本文關(guān)鍵詞： lncRNA RP11-6O2.4 胃癌 臨床病理特征 lncRNA RP11-6O2.4 胃癌 信號通路 p38 SB203580　出處：《川北醫(yī)學院》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：第一部分LncRNA RP11-6O2.4在胃癌組織及胃癌細胞系中的表達情況及與患者臨床病理特征之間的關(guān)系目的:(1)探討lncRNA RP11-6O2.4在胃癌組織及胃癌細胞系中的表達情況。(2)探討RP11-6O2.4在胃癌組織中的表達水平與患者相關(guān)臨床病理特征的關(guān)系。方法:(1)通過lncRNA microarray檢測胃癌組織與對應(yīng)癌旁組織中表達存在差異的lncRNA,篩查表達差異大于10倍的lncRNA,最終確定lncRNA RP11-6O2.4作為本實驗的目的lncRNA。(2)通過熒光定量PCR進一步驗證100例胃癌及癌旁組織中RP11-6O2.4的表達水平變化。(3)通過熒光定量PCR驗證胃癌細胞系BGC-823、MGC-803、SGC-7901、AGS及正常胃黏膜上皮細胞GES-1中RP11-6O2.4的表達水平變化。(4)收集100例患者的臨床病理相關(guān)資料,研究分析lncRNA RP11-6O2.4與患者臨床病理特征之間的關(guān)系。結(jié)果:(1)lncRNA RP11-6O2.4在胃癌組織中的表達明顯低于癌旁組織(p0.05)(2)lncRNA RP11-6O2.4在多個胃癌細胞系中的表達低于正常胃黏膜上皮細胞(p0.05)。(3)lncRNA RP11-6O2.4的表達水平與患者的年齡、腫瘤體積的大小、浸潤深度(T分期)、ASA分級有關(guān)(p0.05)(4)利用ROC曲線評價lncRNA RP11-6O2.4表達水平對胃癌的診斷價值的結(jié)果中顯示AUC=0.6817,有一定的臨床診斷價值。結(jié)論:lncRNA RP11-6O2.4在胃癌組織和胃癌細胞系中表達均明顯降低,其降低與患者更高的年齡,更大的腫瘤體積、更深的浸潤程度、更高的ASA分級有關(guān),且RP11-6O2.4的表達水平亦具有一定的臨床診斷價值。第二部分LncRNA RP11-6O2.4參與胃癌細胞生物學行為調(diào)控的機制研究目的:探討RP11-6O2.4是否參與胃癌生物學行為調(diào)控,及其可能的分子機制方法:(1)在RP11-6O2.4表達降低的標本中(癌組織相對于癌旁組織)通過PCR和Western Blot進一步驗證在胃癌中部分較經(jīng)典的信號通路的表達變化,推測其是否參與了胃癌細胞生物學行為的調(diào)控。結(jié)果發(fā)現(xiàn)ASK1-p38-cyclin D1信號通路呈明顯激活狀態(tài)。(2)在體外實驗中,我們通過反向推理使用p38抑制劑下調(diào)ASK1-p38-cyclin D1信號通路,觀察不同胃癌細胞系中l(wèi)ncRNA RP11-6O2.4的表達是否發(fā)生相應(yīng)變化。(3)通過流式細胞術(shù)檢測經(jīng)p38抑制劑處理后胃癌細胞增殖和凋亡的變化。結(jié)果:(1)在RP11-6O2.4表達降低的組織中ASK1-p38-cyclin D1信號通路表達明顯上調(diào)(p0.05),呈顯著的激活狀態(tài)。(2)在胃癌細胞系MGC-803、BGC-823、SGC-7901、AGS中用p38特異性抑制劑SB203580對細胞進行處理后,結(jié)果顯示lncRNA RP11-6O2.4的表達水平均明顯升高(p0.05)間接提示lncRNA RP11-6O2.4經(jīng)由ASK1-p38-cyclin D1信號通路參與了胃癌細胞增殖活性調(diào)控。(3)在RP11-6O2.4變化最明顯的AGS細胞中,我們進一步檢測了ASK1-p38-cyclin D1信號通路中幾個關(guān)鍵蛋白的表達水平變化,ASK1表達明顯上調(diào)(p0.05)、cyclin D1明顯下調(diào)(p0.05),且流式細胞術(shù)檢測結(jié)果顯示G1期細胞比例明顯增多,S期細胞比例明顯下降,提示細胞增殖活性等到了明顯的抑制。結(jié)論:在lncRNA RP11-6O2.4表達降低的組織標本中,ASK1-p38-cyclin D1信號通路是明顯激活的,p38顯著上調(diào),進一步通過體外實驗對胃癌細胞系中p38信號分子給予特異性抑制后,可以顯著地引起RP11-6O2.4的明顯上調(diào),且細胞的增殖活性得到了明顯地抑制。結(jié)合RP11-6O2.4的臨床分析結(jié)果,我們推測RP11-6O2.4可能經(jīng)由ASK1-p38-cyclin D1信號通路參與了胃癌細胞增殖活性的調(diào)控。
[Abstract]:The expression of RP11 - 6O2 in gastric cancer tissues and gastric cancer cells was investigated by quantitative PCR . The expression level of RP11 - 6O2 0.4 in gastric cancer cells was significantly lower than that in patients with gastric cancer . ( 3 ) The expression level of several key proteins in ASK1 - p38 - cyclin D1 signaling pathway was significantly up - regulated ( p < 0.05 ) . The expression of ASK1 - p38 - cyclin D1 was significantly increased ( p < 0.05 ) , and the proliferation activity of the cells was significantly inhibited . The results of the clinical analysis of RP11 - 6O2 . 4 suggested that RP11 - 6O2 could be involved in the regulation of proliferation activity of gastric cancer cells via ASK1 - p38 - cyclin D1 signaling pathway .

【學位授予單位】：川北醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R735.2

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Mei Yang;Chang-Zhi Huang;;Mitogen-activated protein kinase signaling pathway and invasion and metastasis of gastric cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2015年41期

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本文編號：1547278