醌茜素對人肝癌Huh7細胞的凋亡誘導(dǎo)作用及其抗腫瘤機制
本文關(guān)鍵詞: 醌茜素 肝癌 細胞凋亡 Akt信號通路 活性氧 出處:《腫瘤防治研究》2017年07期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的探討醌茜素誘導(dǎo)人肝癌Huh7細胞凋亡的機制。方法 MTT法測定醌茜素對人肝癌Hep G2、Hep3B和Huh7細胞的殺傷作用;倒置顯微鏡下觀察醌茜素處理后Huh7細胞形態(tài)學(xué)變化;Annexin V-FITC/PI雙染法及流式細胞術(shù)檢測其對肝癌Huh7細胞的誘導(dǎo)凋亡作用;蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測細胞凋亡相關(guān)蛋白的表達量變化;流式細胞術(shù)檢測醌茜素處理后細胞內(nèi)ROS的表達水平。結(jié)果與對照組(0 h)相比醌茜素能夠明顯抑制人肝癌細胞的存活率(P=0.0204)。經(jīng)醌茜素處理后的實驗組Huh7細胞呈現(xiàn)經(jīng)典的細胞皺縮、核固縮等現(xiàn)象。實驗組(24 h)Huh7細胞凋亡率為50.63%,明顯高于對照組(0 h)(15.58%)(P=0.0001)。共同處理Akt抑制劑和醌茜素后,促凋亡蛋白Bad和cleaved-caspase-3表達量均逐漸增加,抗凋亡蛋白磷酸化的Akt和Bcl-2均逐漸減少(P0.05)。醌茜素處理后,可增加Huh7細胞內(nèi)活性氧的水平。結(jié)論醌茜素對人肝癌Huh7細胞具有殺傷作用,且呈濃度依賴性。其機制可能是醌茜素抑制細胞內(nèi)Akt的表達及磷酸化水平或誘導(dǎo)活性氧的產(chǎn)生,進而促進Huh7細胞的凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of apoptosis induced by alizarin in human hepatocellular carcinoma (Huh7) cells. Methods MTT assay was used to determine the killing effect of alizarin on Hep G _ 2 Hep3B and Huh7 cells. The morphologic changes of Huh7 cells treated with alizarin quinone were observed under inverted microscope. Annexin V-FITC / Pi double staining and flow cytometry were used to detect the apoptosis of Huh7 cells. The expression of apoptosis-related protein was detected by Western blot. Flow cytometry was used to detect the expression of ROS in the cells treated with alizarin. Results compared with the control group for 0 h, alizarin could significantly inhibit the survival rate of human hepatoma cells. The Huh7 cells of the experimental group treated with alizarin showed classic cell shrinkage. The apoptosis rate of Huh7 cells in the experimental group was 50.63% at 24 h. It was significantly higher than that of the control group at 0 h after treatment with Akt inhibitor and quinoid alizarin. The expression of apoptotic protein Bad and cleaved-caspase-3 increased gradually. The phosphorylated Akt and Bcl-2 of anti-apoptotic protein decreased gradually (P 0.05). Conclusion alizarin can kill human hepatoma Huh7 cells. The mechanism may be that alizarin inhibits the expression of Akt and phosphorylation or induces the production of reactive oxygen species (Ros), which may promote the apoptosis of Huh7 cells.
【作者單位】: 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院;哈爾濱醫(yī)科大學(xué)第五醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【基金】:黑龍江省自然科學(xué)基金(LC2015036) 黑龍江省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目(201710223001) 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)校內(nèi)培育課題(XA2015-04);黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)研究生創(chuàng)新科研項目(YJSCX2017-Y72)
【分類號】:R735.7
【正文快照】: 0引言肝癌是最常見的惡性腫瘤之一,其致死率僅次于胃癌、食管癌,在世界范圍內(nèi)排第三位[1-2],F(xiàn)今有效治療肝癌的方法是進行手術(shù)切除或肝移植,但臨床上能得到有效治療的患者僅占30%~40%,因此,尋找有效治療肝癌的藥物極為重要[2-4]。醌茜素(quinalizarin,化學(xué)名1,2,5,8-四羥基
【參考文獻】
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【共引文獻】
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本文編號:1487506
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