本文關(guān)鍵詞：TIPE2通過負(fù)性調(diào)控β-catenin信號抑制胃癌細(xì)胞遷移、侵襲的作用　出處：《蘇州大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 胃癌 腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白8樣蛋白2 遷移 侵襲 β-鏈環(huán)蛋白

【摘要】：目的:研究腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白8樣蛋白2(TNFAIP8L2)(TIPE2)是否可以通過下調(diào)β-catenin信號抑制胃癌細(xì)胞的遷移、侵襲。方法:將本室構(gòu)建的GFP標(biāo)記的Ad VTIPE2及其空對照Ad V腺病毒在293人胚腎細(xì)胞中擴增后,用氯化銫(Cs Cl)密度梯度超速離心純化,并用有限稀釋法根據(jù)293細(xì)胞GFP的表達(dá)進行腺病毒滴度測定。然后將Ad VTIPE2、對照空病毒Ad V用篩選的腺病毒最佳感染劑量10MOI分別感染AGS(野生型p53)、HGC-27(突變型p53)兩種人胃癌細(xì)胞株,獲得AGS-Ad VTIPE2(簡寫為AGS-TIPE2)vs AGS-Ad V(簡寫為AGS-Mock);HGC-27-Ad VTIPE2(簡寫為HGC-27-TIPE2)vs HGC-27-Ad V(簡寫為HGC-27-Mock)。運用RT-PCR、Western blot方法檢測腺病毒介導(dǎo)的TIPE2基因在AGS、HGC-27胃癌細(xì)胞中的表達(dá)。采用劃痕實驗、Transwell侵襲實驗檢測腺病毒介導(dǎo)的TIPE2過表達(dá)對AGS、HGC-27胃癌細(xì)胞體外遷移、侵襲的作用,并利用Western blot方法檢測TIPE2對胃癌細(xì)胞AKT-GSK3β-β-catenin軸相關(guān)蛋白包括p-AKT、AKT、p-GSK3β、GSK3β、β-catenin表達(dá)的影響,及進一步用免疫熒光激光共聚焦手段分析TIPE2對胃癌細(xì)胞β-catenin的影響。結(jié)果:1)獲得了高滴度的Ad VTIPE2及其對照空病毒Ad V,其效價分別可達(dá)6.3X1010、1.2X1011 Tu/ml;2)腺病毒介導(dǎo)的TIPE2過表達(dá)能明顯抑制AGS、HGC-27人胃癌細(xì)胞的遷移(AGS-TIPE2較AGS-Mock的相對遷移能力為64.8%;HGC-27-TIPE2較HGC-27-Mock的相對遷移能力為78.6%)、侵襲能力(AGS-TIPE2較AGS-Mock的相對侵襲能力為52.7%;HGC-27-TIPE2較HGC-27-Mock的相對侵襲能力為69.0%);3)TIPE2能夠下調(diào)胃癌細(xì)胞p-AKT、p-GSK3β、β-catenin的水平及抑制β-catenin從胞漿進入細(xì)胞核、下調(diào)β-catenin的細(xì)胞核水平。結(jié)論:TIPE2能夠通過調(diào)控AKT-GSK3β-β-catenin軸下調(diào)β-catenin信號抑制胃癌轉(zhuǎn)移。
[Abstract]:AIM : To study whether the tumor necrosis factor - induced protein 8 - like protein 2 ( TNFAIP8L2 ) ( TI2 ) can inhibit the migration and invasion of gastric cancer cells by downregulating the 尾 - catenin signal . Conclusion : TI2 can regulate the 尾 - catenin signal to inhibit the metastasis of gastric cancer by regulating the 尾 - catenin axis of T - GSK3 尾 - catenin .

【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2

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本文編號：1416584