本文關(guān)鍵詞： 肝癌類干細(xì)胞 溶瘤腺病毒 Wnt信號(hào)通路 TSLC　出處：《生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展》2017年04期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全球第五大癌癥并成為癌癥死亡的主要原因,傳統(tǒng)治療早期肝癌取得了一定的進(jìn)展,但是癌癥的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和耐藥仍未得到根本解決,這些現(xiàn)象可通過癌癥干細(xì)胞理論(cancer stem cell,CSC)進(jìn)行解釋.本研究通過懸浮富集培養(yǎng)的方法,獲得了MHCC-97H細(xì)胞的三維立體球細(xì)胞(sphere cell),并檢測其干細(xì)胞特性,通過刪除5型腺病毒的E1A CR2區(qū)域24 bp堿基,并用Wnt活性轉(zhuǎn)錄元件TCF/TEF調(diào)控E1A基因表達(dá),同時(shí)插入抗癌基因TSLC1,得到了雙靶向溶瘤腺病毒Ad.wnt-E1A(△24 bp)-TSLC1,通過MTT、結(jié)晶紫染色實(shí)驗(yàn)、Hoechst、細(xì)胞劃痕、蛋白質(zhì)印跡技術(shù)、Transwell及免疫熒光技術(shù)檢測重組病毒對肝癌類干細(xì)胞的EMT(epithelial-mesenchymal transition)轉(zhuǎn)化、殺傷、凋亡以及遷移的作用.結(jié)果表明,懸浮富集培養(yǎng)的MHCC-97H sphere細(xì)胞具有自我更新、分化能力、靜息性以及耐藥性,高表達(dá)肝癌干細(xì)胞表面標(biāo)志物(如CD133等),重組病毒處理后表現(xiàn)出明顯的殺傷效果及抑制細(xì)胞遷移與侵襲的特性,靶向抑制MHCC-97H sphere細(xì)胞能力更強(qiáng)(P0.001),且重組病毒能有效誘導(dǎo)肝癌類干細(xì)胞通過caspase途徑發(fā)生凋亡.因此,重組病毒Ad.wnt-E1A(△24 bp)-TSLC1有可能成為靶向肝癌干細(xì)胞的治療藥物,具有一定的臨床應(yīng)用前景.
[Abstract]:Hepatocellular carcinoma (hepatocellular, carcinoma, HCC) is the world's fifth largest cancer and become the leading cause of cancer death, traditional treatment has made some progress, but the recurrence of cancer, metastasis and drug resistance have not been fundamentally solved, these phenomena can be through the cancer stem cell theory (cancer stem cell, CSC) this was explained. Through the research on the method of suspended enrichment culture, the three-dimensional sphere cells of MHCC-97H cells (sphere cell), and to detect the characteristics of stem cells, by removing the adenovirus type 5 E1A CR2 24 BP bases, and regulation of E1A gene expression by Wnt activated transcription element TCF/TEF, and inserted into the TSLC1 gene, obtained the double oncolytic adenovirus Ad.wnt-E1A (delta 24 BP) by MTT, -TSLC1, Hoechst, crystal violet staining experiments, cell scratch, Western blot, Transwell and immunofluorescence detection of recombinant virus Liver cancer stem cells EMT (epithelial-mesenchymal transition) transformation, killing, apoptosis and migration. The results show that the suspension of enrichment of MHCC-97H sphere cells with self-renewal, differentiation, and resting resistance, high expression of cancer stem cell surface markers (such as CD133), recombinant virus treatment showed characteristic killer the obvious effect and inhibition of cell migration and invasion, targeted inhibition of MHCC-97H sphere cells (P0.001), and the ability of recombinant virus can induce liver cancer stem cells through the caspase pathway to apoptosis. Therefore, recombinant virus Ad.wnt-E1A (delta 24 BP) -TSLC1 may be targeting liver cancer stem cell therapeutics, has a certain the prospect of clinical application.

【作者單位】： 浙江理工大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81272687) 浙江省自然科學(xué)基金(LZ13H160004,LY16H160056) 浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新活動(dòng)計(jì)劃(2016R406007)資助項(xiàng)目~~
【分類號(hào)】：R735.7
【正文快照】： 根據(jù)《2015中國癌癥統(tǒng)計(jì)》顯示,中國2015年有429.2萬例癌癥新發(fā)病例以及281.4萬例癌癥死亡病例.隨著發(fā)病率和死亡率的增加,癌癥已經(jīng)成為中國人群死亡的首要原因和主要的公共健康問題[1].肝癌是目前全球第五大常見的癌癥,并成為癌癥死亡的主要原因之一.目前通過手術(shù)、化療以及

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1473699