本文關鍵詞： RegⅣ基因 胰腺癌 增殖 侵襲　出處：《安徽醫(yī)科大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的 研究RegⅣ基因?qū)σ认侔┘毎飳W行為的影響,探討RegⅣ對胰腺癌細胞增殖、侵襲作用機制。方法(1)利用shRNA慢病毒轉(zhuǎn)染胰腺癌PANC-1細胞得到低表達RegⅣ基因的PANC-1細胞,以及利用過表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染胰腺癌細胞BxPC-3獲得高表達RegⅣ基因的BxPC-3細胞；(2)實時熒光定量PCR(Real Time PCR)及蛋白免疫印跡分析(Western Blot)檢測shRNA慢病毒及過表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率；(3)CCK-8法檢測轉(zhuǎn)染shRNA慢病毒及過表達質(zhì)粒后各組細胞的增殖能力的改變；(4)利用劃痕實驗檢測轉(zhuǎn)染shRNA慢病毒及過表達質(zhì)粒后各組細胞的遷移能力的變化；(5)利用Transwell侵襲實驗檢測轉(zhuǎn)染shRNA慢病毒及過表達質(zhì)粒后各組細胞侵襲能力的變化；(6)Western Blot法檢測上調(diào)RegⅣ基因后的胰腺癌細胞BxPC-3中蛋白表達水平的變化情況；(7)裸鼠皮下成瘤實驗觀察下調(diào)RegⅣ基因后的胰腺癌細胞PANC-1在裸鼠體內(nèi)的生長情況。結(jié)果(1)轉(zhuǎn)染shRNA慢病毒后胰腺癌細胞PANC-1中RegⅣ基因的mRNA和蛋白表達均明顯下降,轉(zhuǎn)染過表達質(zhì)粒后胰腺癌細胞BxPC-3中RegⅣ基因的mRNA和蛋白表達均明顯上升；(2)CCK-8檢測細胞增殖能力發(fā)現(xiàn),下調(diào)RegⅣ后PANC-1細胞較對照組PACN-1細胞增殖能力明顯下降,上調(diào)RegⅣ后BxPC-3細胞較對照組BxPC-3細胞增殖能力明顯提升；(3)劃痕實驗顯示,下調(diào)RegⅣ后的胰腺癌細胞PANC-1遷移能力較對照組PACN-1細胞顯著下降,上調(diào)RegⅣ后的胰腺癌細胞BxPC-3遷移能力較對照組BxPC-3細胞顯著增加；(4)Transwell侵襲實驗結(jié)果提示:下調(diào)RegⅣ后的胰腺癌細胞PANC-1侵襲能力較對照組PANC-1細胞顯著下降,上調(diào)RegⅣ后的胰腺癌細胞BxPC-3侵襲能力較對照組BxPC-3細胞顯著增加；(5)Western Blot結(jié)果顯示:在胰腺癌細胞BxPC-3中,上調(diào)RegⅣ基因的表達水平后,E-cadherin的表達水平顯著下降,促進胰腺癌細胞上皮細胞間皮化轉(zhuǎn)化(EMT)；(6)裸鼠皮下成瘤實驗顯示,下調(diào)RegⅣ基因后的胰腺癌細胞株PANC-1所形成的腫瘤在裸鼠體內(nèi)生長速度較對照組細胞所形成的腫瘤生長速度顯著減緩。結(jié)論 在胰腺癌細胞BxPC-3中上調(diào)RegⅣ基因的表達可增加胰腺癌細胞增殖、遷移、侵襲能力,并可下調(diào)胰腺癌細胞BxPC-3內(nèi)E-cadherin蛋白的表達水平,促進上皮細胞間皮化；在胰腺癌細胞PANC-1中下調(diào)RegⅣ基因的表達可降低胰腺癌細胞增殖、遷移、侵襲能力,并可減慢腫瘤在裸鼠體內(nèi)的生長速度。因此,RegⅣ基因在胰腺癌中具有促進增殖、遷移和侵襲的作用,并有促進EMT的作用。
[Abstract]:Objective to study the effect of Reg 鈪，

本文編號：1493147