長鏈非編碼RNA-PVT1在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及意義
發(fā)布時(shí)間:2017-12-14 11:14
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【摘要】:目的大腸癌是嚴(yán)重威脅我國人民健康的惡性腫瘤之一。研究表明長鏈非編碼RNA在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用,關(guān)于非編碼RNA在結(jié)直腸癌中的研究已成為當(dāng)前的熱點(diǎn)。長鏈非編碼RNA-PVT1位于染色體8q24.21,是一個與腫瘤高度相關(guān)的區(qū)域,研究發(fā)現(xiàn)沉默Pvt1促進(jìn)了細(xì)胞凋亡,且在結(jié)直腸癌細(xì)胞中Pvt1的表達(dá)水平是升高的。因此檢測結(jié)直腸癌組織長鏈非編碼RNA-PVT1的表達(dá)水平,分析比較PVT1表達(dá)水平與癌組織分化程度、病理分期的關(guān)系,為尋找新的結(jié)直腸癌標(biāo)記物和治療靶點(diǎn)提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法第一部分實(shí)驗(yàn):收集大腸癌病人的臨床標(biāo)本,分為癌組織及癌旁組織,提取相應(yīng)組織的總RNA,取5ul總RNA提取液,使用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),合成雙鏈互補(bǔ)c DNA;用SYBR?Green Realtime PCR Master Mix試劑盒對PVT-1的轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行檢測。第二部分實(shí)驗(yàn):瓊脂糖凝膠電泳取5μl RT-PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,1μl 6×loading buffer混合上樣,120V電壓電泳20 min,用Baygene BG-gds Auto520凝膠成像系統(tǒng)分析儀紫外光檢測照相。結(jié)果第一部分:76份病例標(biāo)本中癌組織中PVT1表達(dá)水平是癌旁組織的3.1倍。低分化組與中分化組癌組織中目的基因表達(dá)水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,低分化組高于中分化組(P0.05)!癐II期、IV期”組癌組織中PVT-1表達(dá)水平明顯高于“0期、I期、II期”組(P0.01)。II期組患者癌組織中PVT-1表達(dá)水平明顯高于I期,III期組癌組織中PVT-1表達(dá)水平明顯高于II期,差異皆有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。PVT1表達(dá)水平與性別、年齡無關(guān)。第二部分:凝膠電泳試驗(yàn)證實(shí)癌組織中的c DNA含量高于癌旁組織。結(jié)論1.癌組織中Pvt1的表達(dá)水平高于癌旁組織;2.癌組織中Pvt1的表達(dá)水平與組織分化類型呈負(fù)相關(guān);3.Pvt1的表達(dá)水平與病理分期相關(guān),分期越晚表達(dá)水平越高。
【學(xué)位授予單位】:濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R735.34
【參考文獻(xiàn)】
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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條
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2 史小雨;結(jié)直腸癌變相關(guān)基因表達(dá)譜的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年
,本文編號:1287683
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