本文關(guān)鍵詞： AMPK DVL3 β-catenin 二甲雙胍 細(xì)胞生長 乳腺癌　出處：《南昌大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:AMPK(Adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase)即AMP依賴性蛋白激酶是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,是調(diào)節(jié)能量代謝的關(guān)鍵分子,是機(jī)體中能源系統(tǒng)的主要監(jiān)管機(jī)構(gòu),在細(xì)胞或組織中可以通過調(diào)節(jié)下游信號(hào)分子DVL3和β-catenin蛋白調(diào)控細(xì)胞新陳代謝和保護(hù)其免受各種外界壓力的功能。AMPK激活劑能夠通過對腫瘤細(xì)胞的生長進(jìn)行抑制進(jìn)而達(dá)到治療疾病的效果。但是,對于AMPK如何活化和如何在癌癥中抑制癌細(xì)胞增殖的分子機(jī)制到目前仍然并不十分清楚。我們通過研究AMPK激活劑對乳腺癌細(xì)胞和組織的影響,以期闡明其作用的分子機(jī)制,為將來用于臨床治療提供可靠的理論依據(jù)。方法:收集并用Western Blot和免疫組化法分析40例乳腺癌患者組織中AMP依賴性蛋白激酶下游分子DVL3和β-catenin的蛋白質(zhì)表達(dá)水平與乳腺癌細(xì)胞病理特征,預(yù)后以及不同分子亞型之間的相關(guān)性。利用Western Blot法檢測了加載有DVL3質(zhì)�；蛘遱hRNA-DVL3的MCF-7、MDA-MB-231、T-47D乳腺癌細(xì)胞和MCF-10乳腺細(xì)胞的DVL3表達(dá)和細(xì)胞周期的變化。利用AMPK的激活劑二甲雙胍處理乳腺癌細(xì)胞通過體外劃痕實(shí)驗(yàn),Transwell法以及細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)檢測乳腺癌細(xì)胞的發(fā)展。構(gòu)建了乳腺癌移植瘤的模式小鼠結(jié)合HE染色和Western Blot法檢測了DVL3和β-catenin的表達(dá)水平。結(jié)果:乳腺癌組織中存在DVL3的過表達(dá),并且與分型、分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和分期相關(guān),DVL3在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶的表達(dá)明顯高于原發(fā)灶。DVL3過表達(dá)與異常表達(dá)跟乳腺癌的不良預(yù)后正相關(guān),并可作為影響乳腺癌預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。DVL3能夠與Wnt/β-catenin信號(hào)通路作用,顯著調(diào)節(jié)癌細(xì)胞的生長。AMPK激活劑有可能抑制乳腺癌細(xì)胞的生長,減少DVL3與Wnt/β-catenin信號(hào)的表達(dá)。進(jìn)一步對轉(zhuǎn)染過表達(dá)或者抑制DVL3的乳腺癌細(xì)胞進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)DLV3參與了細(xì)胞的增殖,遷移和凋亡等過程。AMPK激活劑是通過減少DVL3的表達(dá)和降低β-catenin水平來抑制乳腺癌細(xì)胞的生長。免疫印跡和免疫組織化學(xué)顯示DVL3與β-catenin表達(dá)水平顯著相關(guān)。過表達(dá)DVL3導(dǎo)致β-catenin表達(dá)水平上升和乳腺癌細(xì)胞的過度生長,這證實(shí)通過Wnt/β-catenin通路激活的DVL3與乳腺癌的發(fā)展有關(guān)。為了闡明機(jī)制,我們在體內(nèi)和體外使用了AMPK活化劑確認(rèn)對DVL3和β-catenin是否存在依賴關(guān)系。結(jié)論:DLV3不僅在乳腺癌中存在著過表達(dá),而且是通過經(jīng)典的信號(hào)通路而發(fā)揮促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖,遷移和侵襲的能力。AMPK激活劑二甲雙胍能夠抑制DVL3的表達(dá)水平,從而降低β-catenin,c-Myc和CyclinD1蛋白的表達(dá),最終導(dǎo)致了乳腺癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲的明顯抑制。本研究結(jié)果證實(shí),本論文的研究結(jié)果對于臨床有較高的應(yīng)用價(jià)值,同時(shí)能夠提倡使用二甲雙胍通過特定分子機(jī)制對乳腺癌進(jìn)行治療。
[Abstract]:Objective: Adenosine 5 monophosphate-activated protein kinase). AMP dependent protein kinase is a serine / threonine protein kinase. It is the key molecule of regulating energy metabolism and the main regulatory body of energy system in the body. A function in cells or tissues that regulates cell metabolism and protects cells from various external pressures by regulating downstream signaling molecules DVL3 and 尾 -catenin proteins. AMPK activators can be activated by. To inhibit the growth of tumor cells to achieve the effect of disease treatment. The molecular mechanism of how AMPK is activated and how it inhibits the proliferation of cancer cells remains unclear. We study the effects of AMPK activators on breast cancer cells and tissues. In order to elucidate the molecular mechanism of its action. To provide a reliable theoretical basis for future clinical treatment. Methods: collect and use Western. The expression levels of DVL3 and 尾 -catenin downstream molecules of AMP dependent protein kinase and the pathological characteristics of breast cancer cells were analyzed by Blot and immunohistochemistry. Western Blot method was used to detect MCF-7 loaded with DVL3 plasmid or shRNA-DVL3. MDA-MB-231. The changes of DVL3 expression and cell cycle in T-47D breast cancer cells and MCF-10 breast cancer cells. The AMPK activator metformin was used to treat breast cancer cells by in vitro scratch assay. Transwell assay and cell cloning assay were used to detect the development of breast cancer cells. A model mouse model of breast cancer transplantation was constructed with HE staining and Western. The expression levels of DVL3 and 尾 -catenin were detected by Blot. Results: there was overexpression of DVL3 in breast cancer. The expression of DVL3 in lymph node metastasis was significantly higher than that in primary tumor. The abnormal expression of DVL3 was positively correlated with the poor prognosis of breast cancer. DVL3 may play an important role in Wnt / 尾 -catenin signaling pathway. Significantly regulate the growth of cancer cells. AMPK activator may inhibit the growth of breast cancer cells. Reduce the expression of DVL3 and WNT / 尾 -catenin signal. Further study on breast cancer cells transfected with DVL3 or inhibit the expression of DLV3, we found that DLV3 involved in cell proliferation. AMPK activator inhibits the growth of breast cancer cells by reducing the expression of DVL3 and the level of 尾 -catenin during migration and apoptosis. Western blot and immunohistochemistry showed DVL. 3There was a significant correlation between 尾 -catenin expression and 尾 -catenin expression. Overexpression of DVL3 resulted in the increase of 尾 -catenin expression and over-growth of breast cancer cells. This suggests that DVL3 activated through the Wnt- 尾 -catenin pathway is associated with the development of breast cancer, in order to elucidate the mechanism. We used AMPK activator in vivo and in vitro to confirm whether there is a dependence on DVL3 and 尾 -catenin. Conclusion: DLV3 is not only overexpressed in breast cancer. And it is through the classic signal pathway to promote the proliferation, migration and invasion of breast cancer cells. Metformin, an activator of AMPK, can inhibit the expression of DVL3. Thus, the expression of 尾 -cateninine c-Myc and CyclinD1 protein was decreased, and the proliferation, migration and invasion of breast cancer cells were significantly inhibited. The results of this study are of high clinical value and can promote the use of metformin in the treatment of breast cancer through specific molecular mechanisms.
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R737.9

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;鈣粘素E水平低提示乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移[J];中國腫瘤;2000年08期

2 黃嘯原;用“印度閱兵”形容乳腺癌合適嗎?[J];診斷病理學(xué)雜志;2001年02期

3 張嘉慶,王殊,喬新民;乳腺癌的現(xiàn)狀和遠(yuǎn)景[J];中華外科雜志;2002年03期

4 張維彬,汪波,石靈春;中醫(yī)藥在現(xiàn)代乳腺癌治療中的運(yùn)用[J];中國中西醫(yī)結(jié)合急救雜志;2002年01期

5 薛志勇;食物與乳腺癌[J];山東食品科技;2002年04期

6 王旬果,王建軍,鄭國華;乳腺癌相關(guān)標(biāo)志物的研究進(jìn)展[J];山東醫(yī)藥;2002年33期

7 陸尚聞;;男人也患乳腺癌[J];環(huán)境;2003年12期

8 ;新技術(shù)清晰拍攝早期乳腺癌細(xì)胞[J];上海生物醫(yī)學(xué)工程;2005年04期

9 田富國;郭向陽;張華一;;乳腺癌診治研究新進(jìn)展[J];腫瘤研究與臨床;2005年S1期

10 馬濤,谷俊朝;血管內(nèi)皮生長因子與乳腺癌的臨床研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(外科學(xué)分冊);2005年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 于永利;;抗乳腺癌免疫治療融合蛋白[A];中國免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年

2 郭紅飛;;中醫(yī)治療乳腺癌的策略[A];江西省中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合腫瘤學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2012年

3 龐朋沙;伍會(huì)健;;乳腺癌治療靶標(biāo)的研究進(jìn)展[A];北方遺傳資源的保護(hù)與利用研討會(huì)論文匯編[C];2010年

4 陸勁松;邵志敏;吳炅;韓企夏;沈鎮(zhèn)宙;;新型維甲酸抑制乳腺癌細(xì)胞的生長及誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制研究[A];2000全國腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2000年

5 劉愛國;胡冰;;乳腺癌臨床治療進(jìn)展[A];安徽省抗癌協(xié)會(huì)第四次代表大會(huì)暨乳腺癌、肺癌專業(yè)委員會(huì)成立會(huì)議、安徽省腫瘤防治進(jìn)展學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2001年

6 張嘉慶;王殊;喬新民;;乳腺癌的現(xiàn)狀和遠(yuǎn)景[A];第一屆全國中西醫(yī)結(jié)合乳腺疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2002年

7 劉清俊;;乳腺癌綜合治療的新進(jìn)展[A];山西省抗癌協(xié)會(huì)第六屆腫瘤學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2003年

8 邵志敏;;21世紀(jì)乳腺癌治療的展望[A];第三屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)教育論文集[C];2004年

9 陳松旺;張明;;乳腺癌治療的回顧與展望[A];西部地區(qū)腫瘤學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

10 白霞;傅建新;丁凱陽;王兆鉞;阮長耿;;組織因子途徑抑制物-2在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)研究[A];第10屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 ;血檢有望揭示乳腺癌治療效果[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年

2 記者 鄭曉春;乳腺癌細(xì)胞擴(kuò)散基因被找到[N];科技日報(bào);2007年

3 中國軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤中心主任 宋三泰;乳腺癌有了新療法[N];中國婦女報(bào);2002年

4 王艷紅;抑制ＤＮＡ修補(bǔ)可消滅乳腺癌細(xì)胞[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年

5 詹建;乳腺癌飲食 兩個(gè)時(shí)期不一樣[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2006年

6 辛君;乳腺癌擴(kuò)散基因“浮出水面”[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2009年

7 記者 毛黎;美發(fā)現(xiàn)有效抑制乳腺癌細(xì)胞生長的分子[N];科技日報(bào);2010年

8 記者 吳春燕　通訊員 王麗霞;乳腺癌治療將有新途徑[N];光明日報(bào);2011年

9 王樂　沈基飛;我科學(xué)家發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致乳腺癌耐藥的新標(biāo)志物[N];科技日報(bào);2011年

10 劉霞;一種天然分子能阻止乳腺癌惡化[N];科技日報(bào);2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 鄒玉峰;DVL3和細(xì)胞外因子β-catenin的表達(dá)與乳腺癌細(xì)胞發(fā)展的相關(guān)性及其機(jī)制研究[D];南昌大學(xué);2017年

2 柴紅燕;疾病狀態(tài)下CYP4Z1和4A的生物學(xué)行為及其藥物干預(yù)研究[D];武漢大學(xué);2012年

3 李凱;ID(inhibitor of DNA binding)家族蛋白調(diào)控乳腺細(xì)胞的分化并影響乳腺癌的預(yù)后[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 江一舟;乳腺癌新輔助化療前后基因變異檢測及其功能論證[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

5 馬邵;酪氨酸去磷酸化增強(qiáng)表皮生長因子受體在乳腺癌治療中靶向性的研究[D];山東大學(xué);2015年

6 姚若斯;精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶PRMT7誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞發(fā)生表皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)換及轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制研究[D];東北師范大學(xué);2015年

7 侯培鋒;α-酮戊二酸二甲酯(DM-2KG)上調(diào)缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)誘發(fā)高致瘤性干細(xì)胞樣乳腺癌細(xì)胞機(jī)制研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2014年

8 李麗麗;分泌蛋白SHON調(diào)控乳腺癌細(xì)胞EMT的分子機(jī)制研究[D];東北師范大學(xué);2015年

9 陳麗艷;PI3K抑制劑聯(lián)合組蛋白去乙�；敢种苿⿲θ橄侔﹨f(xié)同殺傷作用的分子機(jī)制研究[D];延邊大學(xué);2015年

10 樸俊杰;乳腺癌差異基因篩選及PAIP1對其生物學(xué)行為的影響[D];延邊大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 杜文英;乳腺癌分子亞型的臨床與病理特點(diǎn)[D];鄭州大學(xué);2011年

2 賈曉菲;彩色多普勒超聲與乳腺癌病理及免疫組化指標(biāo)的相關(guān)性研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

3 靳文;乳腺癌全基因組DNA甲基化修飾的研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

4 吳坤琳;TLR4/MyD88信號(hào)通路對乳腺癌侵襲性影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

5 葛廣哲;樹，

本文編號(hào)：1474038