本文關(guān)鍵詞： 胰腺星狀細胞 Hic-5 胰腺癌細胞 生物學行為　出處：《西南醫(yī)科大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的:通過研究胰腺星狀細胞(pancreatic stellate cell,PSC)和胰腺癌細胞共培養(yǎng)體系中胰腺星狀細胞Hic-5基因表達下調(diào)對胰腺癌細胞的生長增殖、凋亡、侵襲遷移等生物學行為能力的影響,為Hic-5作為胰腺癌浸潤轉(zhuǎn)移的新興標志物的研究及基因靶向治療奠定初步的理論和實驗基礎(chǔ)。方法:1.分別以0 pmol(A組)、6.25 pmol(B組)、12.5 pmol(C組)、25 pmol(D組)和50 pmol(E組)的siRNA沉默胰腺星狀細胞的Hic-5基因,轉(zhuǎn)染6小時后RT-PCR檢測各實驗組中胰腺星狀細胞的Hic-5mRNA表達,免疫熒光法檢測胰腺星狀細胞中Hic-5表達;Western blot檢測各實驗組胰腺星狀細胞中的Hic-5蛋白表達;2.分別以A組、B組、C組、D組和E組胰腺星狀細胞與相同的胰腺癌細胞a組、b組、c組、d組、e組行共培養(yǎng)48h;3.共培養(yǎng)結(jié)束后,采用細胞劃痕實驗和Transwell實驗檢測各組胰腺癌細胞侵襲遷移能力變化;采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法檢測各組胰腺癌細胞增殖率變化;采用流式細胞法檢測各組胰腺癌細胞凋亡率變化;采用免疫熒光法和Western blot檢測各組胰腺星狀細胞中MMP-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)表達變化。結(jié)果:1.Hic-5表達在胰腺星狀細胞的細胞質(zhì)中,胰腺星狀細胞Hic-5 mRNA和Hic-5蛋白表達量隨Hic-5 siRNA轉(zhuǎn)染濃度增大逐漸減少,與A組比較,C組、D組和E組減少明顯,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);各實驗組中胰腺星狀細胞Hic-5免疫熒光強度隨Hic-5 siRNA轉(zhuǎn)染濃度增大逐漸減少,與A組比較,D組和E組減少明顯,其差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.隨著胰腺星狀細胞Hic-5 siRNA轉(zhuǎn)染濃度增大,與之對應的各組胰腺癌細胞相對遷移距離逐漸減小,與a組比較,d組和e組胰腺癌細胞相對遷移距離減小明顯,其差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);各組胰腺癌細胞穿膜細胞數(shù)逐漸減少,與a組比較,c組、d組和e組胰腺癌細胞穿膜數(shù)量減少明顯,其差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);各組胰腺癌細胞凋亡率逐漸增大;各組胰腺癌細胞增殖率逐漸減小,與a組比較c組、d組和e組胰腺癌細胞增殖率有顯著減小,其差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);各組胰腺星狀細胞MMP-9蛋白表達量和熒光強度逐漸減少,與A組比較,C組、D組和E組細胞MMP-9蛋白表達量和免疫熒光強度減少明顯,其差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論:1.Hic-5 siRNA序列在胰腺星狀細胞中取得較好的轉(zhuǎn)染效率;2.成功建立Hic-5沉默后的胰腺星狀細胞與胰腺癌細胞共培養(yǎng)模型;3.Hic-5的siRNA可有效抑制胰腺星狀細胞中Hic-5的表達,同時降低其MMP-9蛋白表達;4.胰腺星狀細胞中Hic-5表達的下調(diào)可顯著降低胰腺癌細胞增殖能力,增加胰腺癌細胞凋亡能力,同時降低胰腺癌細胞的侵襲、遷移能力。
[Abstract]:The expression of Hic - 5 mRNA in pancreatic stellate cells was detected by Western blot . Results : 1 . The expression of Hic - 5 mRNA and Hic - 5 mRNA in pancreatic stellate cells were detected by Western blot . Results : 1 . The expression of Hic - 5 mRNA and Hic - 5 mRNA in pancreatic stellate cells was significantly decreased by Western blot . Results : 1 . The expression of MMP - 9 protein in pancreatic stellate cells was decreased and the expression of MMP - 9 protein in pancreatic stellate cells was decreased .

【學位授予單位】：西南醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R735.9

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 王楠;楊劍峰;賈振宇;何楊;許春芳;;Matriptase表達下調(diào)對胰腺癌細胞株SW1990侵襲的影響[J];中華胰腺病雜志;2015年04期

2 李波;雷小峰;;Hic-5/ARA55蛋白的研究進展[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2013年01期

3 鐘英強;黃花榮;劉娟;林瑩;夏忠勝;昝慧;;siRNA沉默COX-2基因?qū)θ艘认侔〤apan-2細胞增殖、細胞周期、凋亡和成瘤能力的影響[J];中國病理生理雜志;2011年07期

4 巫靜嫻;趙涌;賈世軍;李圓圓;;CD147與基質(zhì)金屬蛋白酶-2,3,9在卵巢癌中的表達及臨床病理意義[J];重慶醫(yī)科大學學報;2007年11期

5 高振軍;吳愷;王興鵬;;胰腺星狀細胞對胰腺癌AsPC-1細胞侵襲轉(zhuǎn)移的影響[J];中華胰腺病雜志;2013年04期

相關(guān)碩士學位論文 前2條

1 張光年;Hic-5在肝細胞癌組織中的表達及意義[D];西南醫(yī)科大學;2016年

2 楊中秋;Hic-5在人胰腺癌組織中的表達及意義[D];西南醫(yī)科大學;2016年

，

本文編號：1503240