本文關(guān)鍵詞： RegⅣ基因 胰腺癌 增殖 侵襲　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：目的 研究RegⅣ基因?qū)σ认侔┘?xì)胞生物學(xué)行為的影響,探討RegⅣ對(duì)胰腺癌細(xì)胞增殖、侵襲作用機(jī)制。方法(1)利用shRNA慢病毒轉(zhuǎn)染胰腺癌PANC-1細(xì)胞得到低表達(dá)RegⅣ基因的PANC-1細(xì)胞,以及利用過(guò)表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染胰腺癌細(xì)胞BxPC-3獲得高表達(dá)RegⅣ基因的BxPC-3細(xì)胞；(2)實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real Time PCR)及蛋白免疫印跡分析(Western Blot)檢測(cè)shRNA慢病毒及過(guò)表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率；(3)CCK-8法檢測(cè)轉(zhuǎn)染shRNA慢病毒及過(guò)表達(dá)質(zhì)粒后各組細(xì)胞的增殖能力的改變；(4)利用劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染shRNA慢病毒及過(guò)表達(dá)質(zhì)粒后各組細(xì)胞的遷移能力的變化；(5)利用Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染shRNA慢病毒及過(guò)表達(dá)質(zhì)粒后各組細(xì)胞侵襲能力的變化；(6)Western Blot法檢測(cè)上調(diào)RegⅣ基因后的胰腺癌細(xì)胞BxPC-3中蛋白表達(dá)水平的變化情況；(7)裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)觀(guān)察下調(diào)RegⅣ基因后的胰腺癌細(xì)胞PANC-1在裸鼠體內(nèi)的生長(zhǎng)情況。結(jié)果(1)轉(zhuǎn)染shRNA慢病毒后胰腺癌細(xì)胞PANC-1中RegⅣ基因的mRNA和蛋白表達(dá)均明顯下降,轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)質(zhì)粒后胰腺癌細(xì)胞BxPC-3中RegⅣ基因的mRNA和蛋白表達(dá)均明顯上升；(2)CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖能力發(fā)現(xiàn),下調(diào)RegⅣ后PANC-1細(xì)胞較對(duì)照組PACN-1細(xì)胞增殖能力明顯下降,上調(diào)RegⅣ后BxPC-3細(xì)胞較對(duì)照組BxPC-3細(xì)胞增殖能力明顯提升；(3)劃痕實(shí)驗(yàn)顯示,下調(diào)RegⅣ后的胰腺癌細(xì)胞PANC-1遷移能力較對(duì)照組PACN-1細(xì)胞顯著下降,上調(diào)RegⅣ后的胰腺癌細(xì)胞BxPC-3遷移能力較對(duì)照組BxPC-3細(xì)胞顯著增加；(4)Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:下調(diào)RegⅣ后的胰腺癌細(xì)胞PANC-1侵襲能力較對(duì)照組PANC-1細(xì)胞顯著下降,上調(diào)RegⅣ后的胰腺癌細(xì)胞BxPC-3侵襲能力較對(duì)照組BxPC-3細(xì)胞顯著增加；(5)Western Blot結(jié)果顯示:在胰腺癌細(xì)胞BxPC-3中,上調(diào)RegⅣ基因的表達(dá)水平后,E-cadherin的表達(dá)水平顯著下降,促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞上皮細(xì)胞間皮化轉(zhuǎn)化(EMT)；(6)裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)顯示,下調(diào)RegⅣ基因后的胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1所形成的腫瘤在裸鼠體內(nèi)生長(zhǎng)速度較對(duì)照組細(xì)胞所形成的腫瘤生長(zhǎng)速度顯著減緩。結(jié)論 在胰腺癌細(xì)胞BxPC-3中上調(diào)RegⅣ基因的表達(dá)可增加胰腺癌細(xì)胞增殖、遷移、侵襲能力,并可下調(diào)胰腺癌細(xì)胞BxPC-3內(nèi)E-cadherin蛋白的表達(dá)水平,促進(jìn)上皮細(xì)胞間皮化；在胰腺癌細(xì)胞PANC-1中下調(diào)RegⅣ基因的表達(dá)可降低胰腺癌細(xì)胞增殖、遷移、侵襲能力,并可減慢腫瘤在裸鼠體內(nèi)的生長(zhǎng)速度。因此,RegⅣ基因在胰腺癌中具有促進(jìn)增殖、遷移和侵襲的作用,并有促進(jìn)EMT的作用。
[Abstract]:Objective to study the effect of Reg 鈪，

本文編號(hào)：1493147