本文關鍵詞：組蛋白去乙�；窰DAC9在膠質(zhì)瘤細胞增殖中的作用及機制研究　出處：《西南大學》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：本文旨在研究組蛋白去乙�；窰DAC9對膠質(zhì)瘤細胞增殖的影響。組蛋白去乙�；窰DAC9是組蛋白去乙酰化酶Ⅱ家族的一員,其含有去乙�；富钚越Y(jié)構域,鋅脂結(jié)構域,MEF2結(jié)構域,絲氨酸結(jié)合位點及核定位信號。HDAC9可以催化組蛋白H3K16ac的去乙酰化及其他非組蛋白的去乙�；＝陙戆l(fā)現(xiàn)HDAC9在多種腫瘤中行使不同的功能,其大致可以分為抑癌和致癌兩個方面,具體則由腫瘤細胞的遺傳背景決定的。腫瘤細胞的惡性增殖往往和細胞周期進程的改變密切相關,EGFR信號通路在細胞周期的調(diào)控中發(fā)揮重要作用。EGFR一經(jīng)激活,其下游的PI3K/AKT和Ras-ERK通路隨即被激活,進而加速細胞周期進程。轉(zhuǎn)錄共激活因子TAZ近年來被發(fā)現(xiàn)和多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關。TAZ可以促進細胞周期、促進遷移和抑制細胞凋亡。研究發(fā)現(xiàn)組蛋白去乙�；敢种苿┛梢砸种芓AZ的表達進而抑制細胞增殖。但是HDAC9與TAZ之間的聯(lián)系尚未有報道。我們采用qRT-PCR和和Western blot技術檢測HDAC9在不同膠質(zhì)瘤細胞,利用慢病毒介導的shRNA干擾技術在細胞系U87和LN229中對HDAC9蛋白的表達進行下調(diào),利用MTT, BrdU標記技術檢測細胞增殖情況,建立荷瘤小鼠模型檢測HDAC9在個體水平對膠質(zhì)瘤細胞增殖的影響,利用流式細胞儀檢測HDAC9對細胞周期的調(diào)控,采用Western blot技術檢測信號通路EGFR/AKT/ERK的變化情況,利用免疫共沉淀技術檢測HDAC9與TAZ的相互作用情況,最后通過在HDAC9干擾細胞中過表達TAZ,檢測TAZ對HDAC9干擾引起的細胞增殖變化的恢復作用。本文初步研究了HDAC9在膠質(zhì)瘤細胞增殖中的作用及其可能的機制研究。實驗結(jié)果表明HDAC9蛋白在膠質(zhì)瘤細胞系U87、LN229、A172及原代惡性膠質(zhì)瘤細胞T0807和T1018均有顯著的表達。在U87和LN229細胞系中,利用慢病毒介導的shRNA干擾對HDAC9蛋白的表達進行下調(diào),細胞增殖實驗發(fā)現(xiàn)細胞增殖受到明顯抑制,同時流流式細胞儀檢測細胞周期阻滯在G1期,并伴隨有相關周期蛋白cyclin E和CDK2表達的下調(diào),相關的EGFR信號通路受到抑制,免疫共沉淀結(jié)果表明HDAC9可以和TAZ相互結(jié)合,同時HDAC9干擾下調(diào)了TAZ的表達。進一步的實驗表明,過表達TAZ可以阻斷由HDAC9干擾引起的相關效應,從而初步確定了HDAC9促進細胞增殖是通過TAZ介導的EGFR信號通路的激活調(diào)節(jié)的。
【學位授予單位】：西南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R739.41

【共引文獻】

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1 鄧瓊英;廣西仫佬族的體質(zhì)人類學和群體遺傳學研究[D];廣西醫(yī)科大學;2007年

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本文編號：1328026