發(fā)布時(shí)間：2018-01-30 01:24

  本文關(guān)鍵詞： miR- 小非編碼RNA 早期生長(zhǎng)反應(yīng)蛋白 肝癌 表型　出處：《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》2017年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:研究mi R-718和早期生長(zhǎng)反應(yīng)蛋白3(EGR3)在肝癌細(xì)胞系Hep G2及SMMC-7721中對(duì)細(xì)胞惡性行為的作用。創(chuàng)新點(diǎn):首次在肝癌細(xì)胞系Hep G2和SMMC-7721中發(fā)現(xiàn)miR-718作為抑癌基因及EGR3作為促癌基因起到調(diào)控腫瘤惡性行為的作用。方法:采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法構(gòu)建mi R-718和EGR3的過表達(dá)及敲降質(zhì)粒,并采用實(shí)時(shí)定量PCR(q RT-PCR)方法驗(yàn)證質(zhì)粒有效性;采用MTT法和克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)肝癌細(xì)胞系HepG 2和SMMC-7721的生長(zhǎng)增殖能力;采用Transwell遷移侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)肝癌細(xì)胞系Hep G2和SMMC-7721的遷移和侵襲能力;采用增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(EGFP)熒光報(bào)告載體實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-718的靶基因;采用qR T-PCR和蛋白質(zhì)印跡(Western blot)檢測(cè)相關(guān)基因表達(dá)水平的變化。結(jié)論:mi R-718在肝癌細(xì)胞系HepG 2和SMMC-7721中起到抑癌基因的作用;EGR3在肝癌細(xì)胞系Hep G2和SMMC-7721中起到促癌基因的作用;miR-718是通過靶定EGR3 m RNA 3'UTR下調(diào)EGR3的表達(dá)起到抑癌基因的作用。
[Abstract]:Objective: to study the expression of mi R-718 and early growth response protein 3 (EGR3). Effect of hepatoma cell line Hep G2 and SMMC-7721 on malignant behavior of hepatoma cell line. Innovation: for the first time in hepatocellular carcinoma cell line Hep. MiR-718 as tumor suppressor gene and EGR3 as promoter gene were found in G2 and SMMC-7721. Methods: polymerase chain reaction (PCR) was used to regulate the malignant behavior of tumor. The overexpression and knockdown plasmid of mi R-718 and EGR3 were constructed by PCR. The validity of plasmid was verified by real-time quantitative PCR(q RT-PCR method. The growth and proliferation of hepatoma cell line HepG 2 and SMMC-7721 were detected by MTT assay and clone forming assay. The migration and invasion ability of hepatoma cell line Hep G2 and SMMC-7721 were detected by Transwell migration and invasion assay. The enhanced green fluorescent protein (EGFP) fluorescent report vector was used to verify the target gene of miR-718. QR T-PCR and Western blot were used. Conclusion: the cell line HepG 2 and SMMC-7721 play an important role in inhibiting oncogene expression. EGR3 plays the role of oncogene promoter in Hep G2 and SMMC-7721 cell lines. MiR-718 plays a role in tumor suppressor gene by targeting EGR3 m RNA 3 UTR to down-regulate the expression of EGR3.
【作者單位】： Clinical
【基金】：Project supported by the Science and Technology Project of Higher Education of Shandong Province(No.J12LK07),China
【分類號(hào)】：R735.7
【正文快照】： 1 IntroductionHepatocellular carcinoma(HCC)is one of themost prevalent and aggressive human malignancies worldwide,and it has a very poor prognosis(Walleret al.,2015).Men are more susceptible to HCC thanwomen and it is a leading cause of cancer-relatedd

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本文編號(hào)：1474905