本文關(guān)鍵詞： 肝癌KLF17遷移 侵襲 預后　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學院》2016年博士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的：肝癌已成為全球第五種最常見的惡性腫瘤,在中國肝癌發(fā)病率水平男性居第5位,女性居第6位；死亡率水平男性居第2位,女性居第5位。我國肝癌患者多數(shù)有肝炎、肝硬化病史,臨床80%左右患者因各種原因不能手術(shù),而且術(shù)后高復發(fā),高轉(zhuǎn)移,成為肝癌患者治療中難以解決的問題。而惡性腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的能力與上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-Mesenchymal Transition, EMT)密切相關(guān),我們計劃研究肝癌細胞的EMT調(diào)控機制,為肝癌治療提供新的可能的治療靶點。Hepll和Hep12是從同一肝癌患者提取的兩株分別具有上皮或者間質(zhì)樣細胞性質(zhì)的腫瘤細胞,Hepl2的遷移和侵襲能力顯著高于Hep11,而在Hep11中轉(zhuǎn)錄因子KLF17表達顯著高于Hepl2,在乳腺癌,胃癌,食道癌中KLF17都是抑癌基因,所以我們計劃研究KLF17在肝癌細胞中作用及作用機制,以及KLF17的表達和肝細胞癌患者預后的關(guān)系。方法：利用SiRNA技術(shù)干擾KLF17在肝癌細胞系中的表達,然后利用Transwell法檢測KLF17干擾對肝癌細胞系遷移和侵襲能力的影響。利用Western Blot口定量PCR技術(shù)檢測KLF17干擾后上皮和間質(zhì)相關(guān)基因在mRNA和蛋白水平的表達,明確KLF17對上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和遷移侵襲的影響。選擇2009年1月至2011年12月在北京協(xié)和醫(yī)院肝膽外科手術(shù)的肝細胞肝癌患者,有完整隨訪資料的患者,免疫組化法檢測KLF17在肝細胞癌組織中的表達水平,評估其和患者DFS,OS之間的關(guān)系。結(jié)果：研究發(fā)現(xiàn)在3個肝癌細胞系中,KLF17干擾后細胞系的遷移和侵襲能力顯著增加,同時發(fā)現(xiàn)其上皮基因表達下調(diào),間質(zhì)基因表達上調(diào)。在36名可評估的肝癌患者中其中有19人(52.8%)為KLF17高表達,17人(47.2%)低表達。Cox回歸分析發(fā)現(xiàn)巴塞羅那分期和KLF17表達水平對DFS和OS有影響。單因素分析KLF17對預后的影響,發(fā)現(xiàn)KLF17免疫組化低表達的患者的DFS為23.4±4.9個月(95%可信區(qū)間為13.2-32.3個月),高表達的DFS為39.3±4.2個月(95%可信區(qū)間為31.1~47.5個月),p0.05。KLF17評分為低表達患者的OS為35.2±4.2個月(95%可信區(qū)間27.0-43.4個月)高表達患者的OS為46.9±3.2(95%可信區(qū)間40.1~53.2個月),KLF17高表達和低表達的肝細胞肝癌患者DFS和OS均有顯著性差異(p0.05)。結(jié)論：本研究發(fā)現(xiàn)KLF17調(diào)控肝癌細胞遷移和侵襲,可能是通過影響上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化；在肝細胞癌患者中,KLF17表達高是獨立的預后較好的因素。
[Abstract]:Objective: hepatocellular carcinoma (HCC) has become the most common malignant tumor in the world. The incidence of HCC in China is the fifth in males and the 6th in females. The mortality level was the second in males and the 5th in females. The majority of HCC patients in China had hepatitis and cirrhosis history. About 80% patients could not be operated on for various reasons and had high recurrence and high metastasis after operation. The ability of malignant tumor invasion and metastasis and epithelial-interstitial transformation (EMT) are difficult to solve in patients with liver cancer. Epithelial-Mesenchymal Transition. We plan to study the mechanism of EMT regulation in hepatoma cells. Hepll and Hep12 are two tumor cells with epithelial or interstitial cell nature extracted from the same HCC patients. The migration and invasion ability of Hepl2 was significantly higher than that of Hep11, while the expression of transcription factor KLF17 in Hep11 was significantly higher than that in Hepl2, and in breast cancer and gastric cancer. KLF17 is a tumor suppressor gene in esophageal cancer, so we plan to study the role and mechanism of KLF17 in liver cancer cells. Methods: SiRNA technique was used to interfere the expression of KLF17 in hepatocellular carcinoma cell line. Then the effect of KLF17 interference on the migration and invasion of hepatoma cell lines was detected by Transwell assay. Blot quantitative PCR was used to detect the expression of epithelial and interstitial genes in mRNA and protein after KLF17 interference. To determine the effect of KLF17 on epithelial interstitial transformation and migration and invasion, we selected patients with hepatocellular carcinoma (HCC) who underwent hepatobiliary surgery from January 2009 to December 2011 in Peking Union Hospital. Immunohistochemical method was used to detect the expression of KLF17 in hepatocellular carcinoma (HCC) and to evaluate the expression of KLF17 and DFS in the patients with complete follow-up data. Results: it was found that the migration and invasion of three hepatoma cell lines were increased after KLF17 interference, and the expression of epithelial genes was down-regulated. The expression of mesenchymal genes was up-regulated. Among the 36 patients with liver cancer, 19 (52.8%) had high expression of KLF17. Low expression. Cox regression analysis showed that Barcelona stage and KLF17 expression level had influence on DFS and OS. Univariate analysis showed that KLF17 had influence on prognosis. It was found that the DFS of the patients with low expression of KLF17 was 23.4 鹵4.9 months and 95% confidence interval was 13.2-32.3 months. The DFS with high expression was 39.3 鹵4.2 months and 95% confidence interval was 31.1-47.5 months). The OS of low expression patients with p0.05.KLF17 score was 35.2 鹵4.2 months and 95% confidence interval was 27.0-43.4 months. The OS of high expression patients was 46.9 鹵3.2 95% confidence interval (40.1 ~ 53.2 months). There was significant difference between DFS and OS in HCC patients with high and low expression of KLF17. Conclusion: in this study, KLF17 regulates the migration and invasion of HCC cells. It may be through the influence of epithelial mesenchymal transformation; High expression of KLF17 is an independent prognostic factor in hepatocellular carcinoma.
【學位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學院
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.7

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本文編號：1463411