本文關(guān)鍵詞： syndecan-1 syntenin 膠質(zhì)瘤 遷移 Rac1　出處：《遵義醫(yī)學(xué)院》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:探討syndecan-1和syntenin在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其相互作用對膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移能力的影響。方法:利用免疫組化分析syndecan-1和syntenin在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)部位、表達(dá)水平,與膠質(zhì)瘤級別的關(guān)系及二者在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)相關(guān)性;構(gòu)建syndecan-1過表達(dá)質(zhì)粒及小干擾RNA序列分別轉(zhuǎn)染膠質(zhì)瘤u251細(xì)胞,western blot檢測syndecan-1、syntenin、總的Rac1的表達(dá);細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)觀察不同處理組細(xì)胞的遷移能力;Rac1活性實(shí)驗(yàn)檢測不同處理組活化的Rac1蛋白水平。結(jié)果:高惡性級別膠質(zhì)瘤中,syndecan-1和syntenin表達(dá)水平較低惡性級別及對照組明顯增強(qiáng)(H=12.784,P=0.002;H=16.274,P=0.000),syndecan-1與syntenin表達(dá)均與膠質(zhì)瘤惡性級別呈正相關(guān)(rs=0.576,P=0.001;rs=0.661,P=0.000),且syndecan-1與syntenin在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)存在正相關(guān)(rs=0.628,P=0.001)。SDC1過表達(dá)的u251細(xì)胞中,syndecan-1、syntenin蛋白水平明顯高于對照及空載組(F=83.216,P=0.000;F=15.571,P=0.004),SDC1沉默組中,syndecan-1、syntenin蛋白水平明顯低于對照及陰性組(F=60.728,P=0.000;F=16.747,P=0.004);Transwell實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):與對照組相比,SDC1過表達(dá)可明顯增強(qiáng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移能力(F=95.559,P=0.000),而沉默SDC1后膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移能力明顯減弱(F=111.391,P=0.000);細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)顯示:與對照組相比,SDC1過表達(dá)可明顯增強(qiáng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞劃痕修復(fù)能力(F=69.89,P=0.000),而沉默SDC1后膠質(zhì)瘤細(xì)胞劃痕修復(fù)能力減弱(F=50.819,P=0.000);Rac1活性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):SDC1過表達(dá)后膠質(zhì)瘤細(xì)胞Rac1活化水平明顯高于對照及空載組(F=12.37,P=0.007),沉默SDC1后Rac1活化水平明顯低于對照及陰性組(F=13.082,P=0.006),各處理組總的Rac1無明顯改變(P0.05)。結(jié)論:1、syndecan-1和syntenin在正常腦組織中表達(dá)較少或缺如,在膠質(zhì)瘤組織中隨膠質(zhì)瘤級別增高而表達(dá)增高,且兩基因在膠質(zhì)瘤中存在正相關(guān);2、syndecan-1過表達(dá)上調(diào)syntenin的表達(dá),進(jìn)一步通過激活Rac1促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移。
[Abstract]:Objective: To investigate the effect of expression of syndecan-1 and syntenin in glioma and their interaction on the migration of glioma cells. Methods: using immunohistochemical analysis of the expression site, syndecan-1 and syntenin in glioma expression, expression in gliomas and the relationship between the level of glioma and two syndecan-1 construction; over expression of plasmid RNA and small interfering sequences were transfected into U251 glioma cells, Western blot detection of syndecan-1, syntenin, total Rac1; migration of cell scratch experiments and Transwell experiments of cells; Rac1 protein level Rac1 activity assay in different groups. Results: the activation of high grade gliomas the expression of syntenin, syndecan-1 and the low level of malignant level and control group increased significantly (H=12.784, P=0.002; H=16.274, P=0.000), syndecan-1 and syntenin expression with glue Related to tumor malignant level positively (rs=0.576, P=0.001; rs=0.661, P=0.000), and there was a positive correlation between syndecan-1 and syntenin expression in glioma tissues (rs=0.628, P=0.001) syndecan-1.SDC1 overexpression in U251 cells, the protein level of syntenin was significantly higher than the control group and no load (F=83.216, P=0.000; F=15.571, P=0.004). Syndecan-1 SDC1 silencing group, syntenin protein levels were significantly lower than the control, and the negative group (F=60.728, P=0.000; F=16.747, P=0.004; Transwell) found that: compared with the control group, SDC1 expression significantly increased glioma cell migration (F=95.559, P=0.000), and the silencing of SDC1 glioma cell migration ability decreased significantly (F=111.391, P=0.000); cell scratch test: compared with the control group, SDC1 overexpression can significantly enhance glioma cell scratch repair ability (F=69.89, P=0.000), and the silencing of SDC1 glioma cell scratch repair The complex capacity decreased (F=50.819, P=0.000); Rac1 activity test: overexpression of SDC1 in glioma cells Rac1 activation level is significantly higher than the control group and no load (F=12.37, P=0.007), SDC1 silencing Rac1 activation levels were significantly lower than the control group and the negative group (F=13.082, P=0.006), each treatment group had no significant change (Rac1 P0.05). Conclusion: 1. The expression of syndecan-1 and syntenin in small or absent in normal brain tissue in glioma with glioma grade increased expression and two genes in gliomas has a positive correlation; 2, overexpression of syndecan-1 up-regulated the expression of syntenin, further through the activation of Rac1 promote glioma cell migration.

【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R739.41

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本文編號：1552717