發(fā)布時(shí)間：2017-12-23 08:06

  本文關(guān)鍵詞：PRMT2及PRMT2β對(duì)乳腺癌MCF-7細(xì)胞糖酵解代謝的影響　出處：《南華大學(xué)》2016年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 乳腺癌 蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶2 糖酵解

【摘要】：目的:明確蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶2(protein arginine methyltransferase 2,PRMT2)及其剪接體PRMT2β對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞糖酵解代謝途徑的影響,并初步探討其可能的機(jī)制。方法:以MCF-7-PRMT2穩(wěn)定細(xì)胞株和MCF-7-PRMT2β穩(wěn)定細(xì)胞株為研究對(duì)象,加四環(huán)素48h后誘導(dǎo)PRMT2及PRMT2β過(guò)表達(dá)(over expression,OE)為實(shí)驗(yàn)組,即+DOX組;未加四環(huán)素處理為陰性對(duì)照組(negative control,NC),即-DOX組。方法如下:1.通過(guò)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)照組中MCF-7細(xì)胞的葡萄糖消耗量、乳酸生成量和ATP生成量的差異,初步確定其對(duì)MCF-7細(xì)胞糖酵解的影響。2.通過(guò)蛋白質(zhì)免疫印跡法,從蛋白表達(dá)水平分析MCF-7細(xì)胞中,過(guò)表達(dá)PRMT2及PRMT2β對(duì)糖酵解途徑中關(guān)鍵酶HK、PK、PFK、LDH、PDH表達(dá)的影響。3.通過(guò)對(duì)糖酵解關(guān)鍵酶HK、PK、PFK、LDH活性進(jìn)行測(cè)定,進(jìn)一步確定PRMT2及PRMT2β對(duì)糖酵解途徑的影響。結(jié)果:1.檢測(cè)結(jié)果顯示在人乳腺癌細(xì)胞MCF-7中,過(guò)表達(dá)PRMT2及PRMT2β后,葡萄糖消耗量、乳酸生成量、ATP生成量明顯減少,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.Western Blot結(jié)果顯示:+DOX組中的糖酵解關(guān)鍵酶HK2、PKM2、PFKP、PFKL、LDHA的表達(dá)均下降,PDH的表達(dá)上升,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而HK1、PKM1/2表達(dá)未見(jiàn)明顯變化,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.通過(guò)對(duì)細(xì)胞內(nèi)酶活性的檢測(cè)發(fā)現(xiàn),相對(duì)于-DOX組而言,+DOX組中的糖酵解關(guān)鍵酶HK、PK、PFK、LDH的活性都明顯降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:PRMT2及PRMT2β能夠抑制乳腺癌MCF-7細(xì)胞的糖酵解代謝過(guò)程。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R737.9

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本文編號(hào)：1323078