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石墨烯-聚乙二醇-阿霉素復合物的制備及對淋巴瘤細胞的毒性研究

發(fā)布時間:2017-12-28 03:28

  本文關鍵詞:石墨烯-聚乙二醇-阿霉素復合物的制備及對淋巴瘤細胞的毒性研究 出處:《青島大學》2015年碩士論文 論文類型:學位論文


  更多相關文章: 石墨烯 阿霉素 淋巴瘤細胞 細胞毒性 細胞凋亡


【摘要】:目的以淋巴瘤細胞系(Raji細胞)作為細胞模型,研究石墨烯-聚乙二醇-阿霉素復合物對淋巴瘤細胞的毒性,為納米藥物的應用提供理論依據(jù)。方法1、首先采用化學方法制備石墨烯-聚乙二醇(GO-PEG),然后將抗腫瘤藥物阿霉素(DOX)負載到GO-PEG上獲得石墨烯-聚乙二醇-阿霉素復合物(GO-PEG-DOX)。并通過透射電鏡(TEM)、傅立葉分析變換紅外光譜(FTIR)分別對GO及GO-PEG進行表征,通過紫外分光光度計(UV-Vis)檢測GO-PEG負載DOX的載藥程度。2、Raji細胞暴露于不同濃度的GO-PEG/GO-PEG-DOX(0-100μg/ml)中,分別在6h、12h、24h后,采用CCK-8法檢測其對淋巴瘤細胞的毒性作用,并采用Annexin V-FITC法檢測了GO-PEG(50μg/ml)/DOX(2μg/ml)/GO-PEG-DOX對淋巴瘤細胞的細胞凋亡的影響。結果成功制備獲得石墨烯-聚乙二醇及石墨烯-聚乙二醇-阿霉素復合物,并證明其具有良好水溶性;實驗結果顯示石墨烯-聚乙二醇對淋巴瘤細胞的細胞毒性具有一定的時間和劑量依賴性,細胞毒性與石墨烯-聚乙二醇的濃度及接觸時間呈正相關關系。GO-PEG組與空白對照組相比,P0.05,差異具有統(tǒng)計學意義。GO-PEG-DOX組與DOX組相比較,P=0.02,在統(tǒng)計學上具有顯著性差異。但GO-PEG-DOX組與去除同濃度GO-PEG影響后與單純阿霉素組相比較,p0.05,在統(tǒng)計學上無顯著性差異。此實驗結果表明GO-PEG不降低阿霉素對淋巴瘤細胞的細胞毒性;細胞凋亡檢測結果顯示阿霉素組/石墨烯-聚乙二醇-阿霉素組與正常對照組相比較,P均小于0.05,差異具有統(tǒng)計學意義。阿霉素組與石墨烯-聚乙二醇-阿霉素組比較顯示P0.05,在統(tǒng)計學上無顯著性差異。結論石墨烯-聚乙二醇對淋巴瘤細胞具有低毒性,石墨烯-聚乙二醇不降低阿霉素對淋巴瘤細胞的毒性。阿霉素可誘導淋巴瘤細胞發(fā)生細胞凋亡,但石墨烯-聚乙二醇不誘導惡性淋巴瘤細胞的凋亡,不影響阿霉素誘導細胞凋亡的作用。
[Abstract]:Objective to study the toxicity of graphene polyethylene glycol doxorubicin complex on lymphoma cells, using lymphoma cell line (Raji cell) as a cell model, and provide a theoretical basis for the application of nanomedicine. Method 1, first, we use graphene polyethylene glycol (GO-PEG) to prepare graphene polyethylene glycol (DOX). Then, the antitumor drug adriamycin (DOX) is loaded onto GO-PEG to obtain graphene polyethylene glycol doxorubicin complex (GO-PEG-DOX). The GO and GO-PEG were characterized by transmission electron microscopy (TEM), Fu Liye transform infrared spectroscopy (FTIR), and the loading degree of GO-PEG loaded DOX was detected by ultraviolet spectrophotometer (UV-Vis). 2, Raji cells were exposed to different concentrations of GO-PEG/GO-PEG-DOX (0-100 g/ml), 6h, 12h and 24h respectively after detecting the toxic effects on lymphoma cells by CCK-8 method, and using Annexin V-FITC method to detect the GO-PEG (50 g/ml) /DOX (2 g/ml) effects on cell apoptosis of lymphoma cell /GO-PEG-DOX. The result is successfully prepared by graphene and graphene - polyethylene glycol - polyethylene glycol doxorubicin complex, and prove that it has good water solubility; experimental results show that the graphene / PEG on lymphoma cell cytotoxicity with time and dose dependence, concentration and contact time was positively related with the cytotoxicity of graphene peg. The difference of P0.05 in group GO-PEG was statistically significant compared with that of blank control group. Group GO-PEG-DOX compared with group DOX, P=0.02, statistically significant difference. However, compared with the simple adriamycin group, there was no significant difference in P0.05 between the GO-PEG-DOX group and the simple adriamycin group after the removal of the same concentration of GO-PEG. The experimental results showed that GO-PEG did not reduce the cytotoxicity of adriamycin on lymphoma cells. The apoptosis assay showed that the P of doxorubicin group / graphene polyethylene glycol doxorubicin group was less than 0.05 compared with the normal control group, and the difference was statistically significant. There was no significant difference in P0.05 between adriamycin group and graphene PEG - adriamycin group. Conclusion graphene polyethylene glycol has low toxicity to lymphoma cells, and graphene polyethylene glycol does not reduce the toxicity of adriamycin to lymphoma cells. Doxorubicin can induce apoptosis in lymphoma cells, but graphene polyethylene glycol does not induce apoptosis in malignant lymphoma cells, and does not affect the apoptosis induced by adriamycin.
【學位授予單位】:青島大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R733.1

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