上調(diào)microRNA-214表達(dá)對肺癌細(xì)胞凋亡及耐藥性的影響
本文關(guān)鍵詞: 小分子核糖核酸- 肺癌 凋亡 多藥耐藥性 出處:《東南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2017年05期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的:探究microRNA-214過表達(dá)是否可以通過調(diào)節(jié)凋亡過程影響肺癌細(xì)胞的多藥耐藥性。方法:選擇2種不同的人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株和人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株作為實驗組,分別是H69細(xì)胞實驗組和H446細(xì)胞實驗組;A549細(xì)胞實驗組和H1299細(xì)胞組;選擇正常人肺上皮細(xì)胞(BEAs-2B)作為對照組。Real-time PCR法進行檢測肺癌細(xì)胞株內(nèi)miR-214的表達(dá)量。上調(diào)miR-214表達(dá)后給予不同的抗腫瘤藥物刺激,并MTT比色法檢測肺癌細(xì)胞株對藥物的敏感性;CCK-8法檢測細(xì)胞存活率和TUNEL法流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡;Western blot法檢測肺癌細(xì)胞株中Bcl-2和p53的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:Real-time PCR法檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),實驗組細(xì)胞中miR-214表達(dá)量明顯低于對照組BEAs-2B,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);CCK-8結(jié)果顯示,上調(diào)miR-214表達(dá)后肺癌細(xì)胞的存活率顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);MTT法結(jié)果顯示,上調(diào)miR-214表達(dá)后肺癌細(xì)胞對抗腫瘤藥物的敏感性顯著降低(P0.05);Western blot結(jié)果表明,上調(diào)miR-214基因表達(dá)后肺癌細(xì)胞Bcl-2和p53蛋白的異常表達(dá),與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);結(jié)論:上調(diào)miR-214表達(dá)能夠顯著降低肺癌細(xì)胞的存活率并加速凋亡的發(fā)生;同時miR-214過表達(dá)可以調(diào)控凋亡蛋白并降低肺癌細(xì)胞對藥物的敏感性。
[Abstract]:Objective: To explore whether overexpression of microRNA-214 can be regulated by multidrug resistance lung cancer cell apoptosis. Methods: 2 kinds of human small cell lung cancer cell lines and human non-small cell lung cancer cell line as the experimental group, the experimental group and the cells are H69 H446 cells in the experimental group; the experimental group of A549 cells and H1299 cells group; normal human lung epithelial cells (BEAs-2B) as the control group.Real-time PCR method was used to detect the expression of miR-214 in lung cancer cell lines. The upregulation of the expression of miR-214 after treated with different antitumor drug stimulation, and MTT assay detected the drug sensitivity of lung cancer cell lines; cell viability was examined by CCK-8 assay and TUNEL method cell apoptosis was detected by flow cytometry; the expression level of Bcl-2 and p53 in the detection of lung cancer cell line Western by blot protein. Results: the testing results of Real-time PCR showed that the miR-214 cells in the experimental group. The expression of BEAs-2B was significantly lower than the control group, the difference was statistically significant (P0.05); CCK-8 results showed that the upregulation of the expression of miR-214 after lung cancer cell survival rate decreased significantly, the difference was statistically significant (P0.05); MTT assay showed that the upregulation of the expression of miR-214 after the sensitivity of lung cancer cells to antitumor drugs decreased significantly (P0.05); Western the results of blot showed that the up regulation of miR-214 gene expression of Bcl-2 and p53 protein in lung cancer cells, compared with the control group the difference was statistically significant (P0.05); conclusion: overexpression of miR-214 can significantly reduce the survival rate of lung cancer cells and accelerate apoptosis; while overexpression of miR-214 can regulate apoptosis protein and reduce the sensitivity of lung cancer cells for the drugs.
【作者單位】: 武漢市普仁醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【分類號】:R734.2
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本文編號:1554815
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