targeting Sema4C on the invasion and migration of non-Hodgkin 's lymphoma. Methods: the expression of miR-125b in non-Hodgkin 's lymphoma tissues and cell lines was detected by QTPCR assay. The expression of Sema4C in normal lymphoid tissues and non-Hodgkin 's lymphoma tissues was detected by immunohistochemical method, and the effect of miR-125b on Sema4C transcription activity was detected by double luciferase reporter gene system. Transwell chamber invasion assay and scratch assay were used to detect the effect of miR-125b expression on the invasion ability of NK-92 cells. Western blot assay was used to detect the expression of Sema4C in NK-92 cells after overexpression of miR-125b. Western blot assay was used to detect the protein expression level of STAT3 signal pathway in NK-92 cells after Sema4C silencing. Results: compared with normal lymphoid tissues, the expression of Sema4C in non-Hodgkin 's lymphoma tissues was determined by Western blot assay. The expression of Sema4C in non-Hodgkin 's lymphoma was significantly decreased [0.48 鹵0.05 vs 1.59 鹵0.38] Sema4C was highly expressed in non-Hodgkin 's lymphoma [1.36 鹵0.25 vs 0.34 鹵0.08], the invasion and metastasis ability of NK-92 cells was significantly decreased after overexpression of miR-125b [326.25 鹵7.75 vs 58.75 鹵5.76%] Sema4C was down-regulated [84.26 鹵6.94 vs 15.61 鹵4.68]. After Sema4C silencing, the expression of JAK and STAT3 in NK-92 cells was down-regulated [85.26 鹵6.61 鹵4.32]. The results of photoenzyme reporter gene system showed that miR-125b could directly regulate the transcriptional activity of Sema4C. Conclusion: miR-125b can target the expression of Sema4C in non-Hodgkin 's lymphoma tissues and cell lines. Thus, the invasion and migration of non-Hodgkin's lymphoma cells are regulated.
【作者單位】: 鄭州大學(xué)河南省人民醫(yī)院血液內(nèi)科;
【基金】:2012年度河南省醫(yī)學(xué)科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(201203068)
【分類號(hào)】:R733.1
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