本文關(guān)鍵詞： miR- 胃癌 重組腺病毒 基因治療　出處：《生物工程學(xué)報(bào)》2017年07期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：構(gòu)建了miR-29b2c重組腺病毒Ad-miR-29b2c,考察了其對(duì)HGC-27、MGC-803胃癌細(xì)胞增殖及遷移的抑制作用。采用PCR從基因組擴(kuò)增miR-29b2c片段,并克隆至腺病毒穿梭載體pAdTrack-CMV中,構(gòu)建穿梭質(zhì)粒pAdT-29b2c,經(jīng)酶切及測序鑒定。穿梭質(zhì)粒經(jīng)PmeⅠ線性化后與腺病毒骨架載體共轉(zhuǎn)化BJ5183感受態(tài),產(chǎn)生重組腺病毒質(zhì)粒Ad-miR-29b2c,再經(jīng)PacⅠ線性化后轉(zhuǎn)染293A細(xì)胞進(jìn)行包裝。重組腺病毒擴(kuò)增后感染HGC-27細(xì)胞,通過MTT及細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)觀察Ad-miR-29b2c對(duì)HGC-27、MGC-803細(xì)胞增殖及遷移的影響。采用Western blotting檢測Ad-miR-29b2c對(duì)HGC-27、MGC-803細(xì)胞δ-catenin蛋白表達(dá)的影響。酶切、測序及熒光定量PCR結(jié)果表明重組腺病毒構(gòu)建成功,miR-29b及miR-29c在HGC-27細(xì)胞過表達(dá)。MTT實(shí)驗(yàn)表明Ad-miR-29b2c能顯著抑制HGC-27、MGC-803細(xì)胞增殖。細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)表明Ad-miR-29b2c能顯著抑制HGC-27、MGC-803細(xì)胞遷移。此外,Ad-miR-29b2c能顯著降低HGC-27、MGC-803細(xì)胞δ-catenin蛋白表達(dá)水平。綜上所述,構(gòu)建了miR-29b2c的重組腺病毒,并發(fā)現(xiàn)其可以抑制胃癌細(xì)胞HGC-27和MGC-803的增殖及遷移,該作用可能與miR-29抑制HGC-27、MGC-803細(xì)胞δ-catenin蛋白表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:MiR-29b2c recombinant adenovirus Ad-miR-29b2cwas constructed, and its inhibitory effect on proliferation and migration of HGC-27MGC-803 gastric cancer cells was investigated. MiR-29b2c fragment was amplified by PCR from the genome and cloned into adenovirus shuttle vector pAdTrack-CMV. The shuttle plasmid pAdT-29b2cwas constructed and identified by restriction endonuclease digestion and sequencing. The shuttle plasmid was linearized by Pme 鈪，

本文編號(hào)：1506900