本文關鍵詞：下調(diào)SNAIL對TRAIL誘導肝癌細胞凋亡的影響及作用機制的研究　出處：《青島大學》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：目的:1)驗證利用RNA干擾技術沉默SNAIL后可抑制肝癌細胞的生長。2)探討沉默SNAIL對TRAIL誘導肝癌細胞凋亡的影響及作用機制。方法:篩選最有效的慢病毒載體攜帶sh RNA下調(diào)SNAIL及構建腺病毒載體攜帶TRAIL。分別利用定量PCR和western blotting技術來檢測SNAIL以及TRAIL在m RNA水平和蛋白質(zhì)水平的表達情況。并分別用MTT方法及Hoechst技術檢測肝癌細胞的存活情況和凋亡情況。為明確沉默SNAIL如何增加TRAIL誘導肝癌細胞凋亡的敏感性,利用western blotting技術檢測在Hu H-7細胞系中p53,Bcl-x L,c IAP2,survivin和Raf-1蛋白的表達情況。之后通過抑制上述基因的表達,用Hoechst技術檢測Hu H-7細胞系的凋亡情況。結果:以慢病毒作為載體攜帶sh RNA感染多種肝癌細胞系后能夠持續(xù)并有效的抑制人肝癌細胞系中SNAIL的表達,而用腺病毒攜帶TRAIL感染多種肝癌細胞系后能夠使TRAIL在肝癌細胞中持續(xù)并穩(wěn)定的表達。SNAIL沉默能通過增加肝癌細胞對TRAIL誘導凋亡的敏感性導致細胞凋亡增加。此外,實驗發(fā)現(xiàn)在Hu H-7細胞系中沉默SNAIL后p53蛋白表達上調(diào),而Bcl-x L,c IAP2,survivin和Raf-1蛋白的表達是下調(diào)的。然而除了c IAP2蛋白以外,下調(diào)Bcl-x L,survivin和Raf-1任一蛋白都有利于促進TRAIL誘導肝癌細胞凋亡這一作用。結論:SNAIL沉默后可通過上調(diào)p53蛋白和調(diào)節(jié)NF-?B通路相關因子(Bcl-x L,survivin和Raf-1)來增強TRAIL誘導肝癌細胞凋亡。
[Abstract]:Objective : 1 ) To investigate the effect of silencing SNAIL on the apoptosis of human hepatocellular carcinoma cells ( HCC ) , and to investigate the effect of silencing SNAIL on the apoptosis of human hepatocellular carcinoma cells .

【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7

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