紫檀芪對舌鱗癌細(xì)胞株Tca8113凋亡的影響研究
本文關(guān)鍵詞: 紫檀芪 Tca8113 凋亡 出處:《錦州醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的本實驗以舌鱗癌細(xì)胞系Tac8113細(xì)胞為研究對象,通過體外實驗研究,從細(xì)胞水平觀察紫檀芪對Tac8113細(xì)胞系的增殖抑制作用,探討其可能存在的機制,為紫檀芪的抗舌鱗癌作用提供理論及實驗依據(jù)。方法MTT方法檢測紫檀芪不同濃度以及不同作用時間對舌鱗癌細(xì)胞株Tca8113生長活性的影響,使用0、2.5、5、10、15和20μmol/L的紫檀芪為終濃度的培養(yǎng)基培養(yǎng)舌鱗癌細(xì)胞株Tca8113,使用96孔板進(jìn)行鋪板,分別作用24h、48h和72h后上機檢測OD值。用藥后48h流式細(xì)胞術(shù)檢測紫檀芪處理后Tca8113細(xì)胞的凋亡情況。Western blot測定Bax、Fas、Caspase3基因蛋白表達(dá)水平。使用SPSS19.0軟件分析,計量資料以(?)表示,組間比較使用方差分析。P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果MTT檢測結(jié)果表明不同濃度的紫檀芪對舌鱗癌細(xì)胞株Tca8113生長有抑制作用,且隨著紫檀芪藥物濃度的升高,促進(jìn)凋亡作用逐漸增強。形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)紫檀芪作用后的細(xì)胞呈明顯凋亡狀態(tài),部分細(xì)胞胞漿濃縮特征。流式細(xì)胞儀檢測表明,紫檀芪作用于舌鱗癌細(xì)胞株Tca8113,不同濃度的紫檀芪終濃度培養(yǎng)基培養(yǎng)48h,誘導(dǎo)細(xì)胞株總凋亡率的均值與陰性對照比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),且隨著紫檀芪藥物濃度的升高,促進(jìn)凋亡作用逐漸增強,2.5μmol/L紫檀芪終濃度培養(yǎng)基培養(yǎng)48h,誘導(dǎo)細(xì)胞株總凋亡率的均值為26.76%,20μmol/L紫檀芪共培養(yǎng)48h,誘導(dǎo)細(xì)胞株總凋亡率的均值為91.11%。Western blot測定顯示,Bax、Fas、Caspase3蛋白表達(dá)增強的程度隨著紫檀芪的濃度增加而升高。結(jié)論紫檀芪能抑制舌鱗癌細(xì)胞Tca8113的體外生長,上調(diào)Bax、Fas、Caspase3蛋白表達(dá)誘導(dǎo)其凋亡,可能是其作用機制之一。
[Abstract]:Objective to investigate the inhibitory effect of Radix Astragali on the proliferation of Tac8113 cell line, a tongue squamous cell carcinoma cell line, at the cell level. The possible mechanism of its existence is discussed. Methods MTT method was used to detect the effects of different concentrations and different time of action on the growth activity of Tca8113 cell line in tongue squamous cell carcinoma cell line. Tca8113 cell line of tongue squamous cell carcinoma was cultured on the culture medium of Astragalus membranaceus at the final concentration of 0 ~ 2. 5 and 20 渭 mol/L, and was paved with 96 well plates. The cells were treated for 24 hours respectively. OD value was detected after 48 h and 72 h, apoptosis of Tca8113 cells was detected by flow cytometry 48 h after treatment. Bax was detected by Western blot. The expression level of caspase3 gene was analyzed by SPSS19.0 software. ). Results the results of MTT test showed that different concentrations of Radix Astragali could inhibit the growth of tongue squamous cell carcinoma cell line Tca8113. With the increase of drug concentration of Radix Astragali, the effect of promoting apoptosis was gradually enhanced. Morphological observation showed that the cells treated with Rhizoma Astragali showed obvious apoptotic state, and some of the cells were concentrated in cytoplasm. Flow cytometry showed that. Radix Astragali was applied to tongue squamous cell carcinoma cell line Tca8113 and cultured on different concentration medium for 48 h. Compared with the negative control, the mean value of the total apoptosis rate of the induced cell line was significantly different from that of the negative control group (P 0.05), and with the increase of the drug concentration of Astragalus membranaceus, the effect of promoting apoptosis was gradually enhanced. The average rate of apoptosis induced by 2.5 渭 mol/L rosewood final concentration culture medium for 48 h was 26.76 渭 mol/L and 20 渭 mol/L respectively. The average apoptotic rate was 91.11%. Western blot assay showed that Baxanthus FAS. Conclusion Radix Astragali can inhibit the growth of tongue squamous cell Tca8113 in vitro and up-regulate the expression of Baxanthus FAS. The expression of Caspase3 protein induces its apoptosis, which may be one of its mechanisms.
【學(xué)位授予單位】:錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R739.8
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,本文編號:1474830
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